Summary

Kızılötesi termometre pasif sistemik anafilaksi ve gıda Anti değerlendirme sırasında kullanarak fare vücut sıcaklık ölçümü

Published: September 14, 2018
doi:

Summary

Burada doğru bir şekilde pasif sistemik anafilaksi (PSA) ve bir kızılötesi termometre kullanarak gıda Anti fare modelleri vücut sıcaklık farklılıkları ölçmek için yeni bir yöntem mevcut. Bu yordamı doğru önceki PSA sonuçlarında yinelenen.

Abstract

Fare vücut sıcaklık ölçüm araştırma alerji ve anafilaktik semptomlar için büyük önem taşımaktadır. Rektal sonda sıcaklığı okumalar için ortak ve bu konuda doğru ve çok değerli olduğu kanıtlanmıştır. Ancak, bu yöntem bir sıcaklık ölçüm fareler hayvan yaralanma olmadan sonda eklemek için anestezi gerektirir. Bu diğer fenotipleri fare aynı anda gözlemlemek yeteneğini sınırlar. Sıcaklık ölçme sırasında diğer fenotipleri araştırmak için rektal sonda ideal değildir ve başka bir yöntem istenen. Burada, vücut sıcaklığı ölçme içinde rektal sonda için eşit güvenilirliği korurken fare anestezi gereksinimini güzel sıcaklık ölçümü invaziv olmayan bir yöntem tanıtmak. Biz vücut yüzey sıcaklıkları aralıkları 2 ve 150 mm arasında algılar bir kızılötesi termometre kullanın. Bu yöntem vücut sıcaklık ölçüm güvenilir bir şekilde sıcaklık değişikliği trendleri farelerde pasif sistem anafilaksi deneyler sırasında çoğaltma içinde başarılı olur. Biz vücut yüzey sıcaklığı yaklaşık 2.0 ° C rektal sonda ölçümleri düşük olan ancak aynı eğilim sıcaklık damla derecesini takip gösterir. Ayrıca, sıcaklık ve aktivite düzeyleri aynı anda değerlendirmek için gıda Anti modeli farelerde gözlemlemek için aynı yöntemleri kullanabilirsiniz.

Introduction

Vücut ısısı ölçümü hayvan anafilaktik semptomlar etkilerinin izlenmesi önemli bir parçası1,2modelleri olmuştur. Sıcaklık farkları geleneksel olarak rektal sonda termometreler fareler3,4tarafından ölçülen. Bu ölçümler ile müfettişler güvenilir değişkenler arasındaki sıcaklık farklılıkları tasvir; Ancak, bu yöntem zaman alan bir işlemdir ve vücut ısısı artırabilir fareler için sıkıntı neden olur. Rektal sondalama da mukozal yırtılma ve enfeksiyon3neden olabilir. Ayrıca, fareyi insanca sıcaklık3ölçmek için rektal sonda eklemek için anestezi. Bu yavaş bir süreçtir ve art arda gelen sıcaklık ölçüm kısa bir süre içinde yasaklar. Ayrıca, fare aktivite fenotipleri anestezi tamamen hangi başka bir zaman alan bir süreçtir, yıpranmış kadar bu dönemde gözlenen olamaz. Daha yakın zamanlarda, vücut ısısını ölçmek için güvenilir diğer yöntemleri subkutan implante Pasif kızılötesi verici Etiketler veya bir sıcaklık sensörü3,5,6dahil radyo vericileri kullanmış. Her ne kadar bazı araştırmacılar tarafından ideal Yöntem olarak kabul edilir, bu yöntemler yüksek ilk maliyetleri ve farelere, deri veya vücudun başka bir bölümü altında bir sıcaklık sensörü cerrahi implantasyon nedeniyle sıkıntı nedeniyle yaygın olarak kullanılmaz.

Sıcaklık farkı belirtileri hastalık modeli1,2doğru bir yansıması olduğunu göstermek için fare sıcaklık ölçüm sırasında uyanık olmalı ve normal fenotipik faaliyetlerini iade edebilmek hemen önce ve sonra ölçüm. Bu amaçla, biz hangi tarafından bu elde edilebilir bir yöntem aranan.

