الخلايا الظهارية الثديية شكل الماوس Mammospheres خلال التمايز المولد للبن
Summary
ويمكن وصف HC11 تمايز المولد للبن من تشكيل هياكل القبة ويشار إلى mammospheres. ويمكن تعداد هياكل بواسطة المجهر النقيض من المرحلة للمساعدة في قياس تمايز المولد للبن.
Abstract
قياس المظهري تستخدم عادة لتحديد درجة التمايز المولد للبن الثدي في الخلايا الظهارية الماوس الثقافات هو تشكيل خلية على شكل قبة هياكل ويشار إلى mammospheres<sup> 1</sup>. واستخدمت خط خلية HC11 كنظام نموذج لدراسة تنظيم تمايز المولد للبن الثدي سواء<em> في المختبر</em> و<em> في الجسم الحي</em<sup> 2</sup>. الخلايا HC11 التفريق وتوليف بروتينات الحليب في الاستجابة للعلاج مع الهرمونات المولد للبن. في أعقاب نمو خلايا فأر HC11 الثدي الظهارية للالتقاء ، وبفعل تمايز المولد للبن من خلال إضافة مجموعة من الهرمونات بما في ذلك المولد للبن ديكساميثازون ، الانسولين ، والبرولاكتين ، كما أشار إلى مجمع دبي للاستثمار. صورت الخلايا HC11 يسببها للتمييز في بعض الأحيان تصل إلى 120 ساعة من الحث آخر تمايز وعدد mammospheres التي ظهرت في كل ثقافة كان تعداد. حجم mammospheres الفرد يرتبط مع درجة التمايز ويتم تصوير هذه الصور في الخلايا التفريق.
Protocol
Discussion
من أجل هذه التقنية لتكون ناجحة وأفضل نوعية ، ويجب المحافظة على الخلايا الظهارية في التقاء قبل أن يسببها مع الهرمونات المولد للبن. قد تكون هناك حالات حيث توجد العديد من mammospheres ، مما يجعل من الصعب تقدير. وهكذا ، لأغراض الكمية فمن الأفضل لتصوير mammospheres في نقطة الوقت الذي ?…
Acknowledgements
يؤيد إخراج الأموال من الكونغرس للبحوث الطبية منحة الصندوق (DAMD17 – 01-0264) إلى كاتلر ML والولايات المتحدة العسكرية لمعهد السرطان كاتلر ML العمل.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RPMI | Invitrogen | 21870076 | ||
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11550 | ||
| L-Glutamine | Gibco | 25030 | ||
| PenStrep | Gibco | 15140 | ||
| Hepes | Quality Biologicals | 118089060 | ||
| EGF | Sigma | E9644 | ||
| Insulin | Gibco | 12585-014 | ||
| Dexamethasone | Sigma | D1756 | ||
| Microscope | Olympus | IX71 | ||
| Digital Camera | QImaging | Retiga 2000RV Fast 1394 |
Referenzen
- Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells. Epithelial Cell Biol. 4, 8-16 (1995).
- Wang, W. Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells. J Cell Physiol. 214, 38-46 (2008).
