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뉴런의 세포 인신 매매 연구를 위한 튜브에서 정제하고 직접 모노 바이오티니레이트 BDNF를 정화하는 향상된 프로토콜
JoVE 杂志
神经科学
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JoVE 杂志 神经科学
An Improved Protocol to Purify and Directly Mono-Biotinylate Recombinant BDNF in a Tube for Cellular Trafficking Studies in Neurons
DOI:

13:46 min

July 11, 2020

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Chapters

  • 00:00Introdcution
  • 00:48Transfection of HEK293 cells
  • 01:49Media Collection and Storage
  • 03:02Media Concentration and Purification
  • 04:58In vitro Mono-biotinylation Reaction
  • 06:01Biotinylation Analysis
  • 06:56Visualization of Retrograde Axonal Transport of BDNF-QD in Live Neurons
  • 07:58Represetative Results
  • 13:17Conclusion

Summary

自动翻译

Avi 서열을 포함하는 재조합 BDNF(BDNFAvi)는 HEK293 세포에서 비용 효율적인 방식으로 생산되며 친화성 크로마토그래피에 의해 정제된다. BDNFavi는 튜브에 효소 BirA와 직접 모노 바이오티니화된다. BDNFavi 및 모노 바이오타이니드 BDNFavi는 시판되는 BDNF와 비교하여 생물학적 활성을 유지합니다.

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