Summary

Potentialisation à long terme de perforante Pathway-gyrus denté Synapse en se comportant librement souris

Published: November 29, 2013
doi:

Summary

Modèles de souris transgéniques et knock-out de maladies neurologiques sont utiles pour étudier le rôle des gènes dans la neurophysiologie normal et anormal. Cet article décrit les méthodes qui peuvent être utilisées pour étudier la potentialisation à long terme, un mécanisme cellulaire qui peut sous-tendre l'apprentissage et la mémoire, dans transgéniques et knock-out librement comporter des modèles de souris de neuropathologie.

Abstract

Les études de potentialisation à long terme de l'efficacité synaptique, un phénomène dépendant de l'activité synaptique ayant des propriétés qui le rendent attrayant en tant que mécanisme cellulaire apprentissage et les informations de stockage sous-jacente potentiel, ont longtemps été utilisés pour élucider la physiologie des divers circuits neuronaux dans l'hippocampe, l'amygdale et les autres structures limbiques et corticales. Dans cet esprit, des modèles de souris transgéniques de maladies neurologiques représentent plates-formes utiles pour mener la potentialisation à long terme des études (LTP) à développer une meilleure compréhension du rôle des gènes dans la communication synaptique normale et anormale dans les réseaux neuronaux impliqués dans l'apprentissage, de l'émotion et de l'information traitement. Cet article décrit les méthodes pour induire de manière fiable LTP dans la souris se comporter librement. Ces méthodes peuvent être utilisées dans les études de transgéniques et knock-out se comporter librement des modèles murins de maladies neurodégénératives.

Introduction

Le développement de la technologie pour manipuler les gènes a produit des modèles de souris transgéniques et knock-out de presque toutes les maladies neurodégénératives et neurologiques. Cela a nécessité la traduction de techniques de recherche électrophysiologiques précédemment utilisés dans les grandes espèces de rongeurs dans le modèle animal de souris. Une telle technique d'investigation neurophysiologique est l'utilisation de la potentialisation à long terme (LTP) pour tester l'efficacité des connexions synaptiques dans les réseaux neuronaux impliqués dans divers troubles neuropathologiques. Ce protocole décrit les techniques pour l'exploration électrophysiologique fiable de LTP en se comporter librement souris. L'avantage de ce protocole sur les autres est qu'il est simple et facile à mettre en oeuvre, elle est aussi un peu moins coûteux car il ne nécessite pas non plus l'utilisation de systèmes de microdrive coûteux contrôlés par l'ordinateur, ni effet de champ transistor headstages, et, à notre connaissance, est le premier protocole de vidéo des enregistrements électrophysiologiques chroniques to étudier LTP en se comporter librement souris. À cette fin, nous décrivons dans cet article les méthodes simples pour l'étude de la potentialisation à long terme chez la souris se comportent librement. Ces méthodes peuvent être facilement convertis en modèles de souris transgéniques et knock-out de troubles neuropathologiques.

Protocol

Ce protocole est approprié pour les souris de 3 à 18 mois d'âge et le poids corporel approximatif de 30 à 50 g). Les souris peuvent être obtenus auprès de The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Tous les protocoles chirurgicaux et expérimentaux ont été approuvés par le Comité de protection et d'utilisation des animaux Trinity College et étaient en conformité avec le Guide du NIH pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire. Une. Préparation des animaux et chirurgicaux <ol…

Representative Results

Le tableau 1 montre les coordonnées de la DG et mPP employé dans le présent protocole figure 1A montre les marquages ​​pour les structures cibles sur le crâne;.. Sont également indiqués l'emplacement des électrodes de masse et de référence figure 1B illustre représentant réponse évoquée retrace à la fois pré- et posttetanization chez le même animal. A noter que le posttetanization réponse évoquée est plus grande que la réponse de pretetanizat…

Discussion

Dans ce protocole, nous avons démontré une méthode simple et fiable pour l'étude de LTP à la DG chez la souris se comportent librement. Alors que de nombreuses études de LTP chez des rats éveillés ont été réalisées 3,4, très peu ont été menées chez des souris éveillées principalement en raison de la complexité technique posé par l'immobilier crânienne limitée chez la souris et le poids de headstages d'électrodes par rapport au poids moyen de 5 souris. Les quelques…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier les personnes suivantes: Dr Joseph Bronzino, le Dr Khamis Abu-Hassaballah, M. Austin RJ-LaFrance, et Mme Jessica Koranda.

Materials

Ketamine (100 mg/ml) Henry Schein 10177
Xylazine (20 mg/ml) Henry Schein 33197
Acepromazine (10 mg/ml) Henry Schein 2177
Dental acrylic powder Lang Dental Manufacturing Co. 1330CLR
Dental acrylic liquid Lang Dental Manufacturing Co. 1306CLR
Tungsten wire (0.127 mm) World Precision Instruments TGW0515
Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm) World Precision Instruments 832400
Flunixin (50 mg/ml) Henry Schein 14165
Epoxilyte Superior Essex EP 6001-M
Stainless steel wire insert (0.2 mm) World Precision Instruments 792900
Stereotaxic frame apparatus Kopf Instruments Model 902
Ear cuffs (ear cups) Kopf Instruments Model 921 
Electrophysiological stimulator Astro-Med, Inc. S88
Digital oscilloscope B & K Precision Corp. 2542
Current isolation unit Astro-Med, Inc. PSIU-6
Differential amplifier World Precision Instruments, Inc. DAM-50
Commutator Plastics One SLC6
Dental drill Stoelting 58650

References

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Cite This Article
Blaise, J. H. Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice. J. Vis. Exp. (81), e50642, doi:10.3791/50642 (2013).

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