만성에 대한 성인 태어나 강한 뉴런의 선택 바이러스성 전달 생체내에 Optogenetic의 자극
Summary
후각 망울의 성인에서 태어난 뉴런은 optogenetically Channelrhodopsin2 – 표현 이식 미니어처와 함께 주동이의 철새 스트림과 만성 photostimulation에서 lentiviral 주사를 LED를 사용하여 조절할 수 있습니다.
Abstract
지역 interneurons는 지속적으로 1-3 성인 설치류의 후각 망울에서 생성됩니다. 이 과정에서 측면 뇌실의 벽에서 신경 줄기 세포는 후각 망울에 도달하고 통합할 수있는 주동이의 철새 스트림 (RMS)을 따라 몇 밀리미터에 대한 마이 그 레이션 neuroblasts을 일으키다, 성인 neurogenesis했다. 다른 단계와 후각 회로 전부터으로 성인에서 태어난 뉴런 통합의 영향을 연구하기 위해서는 선택적으로 라벨과 뉴런의 특정 인구의 활동을 조작하는 것이 필요합니다. optogenetic 기술의 최근 발전은 정확하게 주위의 뉴런은 4,5 영향을주지 않고 뉴런의 특정 일대를 활성화하기 위해 조명을 사용하는 기회를 제공합니다. 여기, 우리들은 후각 망울에 도달하기 전에 RMS의 neuroblasts의 temporally 제한 일대에서 virally 표현 Channelrhodopsin2 절차의 시리즈 (ChR2) YFP를 제시하고 NE 성인 탄생이 될urons. 또한, 우리는 ChR2 – 표현 뉴런의 생체내 자극에 만성위한 LED 미니 이식해서 보정하는 방법을 보여줍니다.
Protocol
Discussion
Optogenetic 도구는 최근 후각 시스템에서 성인 태어난 뉴런의 연결을 포함하는 선택적 인구, 이상 우리의 통제를 증가하고있다. 여기 성인 태어난 뉴런의 특정 인구 ChR2 – YFP을 표현하는 lentiviral 벡터의 stereotaxic 주사를 수행하는 방법에 대해 설명합니다. 조심스럽게 기간 후 주사를 모니터링함으로써, 우리는 상대적으로 균일한 나이가 성인에서 태어난 뉴런의 일대의 활동을 분석하고 조작하실 수 ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은의 "ERA – NET 뉴런 '의 프레임에있는 생명 보험 회사"Novalis – Taitbout "가르슈 DES Neurosciences 드 파리 (ENP), 회사 직원 Nationale 드 라 공들인"ANR – 09 – NEUR – 004 "에 의해 지원되었다 유럽위원회에 의해 FP7 프로그램, "재단 부어 라 공들인 Medicale"Letten 재단과 파스퇴르 재단.
Materials
| Material | Company | Catalogue No. |
| Ketamine | Merial | Imalgène 1000 |
| Xylazine | Bayer Health Care | Rompum 0.2% |
| Pipette Puller | Sutter | P-97 |
| Glass Capillaries (3.5″) | Drummond Scientific | 3-000-203-G/X |
| Nanoject II Microinjector | Drummond Scientific | 3-000-204 |
| High speed surgical drill | Fine Science Tools | 18000-17 |
| Micro Drill Steel Burrs 0.7mm tip diameter | Fine Science Tools | 19008-07 |
| LED CMS blue 4.6 W | OSRAM | LBW5SN |
| Female electrical connector (2.54 mm) | Fischer Elektronik | BL5.36Z |
| Current controller for LED (max: 1A) | A1W Electronik | HKO-KL50-1000 |
| Pulse generator | AMPI | Master-8 |
| Optical power meter | Thor Labs | PM100 |
| Cyanoacrylate adhesive | Loctite | 454 |
| Polycarboxylate cement (first layer cement) | Septodont | Selfast (#0068Q) |
| Methacrylate cement (second layer cement) | GC InternationalCorp. | Unifast Trad – Liquid (#339292) Unifast Trad – Powder (#339114) |
| Carprofen | Pfizer | Rimadyl |
References
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