Cateterismo delle anse intestinali nei ruminanti
Summary
Descriviamo un nuovo metodo chirurgico per catheterizing 'anse intestinali' all'interno del ileo di pecore. Una volta che gli animali hanno recuperato da un intervento chirurgico e hanno eliminato gli antibiotici e analgesici, terapie multiple possono essere depositati direttamente in loop tramite i cateteri.
Abstract
L'intestino è una struttura complessa che è coinvolto non solo l'assorbimento delle sostanze nutritive, ma anche agisce come una barriera tra l'individuo e il mondo esterno. Come tale, l'intestino ha un ruolo fondamentale nella immunosorveglianza e protezione da patogeni enterici. Indagare intestinale fisiologia e immunologia impiega comunemente 'anse intestinali' come modello sperimentale. La maggior parte di questi modelli loop sono procedure chirurgiche mancato recupero che lo studio a breve termine (<24 ore), i cambiamenti a livello intestinale (1-3). Abbiamo già creato un modello di ciclo intestinale di recupero per misurare specificamente a lungo termine (<6 mesi), alterazioni immunologiche nell'intestino di esposizione pecore seguito ai vaccini, i coadiuvanti, e virus (4). Questa procedura trattamenti localizzati ad uno specifico 'loop', che ci permette di assaggiare questa zona dell'intestino. Un svantaggio di questo metodo è la singola finestra di opportunità di somministrare trattamenti (cioè al momento della chirurgia). Inoltre, campioni sia della mucosa intestinale e il contenuto del lume può essere presa solo al termine del progetto. Altre limitazioni salienti del modello di cui sopra sono che la manipolazione chirurgica e necessaria post-operatoria (somministrazione ad esempio antibiotici e analgesici) possono direttamente influenzare il trattamento stesso e / o alterare la funzione immunitaria, quindi i risultati confondenti. Pertanto, abbiamo modificato il nostro modello intestinale ciclo con l'inserimento di cateteri a lungo termine in loop. Pecore recuperare pienamente dalla procedura, e non sono influenzate dalla cateteri esteriorizzato. In particolare, la creazione di cateteri in loop ci permette di introdurre trattamenti multipli in un intervallo esteso, a seguito di recupero da un intervento chirurgico e la clearance dei farmaci somministrati durante l'intervento chirurgico e il periodo post-operatorio.
Protocol
Discussion
In questa procedura, siamo stati in grado di stabilire con successo cateteri nelle anse intestinali stabilito nella ileo di pecore. Aderendo a rigorosi assistenza post-operatoria, gli animali rapidamente recuperato dalla procedura e ripreso la normale attività 5-7 giorni dopo l'intervento chirurgico. Abbiamo determinato che la creazione di cateteri all'interno di cicli non influenza la funzione della mucosa intestinale o immunitaria (dati non riportati) e gli animali possono vivere per almeno 8 settimane dopo l…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
La ricerca non avrebbe potuto essere completato senza la dedizione e gli sforzi di molte persone alla Agricoltura e Agri-Food Canada Research Centre, Lethbridge, Alberta, Canada. A tale proposito, ringraziamo: Tara Shelton per il pre-e post-operatoria la cura degli animali, la preparazione chirurgica ed anestesiologia, analisi di campioni, e l'assistenza con video immagini; Randy Wilde e Estela Costa per le cure pre e post-operatoria; Jenny Gusse per l'analisi del campione; Byron Lee per l'immagine trequarti, e Brian Egland per le pecore allevamento. Ringraziamo anche Brent Selinger (Dipartimento di Scienze Biologiche, Università di Lethbridge) per la fornitura di apparecchiature video e consigli, così come altre forme di assistenza (ad esempio produzione esecutiva) e la Re-Curriculum Development Centre, Università di Lethbridge per competenza videografia. Questo studio è stato sostenuto in parte da finanziamenti della Foods avanzata e di rete Materiali (GDI), il Canada-Alberta settore dei fondi per lo sviluppo di manzo (GDI), e l'agricoltura e Agri-Food Canada (GDI e JPK).
