Summary

Otomatik Tel kasılmaların kâğıda çizilmesi Yüklü daralma ve Rahatlama Çalışmaları

Published: September 22, 2011
doi:

Summary

Izole mezenterik arterler kuvvet ölçümleri için otomatik bir kasılmaların kâğıda çizilmesi yöntemi açıklanmıştır. Fenilefrin ve ekstrasellüler kalsiyum yanıtlarını belirlemek için 510A Mulvany Halpern Otomatik Çift Tel Myograph kullanır. 300 mikron, bağımsız yöntemi 60 çaplarının küçük damarlarda agonistleri izometrik yanıtları tutarlı tespitine imkan sağlamaktadır.

Abstract

Proksimal direnç damarları, mezenterik arterler gibi periferik direnç önemli ölçüde katkıda bulunur. 100-400 mm arasında çapa işlevi öncelikle vücudun genel gereksinimlerine göre çeşitli organlara kan akışını yönlendirerek bu küçük gemiler. Sıçan mezenterik arter, 100 mm daha büyük bir çapa sahip. Kasılmaların kâğıda çizilmesi tekniği, ilk olarak Mulvay ve Halpern 1 açıklanan Bevan ve Osher 2 tarafından önerilen yöntem dayanmaktadır . Teknik kas hazırlanmasında önemli bir kısalma önlenir izometrik koşullar altında, küçük gemiler hakkında bilgi sağlar. Farklı agonistleri gemilerin yürürlüğe üretim ve duyarlılık aktif gerilim uzunlukta ilişkisi göre, streç ölçüde bağımlı olduğu için, montaj teller uygun önlemek için izometrik koşullar altında daralma çalışmalar yapmak şarttır. Paslanmaz çelik teller kaydedilen yanıtlar 3 etkileyen ikincisi, oksidasyonu nedeniyle tungsten teller tercih edilir. Tekniği, damar düz kas hücre reseptörleri normal fonksiyonu için kanıt elde etmek için monte gemilerin agonist bağlı kasılmalar karşılaştırılmasına olanak sağlar .

Biz phenylyephrine ile sözleşmeli izole mezenterik arterler ekstrasellüler kalsiyum (Ca 2 + e) kümülatif konsantrasyonlarda eklenmesi üzerine dinlenmek çeşitli çalışmalarda gösterilmiştir. Bulgular bize G-protein-birleştiğinde Ca 2 +-algılayan reseptör (SYR) ifade eden bu perivasküler duyusal sinirler, sonucuna götürdü, bu vasorelaxation yanıt arabuluculuk . Otomatik bir tel kasılmaların kâğıda çizilmesi yöntemi kullanarak, Wistar, Dahl tuz-duyarlı (DS) ve tuza dayanıklı Dahl (DR) mezenterik arterler sıçan Ca 2 + e farklı yanıt verdiğini göstermektedir. Wistar sıçanlarda Dokular + hassasiyet DR ve DS olanlara kıyasla daha yüksek Ca 2 gösterdi. DS sıçan mezenterik arterler azalma araba ifade azalır Ca 2 + e-indüklenen izole, ön sözleşmeli arterlerin rahatlama ile ilişkilidir. Veri, araba, mezenterik arterler artmış adrenerjik ton altında rahatlamak için gerekli olduğunu öne sürdüğü gibi hipertansiyon oluşur ve çok daha şiddetli DS Dahl hayvanlarda araba sinyal yolağı içsel bir kusur, göstermektedir.

Yöntem, mezenterik direnç arter ve farklı agonist ve / veya antagonistleri arasındaki benzer küçük kan damarlarını ve karşılaştırmalar vasküler reaktivite ex vivo belirlenmesinde yararlı yan yana 6,7,8 kolay ve sürekli olarak değerlendirilir olabilir .

Protocol

1. Sıçan mezenterik arter izolasyonu Kapalı bir odasında izofluran ile hayvan anestezisi ve karın alkol ile silin. Mezenterik yatakta ortaya çıkarmak için bir orta hat laparotomi gerçekleştirin. Makaslar kullanılarak, superior mezenterik arter damarsal beslenme ile bağırsak yaklaşık 85 cm kaldırın. Pilorusta yakın bağırsak bölümünde ve bağırsak coecal kavşak yakınında distal ucu proksimal ucunu kesin. Bağırsak segmentleri açık göğüs kalp ponksiyon izoflur…

Discussion

Hipertansiyon, kalp-damar, beyin ve böbrek morbidite / mortalitenin önde gelen nedenidir. Hipertansiyon oluşumu nüfusun yüksek olduğu ve tuz duyarlı hipertansiyon özellikle yaşlanan nüfus, yüksek ve siyahlar beyazlara nazaran daha yaygındır. Bunun nedeni, onların böbrekler 9 sodyum korumak için siyahların eğilimi olduğuna inanılıyor . Tuz duyarlılık, böbrek hastalığı için önemli bir faktör ve endotel disfonksiyonu ile ilişkili, fakat mekanizması tam olarak anlaşılmış değil…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ödülü Numaraları R01 HL064761, R25 HL059868 1SC1 HL099139 ve Sağlık P20 MD000175 formu Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından açıklanan proje desteklenmiştir. Içeriği sadece yazarların sorumluluğundadır ve mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri resmi görüşlerini temsil etmemektedir.

