Method Article

Mausmodell der Wundheilung

DOI:

10.3791/50265

May 28th, 2013

In This Article

Summary

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Ein Mausmodell von kutanen Wundheilung, die zur therapeutischen Verbindungen in physiologischen und pathophysiologischen Einstellungen beurteilen kann.

Abstract

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Wundheilung und Reparatur sind die komplexesten biologischen Prozesse, die im menschlichen Leben auftreten. Nach einer Verletzung, werden mehrere biologische Pfade aktiviert. Wundheilungsstörungen, die bei Diabetes-Patienten zum Beispiel auftritt, kann zu schweren ungünstigen Ergebnisse wie Amputation führen. Es besteht daher ein zunehmender Impulse neuen Substanzen, die die Wundheilung fördern, zu entwickeln. Die Prüfung dieser hat Großtiermodellen wie Schweine, die oft unpraktisch beschränkt. Mäuse sind die ideale präklinischen Modell, da sie wirtschaftlich und zugänglich genetische Manipulation, die für mechanistische Untersuchung erlaubt sind. Allerdings Wundheilung in einer Maus unterscheidet sich grundlegend von dem des Menschen, wie es geschieht primär durch Kontraktion. Unsere Mausmodell überwindet diese durch den Einbau einer Schiene um die Wunde. Durch Schienung die Wunde, ist die Reparatur dann abhängig von Epithelisierung, Zellproliferation und Angiogenese, die eng spiegeln diebiologische Prozesse der menschlichen Wundheilung. Während erfordern Konsistenz und Pflege, bedeutet das Mausmodell nicht mit komplizierten chirurgischen Techniken und erlaubt die robuste Prüfung vielversprechende Wirkstoffe, zum Beispiel die Angiogenese fördern oder hemmen Entzündungen. Weiterhin wirkt jede Maus als seine eigene Kontrolle als zwei Wunden bereit sind, so dass die Anwendung sowohl der Testverbindung und der Fahrzeugsteuerung am selben Tier. Abschließend zeigen wir eine praktische, einfach zu erlernen und robustes Modell der Wundheilung, die vergleichbar mit der des Menschen ist.

Introduction

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Wundheilungsstörungen ist verantwortlich für erheblichen Morbidität und Mortalität weltweit, dies gilt vor allem für Patienten mit Diabetes mellitus 1,2. Beim Menschen ist die Wundheilung ein Kontinuum von Prozessen, in denen es erhebliche Überschneidungen 3. Unmittelbar nach der Verwundung, entzündliche Prozesse initiiert werden. Entzündungszellen freizugeben Faktoren, die die Prozesse der Zellproliferation, Migration und Angiogenese zu fördern. Nach Reepithelisierung und neuem Gewebe gibt es eine Phase der Umgestaltung, die sowohl Apoptose und Neuorganisation der Matrixproteine ​​wie Kollagen bringt.

Die Komplexitä....

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Protocol

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1. Herstellung von Schienen und Okklusivverbänden

  1. Gliederung 10 mm Kreise auf 0,5 mm dicken Silikon-Folien und Verwendung einer Schere oder einem Biopsiestanze zu Silikon Festplatten erstellen.
  2. Center ein 5 mm Biopsiestanze in der Mitte des 10 mm Kreis und drücken Sie sie fest, um ein Loch, um einen "Donut"-ähnliche Scheibe, die wie eine Schiene verwendet werden Formular zu erstellen.
  3. Gliederung 10 mm Kreise auf einem transparenten Okklusivverband wie Opsite und mit einer Schere kreisförmigen Dressings erstellen.

2. Versuchstiere

  1. Erhalten Tier Ethikkommission Zulassung für alle Experimente, ....

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Results

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(Tag 0 Durchmesser / Tag x Durchmesser) - Wundverschlusssystem Kurve durch Berechnung des durchschnittlichen Durchmessers der gewickelten und Exprimieren der Ergebnisse in Prozent, also 100 bestimmt. In diesem Experiment wurde eine therapeutische Verbindung (oder MFK) wurde täglich auf die Wunde aufgetragen. Die therapeutische Verbindung stark beschleunigte Wundheilung (Abbildung 3). Es ist wichtig zu beachten, dass die Schienen für die Dauer des Experiments muss beibehalten werden, das Entfern.......

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Discussion

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Dies ist eine experimentelle Mausmodell der kutanen Wundheilung. Ein wesentliches Merkmal dieses Modells ist die Verwendung von Silikon-Schienen gewickelt Kontraktion zu verhindern, so dass Reepithelisierung und neuem Gewebe auftreten, so dass es ähnlich zu dem Verfahren, das in Menschen auftritt. Dieses Modell ist vielseitig und kann verwendet werden, um die Wundheilung bei sowohl physiologische und pathophysiologische (zB Diabetes mellitus) Einstellungen zu bewerten. Das Modell kann auch verwendet werden, um .......

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Disclosures

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Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Acknowledgements

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Die Autoren bedanken sich finanzielle Unterstützung aus dem National Health and Medical Research Council (NHMRC) von Australien (Projektstipendium ID: 632512) bestätigt. Louise Dunn wurde durch eine NHMRC Early Career Fellowship und Christina Bursill von einem National Heart Foundation Career Development Fellowship unterstützt.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Press-to-Seal-Silikonfolie 0,5 mm dickInvitrogenP18178Geschnitten in "Donuts" mit einem Außendurchmesser von 1 cm außen, 0,5 cm innendurchmesser
Biopsie-Stanze 5 mmSteifelBC-B1-0500Zur Umrandung des zu exzidierenden Wundbereichs
Vannas Schere 8,5 cm gebogenWorld Precision Instruments 501232Für Wundschnitt und Exzision
Dumonte #7b Pinzette, 11 cmWorld Precision Instruments501302Zum Greifen der Haut beim Erstellen von Schnitten und Exzidieren von Haut
Graefe-Zange, gezahnt 10 cmWorld Precision Instruments14142Zum Befestigen einer Silikonschiene an
der Haut Nadelhalter, glatte Backen, gebogen, 12,5 cmWorld Precision Instruments14132
Malis-Zange, glatt, gerade, 12 cmCodman and Shurtleff, Inc (J& Ampere; J)80-1500Zum Vernähen der Silikonringe mit der Haut
Lineal, 0,5 mm Abstufungn/a
Messschieber 0,25 mm AbstufungDuckworth und Kent9-653Zum Messen der Wundfläche
Gegenüberliegende FlexiFix transparente Klebefolie. 10 cm x 1 mSmith & Neffe66030570
Rimadyl (Carprofen)Pfizer462986

References

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  1. Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  2. Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
  3. ....

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Wound HealingMurine ModelSplinted WoundEpithelializationAngiogenesisBiopsy PunchOcclusive DressingLaser DopplerImmunohistochemical AnalysisWound Closure

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