0 次观看 • 2:37 分钟 • April 30th, 2023
通过速冻法冷冻保存小鼠脑组织样本时,首先取一个装有异戊烷溶液(一种高导热性液体)的烧杯,将其浸入盛有液氮的容器中。
将异戊烷冷冻至溶液变得粘稠。
同时,取一个经蔗糖溶液预处理的完整小鼠脑组织样本。该处理可防止脑组织在后续步骤中发生形变。
将脑组织样本从蔗糖溶液中取出,并用吸水纸吸干,以去除残留的蔗糖。
接下来,将脑组织按所需方向置于含有包埋介质层的深冻存模具中。
在冷冻模具中用更多的包埋介质覆盖脑组织,以确保整个器官被完全覆盖。
然后,将含有包埋脑组织的冷冻模具浸入预冷的异戊烷浴中。脑组织迅速冷却至超低温,可确保脑部结构得以完整保存,且无任何变形。
现在,让脑组织样本冷冻,直至包埋介质凝固,在脑组织周围形成一层凝胶状层,以固定其位置。
冷冻后,将冷冻模具从异戊烷浴中取出,并用铝箔包裹冷冻保存的小鼠脑组织。
将样本储存在零下八十摄氏度,以备进一步的组织学分析。
为进行冷冻保存,将一个烧杯装入低温的异戊烷/2-甲基丁烷,并将该烧杯放入装有液氮的容器中。在溶剂冷却的同时,用滤纸将脑组织表面吸干,然后将脑组织放入已标记的冷冻模具中。
在冷冻模具中心小心加入约 5 毫升预冷的包埋剂,并将脑组织按所需方向放入模具中。使用洁净的镊子,迅速将冷冻模具放入预冷的异戊烷(2-甲基丁烷)中,浸泡 30 至 40 秒。
待切割介质凝固后,将冷冻模具转移至干冰上,并用铝箔包裹冷冻模具及速冻的脑组织,于-80摄氏度保存。
本文详细介绍了通过速冻技术对小鼠脑组织样本进行冷冻保存的过程。该方法可有效保持脑组织结构,以便后续进行组织学分析。
通过速冻法对小鼠脑组织进行冷冻保存,可有效维持组织的天然结构,从而实现高保真度的组织学分析。该技术通过确保形态学读数的可靠性,支持神经科学药物研发中的靶点验证和作用机制风险排除。此方法解决了涉及脑组织的临床前研究中样本制备可重复性的关键需求。
该方法适用于从早期靶点验证到临床前研究的发现全过程,在此过程中,组织学完整性为决策提供依据。
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最后更新:22 八月 2026