Do-It-Yourself Einrichtung zur Rückgewinnung von kryokonservierten Proben versehentlich fallengelassen in Kryo-Lagerbehälter
Summary
Hier präsentieren wir Ihnen eine kostengünstige, langlebige cryotolerant Gerät zur Probe Abruf von Dewar Tanks mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Die Einfachheit der Konstruktion und der modulare Aufbau des Gerätes macht den Prozess der Probe Abruf aus kryogenen Tanks sicher und einfach.
Abstract
Flüssiger Stickstoff ist farblos, geruchlos, extrem kalt (-196 ° C) Flüssigkeit unter Druck gehalten. Es wird allgemein als ein kryogenes Fluid für die langfristige Lagerung von biologischen Materialien wie Blut, Zellen und Geweben 1,2 verwendet. Die kryogene Natur des flüssigen Stickstoffs, während sich ideal für Probenkonservierung, kann dazu führen, schnelles Einfrieren von lebenden Gewebe in Berührung – bekannt als "Kryo-burn" 2, was zu schweren Erfrierungen in nahe stehende Personen in Ein-und Auslagerung von Proben aus Dewars beteiligt führen. Zusätzlich kann, wie flüssigem Stickstoff verdampft reduziert die Sauerstoffkonzentration in der Luft und kann dazu führen, Asphyxie, in geschlossenen Räumen, 2.
In Labors werden biologische Proben oft in Kryoröhrchen Kryoboxen oder in Edelstahl-Racks in den Dewar-Tanks 1 gestapelt gelagert. Diese Regale sind mit einem langen Schaft zu Boxen Herausrutschen aus den Regalen zu verhindern und in den Boden zur Verfügung gestelltDewars während der routinemäßigen Handhabung. Allzu oft jedoch rutschen Kisten oder Flaschen mit wertvollen Proben heraus und sinken auf den Boden von flüssigem Stickstoff gefüllten Tank. In solchen Fällen könnten Proben mühsam nach der Übertragung des flüssigen Stickstoffs in einem freien Container oder verwerfen sie abgerufen werden. Die Kästen und Flaschen können dann relativ sicher von Dewar geleert erholt. Jedoch macht es die kälteerzeugenden von flüssigem Stickstoff und Expansionsrate versunkenen Probe Abruf gefährlich. Es wird allgemein von Sicherheit Büros empfohlen, die Probe Retrieval nie durchgeführt werden, indem eine einzelne Person. Eine weitere Alternative ist im Handel erhältlich kühlen Grabber oder Zange benutzen, sich aus der Fläschchen 3. Allerdings stellt eingeschränkter Sicht in den dunklen Flüssigkeit gefüllt Dewars eine große Einschränkung in ihrer Verwendung.
In diesem Artikel beschreiben wir den Bau einer Cryotolerant DIY Rückholvorrichtung, die Probe macht Abruf von Dewar mit kryogenen Flüssigkeiten sowohl sicher als einND einfach.
Protocol
Discussion
Eine der gängigsten Methoden zum Abrufen und Cryoboxen Kryoröhrchen aus dem Boden des Dewar-Tank ist in flüssigen Stickstoff in einen freien Behälter umfüllen und ziehen Sie die Proben im Kolben verbliebene oder schwebend in der dekantiert flüssigem Stickstoff. Dies ist jedoch eine unsichere Praxis, die kryogene Verbrennungen oder Erstickung durch längere Exposition gegenüber flüssigem Stickstoff 2 Dämpfe verursachen können. Andere gemeinsamen Weg bei der Abfrage von gefallenen Kryoröhrchen beinha…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
DIY kryogenen Rückholvorrichtung hatte im Laufe der Projekte "Modellierung bakterieller Proteinprenylierung in eukaryotischen Zellen mit Hilfe der Bioinformatik und molekulare Ansätze" von Mary Louise Andrews Award for Cancer Research Program, Virginia Akademie der Wissenschaften gefördert ", physiologische Bedeutung von RNA-Editing in Plasma getestet Dendritische Zellen "von The Thomas F. Jeffress und Kate Miller Jeffress Memorial Trust und Staatsvertrages 16.740.11.0364 (Ministerium für Wissenschaft und Bildung, Russland) gesponsert. Wir möchten Beth Eom für die Unterstützung bei der RNA-Integrität Experiment danken.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge | Local Hardware shop | N/A | 1 unit required |
| Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw | Local Hardware shop | Model # 42281 | 4 units required |
| Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers | Local Hardware shop | Model # 20122 | 4 units required |
| Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut | Local Hardware shop | Model # 18512 | 4 units required |
| Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base | Local Hardware shop | Model # BC40Z | 2 units required |
| Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap | Local Hardware shop | Model # 66T | 1 unit required |
| Oneida 6″ Mesh Strainer | Local Grocery shop | Model # 7859W | 1 unit required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 | Local Hardware shop | Model #:810509 | 6 units required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 | Local Hardware shop | 4 units required | |
| Foam for insulation | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Screw Driver | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Pliers | Local Hardware shop | 1 unit required |
References
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