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Isolamento dei fibroblasti papillari e reticolari dalla pelle umana mediante selezione cellulare attivata a fluorescenza
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遗传学
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JoVE 杂志 遗传学
Isolation of Papillary and Reticular Fibroblasts from Human Skin by Fluorescence-activated Cell Sorting
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Isolamento dei fibroblasti papillari e reticolari dalla pelle umana mediante selezione cellulare attivata a fluorescenza

DOI:
10.3791/59372-v

•

09:14 min

•

May 07, 2019

•

, ,
1Skin, Endothelium Research Division, Department of Dermatology,Medical University of Vienna

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:00Sectioning of Human Skin Dermis into Papillary and Reticular Layers
  • 02:38Separation and Enzymatic Digestion of Epidermis and Dermis
  • 03:52Preparation of Single Cell Suspension and Erythrocyte Lysis
  • 05:58Culturing of Fibroblasts and Adipogenesis Assay
  • 07:04Results: FAP+CD90-, FAP+CD90+ and FAP-CD90+ Fibroblasts Differ in Dermal Localization, Gene Expression and Functionality
  • 08:44Conclusion

Summary

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Questo manoscritto descrive un protocollo basato su FACS per l'isolamento dei fibroblasti papillari e reticolari dalla pelle umana. Si aggira in vitro cultura che era inevitabile con il protocollo di isolamento comunemente usato attraverso le colture espianti. I sottogruppi di fibroblasti emananti sono funzionalmente distinti e mostrano l'espressione genica differenziale e la localizzazione all'interno del derma.

Tags

Keyword Extraction: Papillary FibroblastsReticular FibroblastsHuman SkinFluorescence-activated Cell SortingFACSDermal Fibroblast SubsetsSkin PathologiesCancerInflammatory Skin DiseasesFull-thickness DermisSubcutaneous Fat LayerPapillary DermisReticular DermisEnzymatic DigestionDissociating Enzyme Solution

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