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ネイティブ、タグなしの Huntingtin Exon1 モノマーと相撲の融合戦略を使用して線維の生成

JoVE 杂志
生物化学

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Generation of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Using a SUMO Fusion Strategy

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ネイティブ、タグなしの Huntingtin Exon1 モノマーと相撲の融合戦略を使用して線維の生成

DOI:

10.3791/57506-v

•

11:22 min

•

June 27, 2018

•

Andreas Reif, Anass Chiki, Jonathan Ricci, Hilal A. Lashuel

¹Laboratory of Molecular and Chemical Biology of Neurodegeneration,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapters

00:04Title
00:53Cell Lysis and Purification of His6-SUMO Httex1 Fusion Protein by Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC)
02:56Cleavage of the His6-SUMO-tag and HPLC Purification
06:06Disaggregation and Resolubilization of Httex1 Proteins
07:53Results: Characterization of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Prepared via SUMO Fusion
09:52Conclusion

Summary

自动翻译

ここでは、ネイティブなタグ無料モノマーのミリグラム量と小さなユビキチン関連修飾子 (相撲) の一時的な融合に基づくハンチンチン蛋白質 (Httex1) の exon1 の線維の生産のための堅牢な最適化されたプロトコルを提案する.

Tags

Keywords: Native Huntingtin Exon1 SUMO Fusion Strategy SDS-PAGE Analysis IMAC Purification HPLC Purification DTT L-cysteine Trifluoroacetic Acid Aggregation-prone Proteins Amyloid-beta Alpha-synuclein

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