Materials

Name of equipment/ reagent Company Catalogue number Comments(optional)
Auto Dual Wire Myograph System-510A DMT-USA, Inc. Atlanta, GA. 100151  
PowerLab/4SP Data Acquisition System ADInstruments, Colorado Springs, CO. ML750 New models with 4-16 input channels are available.
Dell Dimension XPS Gen 4 Computer Dell    
Stemi SV II (Apo) Dissection Microscope with Ocular Carl Zeiss International.    
Wistar, Dahl salt-sensitive, Dahl salt-resistant rats Harlan Sprague Dawley, Indianapolis, IN.    
Rodent chow Harland Tekland, Madison, WI.    
Phenylephrine Sigma-Aldrich, St. Louis, MO.    
Other chemicals     All chemicals used were of the purest grades available commercially.

Referenzen

  1. Mulvany, M. J., Halpern, W. Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ. Nature. 260, 617-619 (1976).
  2. Bevan, J. A., Osher, J. V. A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro. Agents Actions. 2, 257-260 (1972).
  3. Mulvany, M. J. Procedures for investigating of small vessels using small vessel myograph. DMT Danish Myo Technology. , (2004).
  4. Angus, J. A., Wright, C. E. Techniques to study the pharmacodynamics of isolated large and small blood vessels. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 44, 395-407 (2000).
  5. Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels. J. Physiol. 275, 85-101 (1978).
  6. Lindhorst, J., Alexander, N., Blignaut, J., Rayner, B. Differences in hypertension between blacks and whites: an overview. Cardiovasc. J. Afr. 18, 241-247 (2007).
  7. Eley, S. L., Allen, C. M., Williams, C. L., Bukosi, R. D., Pointer, M. A. Action of thiazide on renal interstitial calcium. Am. J. Hypertens. 21, 814-819 (2008).
  8. Palmer, C. E., Rudd, M. A., Bujoski, R. D. Renal interstitial Ca2+ during sodium loading of normotensive and Dal-salt hypertensive rats. Am. J. Hypertens. 16, 771-776 (2003).
  9. Hurwitz, S. Homeostatic control of plasma calcium concentration. Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 31, 41-100 (1996).
  10. Brown, E. M., MacLeod, R. J. Extracellular sensing and extracellular calcium signaling. Physiol. Rev. 81, 239-297 (2001).
  11. Breitwieser, G. E. Extracellular calcium as an integrator of tissue function. Int. J. Biochem. Cell Biol. 40, 1467-1480 (2008).
  12. Mupanomunda, M. M., Wang, Y., Bukoski, R. D. Effect of chronic sensory denervation on Ca2+-induced relaxation of isolated mesenteric resistance arteries. Am. J. Physiol. 274, 1655-1661 (1998).
  13. Mupanomunda, M. M., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Interstitial Ca2+ undergoes dynamic changes sufficient to stimulate nerve-dependent Ca2+-induced relaxation. Am. J. Physiol. 276, 1035-1042 (1999).
  14. Mupanomunda, M. M., Tian, B., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Renal interstitial Ca2+. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 278, F644-F649 (2000).
  15. Awumey, E. M., Hill, S. K., Diz, D. I., Bukoski, R. D. Cytochrome P-450 metabolites of 2-arachidonoylglycerol play a role in Ca2+-induced relaxation of rat mesenteric arteries. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2363-2370 (2008).
  16. Chen, W., Bergsman, J. B., Wang, X., Gilkey, G., Pierpoint, C. R., Daniel, E. A., Awumey, E. M., Dauban, P., Dodd, R. H., Ruat, M., Smith, S. M. Presynaptic external calcium signaling involves the calcium-sensing receptor in neocortical nerve terminals. PloS One. 5, e8563-e8563 (2010).
  17. Bukoski, R. D. The perivascular sensory nerve Ca2+ receptor and blood pressure regulation: a hypothesis. Am. J. Hypertens. 11, 1117-1123 (1998).
  18. Bukoski, R. D. Dietary Ca2+ and blood pressure: evidence that Ca2+-sensing receptor activated sensory nerve dilator activity couples changes in interstitial Ca2+ with vascular. 16, 218-221 (2001).
check_url/de/3119?article_type=t

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography. J. Vis. Exp. (55), e3119, doi:10.3791/3119 (2011).

View Video