Materials
| Category / Item Number | Company | Catalogue |
| Surgeon supplies | ||
| Surgical gloves | WDDCa | 103091 |
| Surgical mask | WDDC | MAX53013 |
| Surgical gown | CDMVb | 3365 |
| OB Apron | WDDC | 900062 |
| Surgical cap | WDDC | 903271 |
| EZ Scrub brush | WDDC | BDC377479 |
| Anesthesia and drugs | ||
| Anesthetic machine | Boyle | — |
| Sodasorb | WDDC | 108638 |
| Laryngoscope | WDDC | — |
| Laryngoscope blade (Miller blade #4) | WDDC | 902667 |
| Endotracheal tube (7.0 – 8.5 mm) | WDDC | — |
| Lidocaine endotracheal spray | WDDC | 103364 |
| Acepromazine | WDDC | AUS01020 |
| Glycopyrrolate | WDDC | SAB2880 |
| Butorphanol tartrate | WDDC | AYE304541 |
| Diazepam | WDDC | sab790 |
| Thiopental sodium | WDDC | 103508 |
| Epinephrine hydrochloride | WDDC | 103856 |
| Doxapram | Strathcona Pharmacy | — |
| Isoflurane | WDDC | 100339 |
| Hemostam | WDDC | 103857 |
| Flunixin | WDDC | sch140100 |
| Enrofloxacin | WDDC | hll0049 |
| Metronidazole | WDDC | 101653 |
| Ampicillin | WDDC | NOV67185-6 |
| Cefazolin | WDDC | nov69397 |
| Surgical equipment and supplies | ||
| Electroscapel | Macan | MV8 |
| Heating mat | Kane | PHMD-48 |
| Stomach tube (Nalgene tubing 5/16″ ID) | Fisher Scientific | — |
| Needle driver | WDDC | 108338 |
| Addison brown forcep | WDDC | 911075 |
| Rat tooth forcep | CDMV | 5275 |
| Kelly forcep | WDDC | 901133 |
| Mosquito hemostat | WDDC | 108471 |
| Carmalt forcep | WDDC | 901225 |
| Scalpel handle | WDDC | 900285 |
| Scalpel blade #22 | WDDC | 900511 |
| Metzenbaum scissor | WDDC | 901166 |
| Sharp-sharp scissor | WDDC | 108264 |
| Towel clamp | WDDC | 901213 |
| Allis tissue forcep | WDDC | 901201 |
| Doyen’s forcep | WDDC | 904226 |
| Stainless steel bowl | WDDC | 903601 |
| Stainless steel trocar (curved) | Local supplier | — |
| Catheter introducer | WDDC | 11440 |
| Surgical towel | CDMV | 7972 |
| Disposable drape | WDDC | 900035 |
| Steri drape | CDMV | 2323 |
| Drape (40 x 40 cm) | CDMV | 8358 |
| Surgical drape (7″ x 11 ¼” opening) | CDMV | 2694 |
| Vicryl (2-0) | WDDC | JJMJ333H |
| Silk 2-0 | WDDC | 105248 |
| Catgut #3 | WDDC | CSL547-2070 |
| Supramid #1 | WDDC | CSL547-3040 |
| Needles (cutting and non-cutting) | WDDC | — |
| Catheter | ||
| Silastic tubing (0.040″ ID, 0.085″ OD) | Fisher Scientific | 11-189-15D |
| Orbeseal ointment | WDDC | 106344 |
| Clear silicone (732 multi-purpose sealant) | Local supplier | — |
| Blunt end needle | WDDC | 905035 |
| Marker (permanent industrial) | Local supplier | — |
| Catheter pouch (constructed of Elastoplast 7.5 cm) | WDDC | 104094 |
| Bandages | ||
| Hospital tape (2″) | WDDC | 103842 |
| Hospital tape (1″) | WDDC | VLMRENF20 |
| Gauze sponge 4×4 | WDDC | 107551 |
| Gauze cling | WDDC | 107633 |
| Elastoplast 7.5cm | WDDC | 104094 |
| Elastoplast rippable bandage | WDDC | 104093 |
| Needles and syringes | ||
| Syringe (60 ml) | WDDC | 104004 |
| Syringe (10 ml) | WDDC | bdc301604 |
| 25G Needle | WDDC | BDC305122 |
| 20G Needle | WDDC | BDC305175 |
| 18G Needle | WDDC | 903353 |
| Intravenous | ||
| Intracath IV catheter (16G 8″) | WDDC | bdc3831621 |
| IV administration set (10 drop) | WDDC | 101797 |
| 0.9% NaCl solution | WDDC | BAXJB1322P |
| Plasmalyte 148 solution | WDDC | BAXJB2534 |
| Dextrose | WDDC | MCT60190 |
| Peristaltic pump | Cole Parmer | 7524-10 |
| Livestock identification tag cement | Local supplier | — |
| Sanatizers / disinfectants | ||
| Germex solution | WDDC | mtc60270 |
| Isopropyl alcohol | WDDC | 104590 |
| Stanhexidine cleanser | WDDC | 109248 |
| Prepodyne solution | WDDC | 105710 |
| Prepodyne scrub | WDDC | 105711 |
aWestern Drug Distribution Center LTD, Edmonton, AB.
bThe Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE.
References
- Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
- Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
- Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
- Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal ‘loops’ provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
- Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer’s patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
- Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer’s patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).
