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方法文章

采用小动物Look-Locker反转恢复(SALLI)磁共振成像评估大鼠心脏功能与心肌形态

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DOI:

10.3791/50397

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2013年7月19日

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本文内容

摘要

增强对比的心脏磁共振(CMR)成像可对心血管疾病的小动物模型进行完整的心脏体内评估。本文详细介绍了在大鼠中使用小动物Lock-Locker反转恢复(SALLI)方法进行CMR成像、重建和分析的操作步骤。

摘要

小动物磁共振成像是一种研究心脏功能及心肌组织变化的重要工具。由于小动物心率较高(每分钟200至600次),既往限制了心脏磁共振(CMR)成像的应用。小动物Look-Locker反转恢复(SALLI)是一种针对小动物的T1 mapping序列,可克服这一问题1。T1图可提供有关组织改变和对比剂动力学的定量信息。此外,还可检测弥漫性心肌病变,如间质性纤维化或水肿1-6。更重要的是,通过单次采集的图像数据,还可通过生成电影序列图像及反转恢复预准备的延迟钆增强型MR图像,来评估心脏功能和心肌瘢痕1。

本视频逐步展示了进行小型动物心脏磁共振成像(CMR)的操作流程。此处以健康的Sprague-Dawley大鼠为例进行演示,但该方法自然可推广至多种心脏疾病的小型动物模型。

引言

心肌炎是急性心力衰竭、猝死以及慢性扩张型心肌病的主要病因7。心脏磁共振成像(CMR)已被确立为评估心脏功能和进行体内组织分析的金标准技术。新型成像技术的发展以及成像质量的提升,不仅有望提高心肌炎的诊断准确性,还有助于病理生理学研究,并加速治疗靶点的发现8-10。小动物成像技术是心血管疾病研究的重要工具。临床上常规使用的CMR技术,例如延迟钆增强(LGE),由于小动物心率较高,难以直接应用于小动物CMR;但已有相关研究实现11。小动物Look-Locker反转恢复(SALLI)方法可生成多模态图像数据集,从而实现对心脏功能和形态的全面评估(图1和图3)。本文详细展示了采用典型SALLI方案进行小动物成像的操作流程与实验设置,特别是T1成像数据集的重建与分析方法。

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方案

1. 准备

1.1. 大鼠麻醉

  1. 将大鼠放入预先充满异氟烷(根据容器大小,约5%浓度3分钟)的麻醉室中,以麻醉大鼠。
  2. 麻醉后,取出大鼠并称重。
  3. 将大鼠的鼻部置于麻醉面罩中(异氟烷2-3%与氧气1 L/min混合),以维持麻醉状态。在异氟烷麻醉期间,大鼠的心率会下降至300-340 bpm(小鼠为380-420 bpm)。

1.2. 插入尾静脉套管针

  1. 用温水(38 °C)和肥皂清洗大鼠的尾巴,以使血管更易于观察。
  2. 在尾巴侧面清晰可见的任一静脉处进行插管。使用 22–24 G 静脉导管,从距离尾尖约三分之一处开始尝试。
  3. 如果初次尝试未成功,可向近端更靠近的位置再次尝试。
  4. 采集血样用于红细胞压积分析(用于计算细胞外容积分数 = ECV)。
  5. 使用皮肤胶和胶带固定静脉导管。

1.3. 电极的放置

  1. 使用酒精浸湿的棉签或肥皂水清洁所有足垫。
  2. 需要四个电极,每个足部一个。
  3. 将电极贴附在足垫中部,并用胶带固定。
  4. 将心电图导线相互缠绕或编成辫状,以尽量减少形成回路,避免对心电图信号造成干扰。

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结果

本文展示了健康 Sprague Dawley 大鼠的实验结果。通过此前描述的完善动物准备方案,可获得稳定的心电图(ECG)信号。类似于人类心脏 MRI 检查方案,我们首先进行扫描定位以确定心脏位置。若大鼠在线圈中的位置正确,则继续采集二腔心视图和四腔心视图,以确定 SALLI 层面组的几何结构。

SALLI 技术可同时生成三种类型的图像。首先是电影图像,可用于评估左心室(LV)的局部及整体功能。通过心脏磁共振(CMR)软件包可测量的 LV 参数包括收缩末期和舒张末期容积、射血分数以及心肌质量。第二种图像是具有不同标称反转时间(TI)的多组反转恢复(IR)图像,可从中选择正常心肌信号抑制效果最佳的图像。这有助于最大限度地增强局灶性心肌纤维化/瘢痕区域的信号,满足延迟强化(LGE)成像的需要。第三种是生成的 T1 图谱。在健康心肌区域,T1 图谱应显示均匀的弛豫时间,如图所示。 图3 (代表性T1图)在注射钆喷酸葡胺前,心肌的T1值短于左心室腔内血液的T1值。注射对比剂后的最初几分钟内,血液的T1值缩短程度大于心肌。尽管来自健康动物的数据显示整个心肌区.......

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讨论

本文介绍一种在小动物中生成多模态(电影磁共振、反转恢复和T1图)磁共振图像的方法。小动物研究在心血管疾病研究中正发挥着日益重要的作用,而心脏磁共振(CMR)是一种强大的工具,使我们能够研究心肌的功能、结构和组织成分。然而,由于小动物心率高且心脏体积小,小动物CMR面临诸多独特挑战。改进的成像方法,包括更高效利用时间的技术,将在该技术的发展中进一步发挥重要作用。

动物初始设置是本方案的关键部分。这不仅关系到能否获得最佳图像,还关系到动物在通常较长的检查过程中(包括重建在内的完整方案约需2小时)能否保持稳定。由于图像采集需依赖心电图(ECG)门控,若心电导联接触不良或ECG导线形成环路产生干扰,可能导致扫描时间延长或序列失败。因心率过高或心律失常导致ECG信号质量差,是小动物心脏磁共振(CMR)面临的主要挑战之一。此外,必须严格控制体温和麻醉状态,以获得准确且可重复的测量结果,并使动物能够耐受长时间的检查。与标准的人类CMR检查类似,首先定位心脏,随后进行两次长轴电影扫描,为后续执行短轴SALLI图像(T1图)提供依据。根据具体应用的不同,SALLI图像的采集方案有多种变体:1)单次.......

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披露

所有动物实验均遵循《实验动物护理与使用指南》的规定,并经当地动物护理管理机构批准。无利益冲突声明。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
胶带(Silkafix)Lohmann und Rauscher34327
钆喷酸葡胺(Magnevist)BayerG-000121632 mmol/kg
Introcan Safety-W(G24)B. Braun4254503-01
红色圆点新生儿监护电极(带预接导线)3M2269T
皮肤粘合剂(Histoacryl)B. Braun1050052
电子秤(型号 440)Kern95088
皮肤消毒剂(Softasept N)B. Braun Petzold360250
温度计LumaSense TechnologiesLuxtron 812

参考文献

  1. Messroghli, D. R., Nordmeyer, S., Buehrer, M., et al. Small animal Look-Locker inversion recovery (SALLI) for simultaneous generation of cardiac T1 maps and cine and inversion recovery-prepared images at high heart rates: initial experience. Radiology. 261 (1), 258-2565 (2011).
  2. Messroghli, D. R., Nordmeyer, S., Dietrich, T., et al.....

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