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蛍光活性化細胞選別によるヒトの皮膚からの乳頭状および網状線維芽細胞の単離
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遗传学
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JoVE 杂志 遗传学
Isolation of Papillary and Reticular Fibroblasts from Human Skin by Fluorescence-activated Cell Sorting
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蛍光活性化細胞選別によるヒトの皮膚からの乳頭状および網状線維芽細胞の単離

DOI:
10.3791/59372-v

•

09:14 min

•

May 07, 2019

•

, ,
1Skin, Endothelium Research Division, Department of Dermatology,Medical University of Vienna

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:00Sectioning of Human Skin Dermis into Papillary and Reticular Layers
  • 02:38Separation and Enzymatic Digestion of Epidermis and Dermis
  • 03:52Preparation of Single Cell Suspension and Erythrocyte Lysis
  • 05:58Culturing of Fibroblasts and Adipogenesis Assay
  • 07:04Results: FAP+CD90-, FAP+CD90+ and FAP-CD90+ Fibroblasts Differ in Dermal Localization, Gene Expression and Functionality
  • 08:44Conclusion

Summary

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この原稿は、ヒトの皮膚から乳頭線維芽細胞および網状繊維を単離するための FACS ベースのプロトコルを記載している。それは、explant 培養を介して一般的に使用される分離プロトコルで避けられなかったインビトロ培養を回避する。発散する線維芽細胞サブセットは機能的に区別され、真皮内での微分遺伝子発現および局在を表示する。

Tags

Keyword Extraction: Papillary FibroblastsReticular FibroblastsHuman SkinFluorescence-activated Cell SortingFACSDermal Fibroblast SubsetsSkin PathologiesCancerInflammatory Skin DiseasesFull-thickness DermisSubcutaneous Fat LayerPapillary DermisReticular DermisEnzymatic DigestionDissociating Enzyme Solution

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