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Cromatografia de troca iónica (IEX) acoplada ao multi-ângulo espalhamento de luz (MALS) para caracterização e separação de proteínas
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生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization

Cromatografia de troca iónica (IEX) acoplada ao multi-ângulo espalhamento de luz (MALS) para caracterização e separação de proteínas

DOI:
10.3791/59408-v

•

10:41 min

•

April 05, 2019

•

, , ,
1Wolfson Centre for Applied Structural Biology, The Alexander Silberman Institute of Life Science,The Hebrew University of Jerusalem, 2Wyatt Technology Corporation, 3Danyel Biotech Ltd

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:50Preparation of the Buffer
  • 02:10IEX-MALS Experiment
  • 05:38Analysis of IEX-MALS Experimental Data
  • 08:27Results: Optimization of IEX-MALS Experiment for BSA
  • 10:02Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve o uso da cromatografia de permuta iónica alta especificidade com multi-ângulo de dispersão de luz para uma exata determinação da massa molar de proteínas, complexos de proteínas e peptídeos em uma amostra heterogênea. Este método é valioso para a avaliação da qualidade, bem como quanto a caracterização dos oligômeros nativos, variantes de carga e misturado-proteína amostras.

Tags

Ion Exchange ChromatographyIEXMulti-angle Light ScatteringMALSProtein SeparationProtein CharacterizationProtein Quality ControlOligomeric StateHomogeneityIdentityConformationStructurePost-translation ModificationsAnion ExchangeAIEXCation ExchangeCIEXBSABufferFPLCDLS

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