Summary

Aortique ascendant constriction chez les rats pour la création de la surcharge de pression hypertrophie cardiaque Modèle

Published: June 29, 2014
doi:

Summary

Nous décrivons un procédé par étapes pour la création d'une surcharge de pression et de l'hypertrophie ventriculaire gauche chez des rats Wistar par constriction de l'aorte ascendante en utilisant une petite pince métallique. Ce modèle est largement utilisé pour étudier les changements de remodelage pendant l'hypertrophie cardiaque et pour identifier et évaluer les stratégies pour la régression de ces changements.

Abstract

Croissant rétrécissement aortique est le modèle chirurgicale la plus courante et efficace pour créer une surcharge de pression induite par l'hypertrophie cardiaque et l'insuffisance cardiaque. Ici, nous décrivons un procédé chirurgical détaillée pour créer une surcharge de pression et de l'hypertrophie cardiaque chez les rats par constriction de l'aorte ascendante en utilisant une petite pince métallique. Après l'anesthésie, la trachée est intubée par l'insertion d'une canule à travers une incision à mi-chemin entre deux anneaux faits de cartilage de la trachée. Puis une incision de la peau est effectuée au niveau du deuxième espace intercostal sur la paroi de la poitrine gauche et les couches musculaires sont effacées pour localiser la partie ascendante de l'aorte. L'aorte ascendante est resserré à 50-60% de son diamètre initial par l'application d'un petit clip de titane de taille. Suite à une constriction aortique, les deuxième et troisième nervures sont estimés à l'aide de sutures de prolène. La canule trachéale est retiré une fois que la respiration spontanée a été rétablie. L'animal est autorisé à récupérer on le coussin chauffant en abaissant progressivement l'anesthésie. L'intensité de la surcharge de pression créée par constriction de l'aorte ascendante est déterminé par l'enregistrement du gradient de pression en utilisant transthoracique bidimensionnelle Doppler échocardiographie. Globalement, ce protocole est utile d'étudier les événements de remodelage et les propriétés contractiles du coeur au cours de l'installation progressive et de la progression de l'hypertrophie cardiaque compensée à l'étape de l'insuffisance cardiaque.

Introduction

Petits modèles animaux sont les outils les plus privilégiées pour l'étude des changements chroniques dans le développement de l'hypertrophie cardiaque et sa progression vers l'insuffisance cardiaque. modèles d'insuffisance cardiaque par des méthodes chirurgicales ont été initialement développées chez le rat que ces animaux sont les plus appropriés pour les interventions chirurgicales thoraciques ouverte, l'échocardiographie et l'évaluation des paramètres hémodynamiques. Ils fournissent également des échantillons adéquats post mortem des tissus, cellulaire et des études au niveau moléculaire 1. Rétrécissement de l'aorte ascendante est l'un des modèles chirurgicales les plus courantes et efficaces pour la création d'insuffisance cardiaque de surcharge de pression 2, 3. Ce modèle est bien adapté pour étudier les événements de remodelage cellulaire cellulaires et sous et les propriétés contractiles du coeur pendant la transition de l'hypertrophie de l'insuffisance cardiaque 4.

Un avantage important de ce modèle est l'apparition progressive d'une surcharge de pression sur le coeur 5, </ Sup> 6. Ce modèle est cliniquement pertinente en raison de sa progression lente mais constante de l'hypertrophie cardiaque compensée à la phase décompensée et enfin au stade de l'insuffisance cardiaque. La durée de la progression de l'hypertrophie cardiaque de l'insuffisance cardiaque et les changements physiologiques associés sont principalement influencés par le degré de sténose produit 7. Croissant constriction aortique peut être réalisé de deux manières, soit en utilisant des sutures ou par application d'agrafes métalliques 8, 9. Le principal avantage de l'utilisation d'un clip métallique pour une constriction aortique est que les procédures chirurgicales sont moins compliqués. Dans cette méthode, il faut localiser le supra valvulaire de l'aorte ascendante et insérer le clip autour de l'aorte pour obtenir un niveau désiré de constriction. Enrouleur de poitrine n'est pas nécessaire dans ce mode opératoire. Cerclage aortique par suture nécessite plusieurs manipulations chirurgicales pour placer l'aiguille de l'indicateur à côté de l'aorte ascendante et de la suture autour d'elle pourproduire le niveau de constriction aortique souhaitée. Cette dernière technique est plus longue en comparaison avec l'utilisation de clips métalliques pour une constriction aortique. La méthode décrite dans cette vidéo montre la procédure chirurgicale pour ascendant constriction aortique chez les rats qui permet la création d'une pression modèle de l'hypertrophie ventriculaire gauche surchargé.

Protocol

Les expérimentations animales ont été effectuées après l'obtention de l'approbation du Comité d'éthique animale institutionnel. Des rats Wistar ont été logés dans une obscurité de 12 h à cycle de lumière, température ambiante constante (24 ± 2 ° C) avec de la nourriture et de l'eau ad libitum (selon les lignes directrices de CPCSEA). 1) Soins pré-opératoire et anesthésie Gardez rat (environ 200 g de poids corporel) sous antibiotique parapluie 24 …

Representative Results

Dans nos expériences, nous sommes en mesure d'atteindre plus de 80% des taux de survie. L'efficacité de constriction aortique a été confirmée par une échocardiographie Doppler. Les rats (n = 6) avec un gradient de pression d'environ 60 mm de Hg à l'endroit étranglé aortique ont été observés pendant 8 semaines et sacrifiés à analyser pour le développement de l'hypertrophie cardiaque (figure 1). Après 8 semaines évaluation échocardiographique post-chirurgicale a rév?…

Discussion

Il existe plusieurs modèles chirurgicales pour l'induction d'une surcharge de pression, ainsi que l'hypertrophie cardiaque et l'insuffisance cardiaque. Chez les petits animaux, Lorell et ses collègues ont développé le modèle que nous avons décrit ici et ils ont signalé l'apparition de l'hypertrophie cardiaque compensée 8 semaines après de baguage aortique 5. Modifications cardiaques passent progressivement à un état décompensée et aboutissent à l'insuffisance cardiaqu…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs reconnaissent Département de biotechnologie, gouvernement de l'Inde pour le soutien financier de ce projet. Ajith Kumar GS a été pris en charge avec bourse de recherche principal du Conseil de recherche scientifique et industrielle, gouvernement de l'Inde et Binil Raj avec bourse de recherche principal du Conseil indien de la recherche médicale, gouvernement de l'Inde.

Materials

Wistar rats Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems  VetEquip AB19276
Rodent ventilator CWE Inc SAR- 830/AP 
Rat tracheal cannula CWE Inc 13-21032
Ultrasound system Philips HD7
Ultrasound transducer Philips S 12
Titanium clip (small) Horizon 1204
Clip applicator Weck 137081
Electric shaver Vinverth VBT0817
BP blade (size:11) Surgeon REF10111 Preparation of surgical site
Tramadol Orchid health care OCH043
Amoxycillin Hydrochloride Ranbaxy
Isoflurane Piramal health care A23M10A
Syringes BD 2015-09
4-0 braided silk Diamond
3-0 prolene Johnson&Johnson NW018
Surgical tape Romsons SH 6301
Povidone iodine Win Medicare
Temp. controlled heating pad Flamingo HC1003

Referenzen

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Diesen Artikel zitieren
GS, A. K., Raj, B., S, S. K., G, S., Kartha, C. C. Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model. J. Vis. Exp. (88), e50983, doi:10.3791/50983 (2014).

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