Summary

Nöron ve Glia Geliştirme Çalışmaları Rat Beyin Agrega Kültürler hazırlanması

Published: September 30, 2009
doi:

Summary

Embriyonik fare beyin agrega kültür sistemi için protokolleri açıklanmıştır. Agrega multipotent atalarıdır geliştirmek ve nöronlar, astrositler ve oligodendrosit içine ayırt edebilirsiniz.

Abstract

Bir in vitro sistemde, merkezi sinir sistemi olgun nöronlar ve glia (MSS) içine atalarıdır özetlediği geliştirme ve farklılaşma AXO glial etkileşimleri, özellikleri ve multipotent atalarıdır farklılaşma ve oligodendroglial ilerlemesini araştırmak Nörobilimadamları için güçlü bir platform sağlayacak hücresel ve moleküler düzeyde soy hücreleri. Biz burada, serum serbest bir ortamda 3-4 hafta kadar devam edebilir ve nöron glia etkileşim ve MSS miyelinasyonun incelemek için bir model olarak laboratuvarda kullanılan embriyonik sıçan forebrains MSS agrega kültür sistemi açıklanmaktadır. Bu video klibi, E16 sıçan beyin bu MSS agrega kültürleri izole ve büyümek nasıl göstereceğiz. Ayrıca, aynı beyin diseksiyonu, zenginleştirilmiş düzenli ayrışmış nöronal kültürlerin kolayca elde edilebilir ve çeşitli çalışmalar için kullanılan merkezi sinir sistemi nöron veya diğer hücreleri ile birlikte kültürler için kullanılır.

Protocol

Diseksiyonu önce hazırlanması Cerrahi aletleri: otoklav ile tüm diseksiyon makas ve forseps sterilize Lamel temizleme: En az 24 saat süreyle% 33 HCl 1L çim beher tüm lamelleri (çapı 24-plaka 15mm) Soak Kalan tüm HCl kaldırmak için arada bir sallayarak 10 dakika akan su ile yıkayın Millipore su ile durulayın. Suyu boşaltın % 95-98 etanol içinde lamelleri Soak Düz bir …

Discussion

Erken çalışmalar sinaps oluşumu ve dönme-aracılı serbest dalgalı agrega kültürler 1 olgun miyelin bildirdi. Burada açıklanan MSS agrega kültür sistemi, hücre gelişimi, göç ve in vitro farklılaşma analizi kolaylaştırmak için geleneksel 2B kültürlerin rahatlığı ile üç boyutlu agrega multipotent progenitör hücrelerin serum serbest büyüme birleştirir sistemi, sinir habercisi değiştirilebilir ve kullanılabilir hücre araştırma ve soruşturma nöron glia etkileşimle…

Acknowledgements

Bu çalışmada, Texas A & M Üniversitesi'nde start-up fonları tarafından finanse edildi

References

  1. Matthieu, J. M. Myelination in rat brain aggregating cell cultures. 神经科学. 3, 565-56 (1978).
  2. Chen, Y. i. n. g. Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells. Nat. Protocols. 2, 1044-10 (2007).
  3. Watkins, T. A., Emery, B., Mulinyawe, S., Barres, B. A. Distinct stages of myelination regulated by gamma-secretase and astrocytes in a rapidly myelinating CNS coculture system. Neuron. 60, 555-55 (2008).
  4. Svenningsen, A. F., Shan, W. e. i. -. S. o. n. g., Colman, D. a. v. i. d. R., Pedraza, L. i. l. i. a. n. a. Rapid method for culturing embryonic neuron-glial cell cocultures. Journal of Neuroscience Research. 72, 565-56 (2003).
check_url/cn/1304?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Koito, H., Li, J. Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies. J. Vis. Exp. (31), e1304, doi:10.3791/1304 (2009).

View Video