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Potato Virus X-Based microRNA Silencing (VbMS) In Potato.
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ポテトウイルスXベースマイクロRNAサイレンシング(VbMS)ポテト中。

DOI:
10.3791/61067-v

•

11:51 min

•

May 11, 2020

•

, ,
1Texas A&M AgriLife Research Center at Dallas,Texas A&M University System, 2Department of Plant Pathology, Microbiology,Texas A&M University

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:42Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
  • 01:40STTM Purification
  • 02:22T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
  • 03:13Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
  • 04:55T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
  • 07:21Potato Virus-X-Based VbMS Assay
  • 10:07Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
  • 11:16Conclusion

Summary

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我々は、ポテトウイルスX(PVX)ベースのマイクロRNAサイレンシング(VbMS)システムの詳細なプロトコルを提示し、ポテト中の内因性マイクロRNA(miRNA)を機能的に特徴付ける。目的のmiRNAの標的模倣(TM)分子はPVXベクターに統合され、一過性にジャガイモで発現して標的miRNAまたはmiRNAファミリーを沈黙させる。

Tags

Potato Virus XMicroRNA SilencingVbMSVirus-based MicroRNA SilencingMiRNAFunctional CharacterizationShort Tandem Target MimicPVXLigation Independent Cloning

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