线虫玻片制备：一种将线虫置于琼脂垫上进行封片的方法

摘要

来源：Teoh, J. S., 等. 在Caenorhabditis elegans中研究细胞结构与细胞器形态的定量方法. J. Vis. Exp. (2019).

在对秀丽隐杆线虫（C. elegans）进行活体成像时，可以使用琼脂糖垫片固定线虫，使其保持静止，同时不会对其造成损伤或使其干燥。  本视频介绍了如何制备一种简单的显微镜载样垫片。

方案

本实验方案摘自 Teoh et al，《在 Caenorhabditis elegans中研究细胞结构与细胞器形态的定量方法》，J. Vis. Exp. (2019)。

成像用玻片的制备

1. 在耐微波的瓶中配制3-4% w/v琼脂糖母液（3-4 g溶于100 mL超纯水中）。
   注意：可在相同浓度下用琼脂替代琼脂糖。
2. 将琼脂糖在微波炉中小心加热融化，注意避免过度沸腾，直至琼脂糖完全溶解（形成澄清溶液）。保持溶液温度在70 °C，以防止凝固。
   注意：琼脂糖母液可多次使用。若琼脂糖已凝固，使用前重新加热即可。
3. 用巴斯德移液管将一滴融化的琼脂糖滴加到显微镜载玻片上。
   注意： 避免在琼脂糖液滴中产生气泡，因为气泡会破坏琼脂垫的完整性。
4. 立即用另一张显微镜载玻片轻轻压下琼脂糖液滴，使琼脂糖在两张载玻片之间均匀压平成....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
琼脂	Merck	1.01614.1000
琼脂糖	Invitrogen	16500-500
盖玻片 #1	Thermo scientifique	MENCS22221GP
盖玻片 #1.5	Zeiss	474030-9000-000	由 SCHOTT 生产
载玻片	Thermo scientifique	MENS41104A/40
巴斯德吸管	Corning	CLS7095D5X-200EA
铂丝	Sigma	267201-2G
盐酸四咪唑	Sigma	L9756-5G