Ensayo local de sonda de calor: Un método para evaluar la nocicepción de altas temperaturas en larvas de Drosophila

Abstract

Fuente: Chattopadhyay, A., et al. Métodos locales y globales de evaluación de la nocicepción térmica en larvas de Drosophila . J. Vis. (2012).

Las larvas de Drosophila han dedicado neuronas sensoriales -nociceptores- cuya respuesta a estímulos térmicos potencialmente dañinos desencadena comportamientos aversivos -o los llamados “nocifensivos”- en el animal. Este video describe un método para evaluar la nocicepción térmica mediante el registro del comportamiento larvario en respuesta a la aplicación local de una sonda de calor en la cutícula. Este método se denomina, por lo tanto, el ensayo local de la sonda de calor.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Chattopadhyay et al., Métodos locales y globales de evaluación de la nocicepción térmica en Larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2012). 1. Ensayo local de sonda de calor Entregamos un estímulo térmico nocivo a un segmento de cuerpo larvario individual utilizando una sonda térmica hecha a medida fabricada por Pro-Dev Engineering (ver Tabla de materiales). Aunque esta sonda tiene características de dis…

Representative Results

Figura 1: Configuración experimental para el ensayo de sonda de calor local. La sonda de calor está controlada por una unidad de control térmico que se utiliza para ajustar y mantener la temperatura de la sonda. La sonda se mantiene perpendicular al eje anteroposterior y se utiliza para estimular la larva en un ángulo de 45° a la horizontal. El contacto de la sonda se realiza específicamente en el segmento abdominal…

Materials

Thermal Probe	Pro-Dev Engineering	Custom-built on demand	Contact information can be provided on request
Leica DFC290 12v/400mA Color camera	Leica Microsystems	12730080	Any equivalent camera will do.
Leica MZ6 microscope	Leica Microsystems	Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614
Schott Ace Modulamp Unit	Schott AG	A20500
Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide	Schott AG	Schott A08575
Thermal Control Unit	TSCI corp.	Custom Built	Details can be provided on request
Zeiss Stemi 2000 microscope	Carl Zeiss, Inc.	NT55-605	Any equivalent microscope will do.
Forceps	Fine Science Tools	FS-1670
Paintbrush	Blick Art Materials	06762-1002
35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish	Falcon BD	351008	We have not tested alternative dishes.
Piece of vinyl	Office Depot	480009