هذه المقالة طريقة لوصفها الجلد والأوعية الدموية الجنينية الغدة الصعترية.
Abstract
إنشاء شبكة الأوعية الدموية الوظيفية هو جزء أساسي من توالد الأعضاء، ومطلوب من أجل وظيفة الجهاز الأمثل. على سبيل المثال، في تشكيل الأوعية الدموية السليمة الغدة الصعترية والزخرفة أمر ضروري لدخول خلية توتية في الجهاز وناضجة الخلايا T-الخروج إلى المحيط. الترتيب المكاني للأوعية الدموية في الغدة الصعترية يعتمد على إشارات من المكروية المحلية، وهي الخلايا الظهارية الغدة الصعترية (TEC). التقارير الأخيرة تشير إلى أن العديد من تعطيل هذه النتائج في الغدة الصعترية إشارات عيوب الأوعية الدموية 1،2. وقد وصفت دراسات سابقة التقنيات المستخدمة لتسمية المواليد والأوعية الدموية الغدة الصعترية الكبار 1،2. نبين هنا تقنية لوصفها الأوعية الدموية في الغدة الصعترية الجنينية. هذا الأسلوب يجمع بين استخدام FITC-ديكستران أو غريفونيا (Bandeiraea) Simplicifolia I كتين (GSL 1 – isolectin B 4) حقن الوريد الوجه والجسم المضاد تلطيخ CD31 لتحديد الغدة الصعترية فاهياكل scular وPDGFR β-لتسمية الغدة الصعترية حول الأوعية اللحمة المتوسطة 3-5. وتقدم أيضا خيار استخدام cryosections أو أقسام vibratome. ويمكن استخدام هذا البروتوكول لتحديد العيوب الأوعية الدموية الغدة الصعترية، وهو أمر حاسم لتحديد أدوار جزيئات TEC المستمدة من الغدة الصعترية في الدم تشكيل السفينة. كأسلوب تصف الأوعية الدموية بأكملها، فإنه يمكن أيضا أن تستخدم لتحليل الشبكات الأوعية الدموية في عدة أعضاء وأنسجة الجنين بما في ذلك في جميع أنحاء الجلد والقلب 6-10.
Protocol
1. وصفت فلوريسئين ديكستران GSL I-B 4 isolectin حقن الوريد الوجه لتسمية الأوعية الدموية الجنينية إعداد FITC-ديكستران (50ug/mL) في الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) أو GSL 1 – isolectin B 4 (20ug/200uL) في برنامج تلفزيوني في أنبوب إيبندورف 1.5mL و…
Discussion
جبل كامل وPECAM 1-(CD31) على تلطيخ أقسام هي الأساليب التقليدية لوصفها الأوعية الدموية في الفئران الجنينية. هذه الأساليب تتطلب استخدام المناعي المباشر و / أو غير المباشرة، والمنظفات لpermeabilize الأنسجة الماوس. هذا يبرهن على أن تكون عملية في الوقت المناسب إلى حد ما. هنا، لقد است?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل أعداد منحة R01AI055001 وR01AI082127 من NIAID لإدارة الموارد الطبيعية وSREB جائزة الزمالة لأطروحة JLB.