Amacımız doğru ve ucuz fare vücut ısısı, anestezi için gerek kalmadan ve davranışsal fenotipleri gözlem sırasında ve sıcaklık ölçüm zaman sonra etkinleştirmek için etkinlik, kısıtlamalar olmadan ölçmek için yapıldı. Bu hedefe ulaşmak için standart rektal ısı probları daha az invaziv bir teknik gerekli belirgin oldu. Kızılötesi termometreler özellikle içinde Pediatri, klinik tıp yıllardır hassas sıcaklık okuma elde etmek için kullanılmıştır. Klinisyenler hızlı ve doğru sıcaklık ölçümleri bebekler ve aktif mobil telaşlı çocuklarda elde etmek izin verdi alternatif bir yöntem olmuştur. Bu aynı teknikle farelerde uygulanan ve anestezi olmadan sıcaklıklar elde etmek için başarılı bir yöntem geliştirdik. Önemlisi, bu yöntem aynı zamanda ölçüm boyunca fare etkinliklerini gözlemlemek mümkün olurken köklü pasif sistemik anafilaksi sonuçları ile ilgili sıcaklık değişiklikleri, çoğaltma yetenekli olduğunu göstereceğiz. Ayrıca, biz aynı anda vücut sıcaklığı gerçekten faaliyet düzeyi doğru bir yansıması ve genel fenotip olduğunu göstermek için diğer belirtiler araştırırken vücut sıcaklığı gıda alerjisi farelerin değerlendirmek için aynı yöntemi kullanın fare.

Protocol

Tüm hayvan deneyleri hayvan bakım ve kullanım Komitesi La Jolla Enstitüsü tarafından alerji ve İmmünoloji için kabul edildi. 1. fare vücut sıcaklık ölçüm Anesthetization sırasında Fareyi bir anestezi indüksiyon kutuya koyun. %5 isoflurane ile oksijen 1 L/dak akışını kullanarak anestezi.Not: fare gönüllü hareketi sona erer ve 30 ‘un üzerinde alternatif olarak, solunum hızı monitörü s. için ve bir kez fareler her 2 başına 1 nefes, nefes hareketsiz o…

Representative Results

Pasif sistemik anafilaksi: IV enjeksiyon için 10 hafta yaşlı kadın BALB/c fare anestezi. Önce enjeksiyon, 1. adımda açıklandığı gibi kendi vücut sıcaklığı (Video 1) ölçülür. Şekil 1 her iki popülasyonun sıcaklık eğilim IV enjeksiyon sonra gösterir. PBS kontrol fare 1.1 ° C en yüksek bir damla 20 dk7′ de varken IgE hassas fare 3.0 ° C en yüksek sıcaklık damla 20 dk az gösterdi. Ayrıca, …

Discussion

Açıklanan protokol anestezi kullanmadan vücut sıcaklığı ölçme amacı ile kurulmuştur. Hangi sıcaklık ile okuma elde edilebilir göreli kolaylığı rağmen bu teknik, stres ve farklı ortam sıcaklığı gibi daha belirgin efektler ek karşılamak çeşitli uyarılar vardır.

İlk olarak, deneme boyunca sabit sıcaklık okuma sağlamak için sıcaklık ölçülür nerede konum anatomik işaretlerini kullanarak önceden belirlenmiş gerekir ve müfettişler dedi vücut ölçümü ç…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Araştırma laboratuarı NIH tarafından desteklenen Kawakami verir: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 ve R41AI124734-01.

Materials

Non-contact infrared thermometer SinoPie DT-8861
Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE Sigma Aldrich D8406-.2MG
PrecisionGlide 30G needle BD 305128
PrecisionGlide 26G needle  BD 305111
1 mL syringe BD 309659
Dinitrophenyl – human serum albumin Biosearch Technologies D-5059-10
Ovalbumin from chicken egg white Sigma Aldrich A5503-50G
Imject Alum ThermoFisher Scientific 77161
Animal Feeding Needles, disposable Fisher Scientific 01-208-87

References

  1. Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).
  2. Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
  3. Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).
  4. Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection. Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).
  5. Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats. Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).
  6. Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry. Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).
  7. Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice. Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).
  8. Brandt, E. B., et al. Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).
  9. Ando, T., et al. Histamine-releasing factor enhances food allergy. The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).
  10. Brandt, E. B., et al. Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).

Play Video

Cite This Article
Kawakami, Y., Sielski, R., Kawakami, T. Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation. J. Vis. Exp. (139), e58391, doi:10.3791/58391 (2018).

View Video