Summary

Crescente aortica Costrizione in ratti per la creazione di sovraccarico di pressione cardiaca Ipertrofia Modello

Published: June 29, 2014
doi:

Summary

Descriviamo una procedura graduale per la creazione di sovraccarico di pressione e ipertrofia ventricolare sinistra in ratti Wistar dalla costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i cambiamenti di rimodellamento durante l'ipertrofia cardiaca e per identificare e valutare le strategie per la regressione di tali cambiamenti.

Abstract

Crescente costrizione aortica è il modello chirurgica più comune e di successo per la creazione di sovraccarico di pressione indotta ipertrofia cardiaca e insufficienza cardiaca. Qui, descriviamo una procedura chirurgica dettagliata per la creazione sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca in ratti mediante costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Dopo l'anestesia, la trachea è intubato inserendo una cannula attraverso un'incisione a metà strada tra due anelli di cartilagine trachea. Poi una incisione cutanea viene effettuata a livello del secondo spazio intercostale sulla parete toracica sinistra e strati muscolari vengono cancellati per identificare la parte ascendente dell'aorta. L'aorta ascendente viene costretto a 50-60% del suo diametro originale mediante applicazione di una piccola clip titanio dimensioni. A seguito di costrizione aortica, la seconda e terza costola vengono approssimate con punti di sutura prolene. La cannula tracheale viene rimossa la respirazione spontanea una volta è stata ristabilita. L'animale è permesso di recuperare on per il rilievo di riscaldamento abbassando gradualmente anestesia. L'intensità del sovraccarico di pressione creata dalla costrizione dell'aorta ascendente è determinato registrando il gradiente di pressione utilizzando transtoracica bidimensionale Doppler-ecocardiografia. Nel complesso questo protocollo è utile per studiare gli eventi di rimodellamento e le proprietà contrattili del cuore durante la graduale insorgenza e la progressione da compensata ipertrofia cardiaca allo stadio di insufficienza cardiaca.

Introduction

Modelli piccoli animali sono gli strumenti più preferite per lo studio dei cambiamenti cronici nello sviluppo di ipertrofia cardiaca e la sua progressione a insufficienza cardiaca. Modelli di insufficienza cardiaca con metodi chirurgici sono stati originariamente sviluppati in ratti in quanto questi animali sono più adatti per interventi chirurgici al torace aperto, ecocardiografia e la valutazione dei parametri emodinamici. Essi forniscono inoltre adeguate campioni post mortem di tessuti, cellule e gli studi a livello molecolare 1. Costrizione dell'aorta ascendente è uno dei modelli chirurgiche più comuni e di successo per la creazione di sovraccarico di pressione insufficienza cardiaca 2, 3. Questo modello è adatto per studiare gli eventi rimodellamento cellulare cellulari e sub e le proprietà contrattili del cuore durante la transizione da ipertrofia ad infarto 4.

Un importante vantaggio di questo modello è la graduale insorgenza di sovraccarico di pressione sul cuore 5, </ Sup> 6. Questo modello è clinicamente rilevante a causa della sua lenta ma costante progressione da ipertrofia cardiaca compensata a fase scompensata e infine alla fase insufficienza cardiaca. La durata per la progressione dell'ipertrofia cardiaca per insufficienza cardiaca e cambiamenti fisiologici associati sono influenzati principalmente dal grado di stenosi prodotto 7. Ascendente costrizione aortica può essere eseguita in due modi, sia utilizzando suture o mediante l'applicazione di clips metalliche 8, 9. Il principale vantaggio di utilizzare un clip metallico per costrizione aortica è che le procedure chirurgiche sono meno complicati. In questo metodo si deve individuare la sovra valvolare dell'aorta ascendente e inserire la clip attorno l'aorta per ottenere il livello desiderato di costrizione. Un divaricatore petto non è necessario in questa procedura. Banding aortico da sutura richiede manipolazioni più chirurgici per posizionare l'ago calibro accanto alla aorta ascendente e sutura intorno aprodurre il livello desiderato di costrizione aortica. Quest'ultima tecnica è più tempo rispetto all'uso di clips metalliche per costrizione aortica. Il metodo descritto in questo video mostra la procedura chirurgica per crescente costrizione aortica in ratti che permette la creazione di pressione sovraccarico ventricolare sinistra ipertrofia modello.

Protocol

Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti dopo aver ottenuto l'approvazione del Comitato Etico Animal Istituzionale. Ratti Wistar sono stati alloggiati in un buio 12 ore al ciclo di luce, temperatura costante (24 ± 2 ° C), con cibo e acqua ad libitum (secondo le linee guida CPCSEA). 1) Assistenza pre-operatoria e anestesia Tenere rat (circa 200 g di peso corporeo), sotto antibiotico ombrello 24 ore prima dell'intervento chirurgico con la somministrazione di amoxi…

Representative Results

Nei nostri esperimenti siamo in grado di raggiungere oltre il 80% i tassi di sopravvivenza. L'efficacia di costrizione aortica è stata confermata eseguendo ecocardiografia Doppler. Ratti (n = 6) con un gradiente di pressione di circa 60 mm di Hg nel sito ristretta aortica sono stati osservati per 8 settimane e sacrificato per analizzare lo sviluppo di ipertrofia cardiaca (Figura 1). Dopo 8 settimane di valutazione ecocardiografica post-chirurgia ha rivelato un significativo aumento dei parametri ve…

Discussion

Ci sono diversi modelli chirurgici per l'induzione di sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco. In piccoli animali, Lorell e colleghi hanno sviluppato il modello che abbiamo descritto qui ed hanno segnalato la comparsa di ipertrofia cardiaca compensata 8 settimane dopo banding aortico 5. Alterazioni cardiache gradualmente progredire a uno stato scompensata e poi portare a insufficienza cardiaca. Il vantaggio principale di questo modello è la graduale insorgenza di aumento dell…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Gli autori riconoscono Dipartimento di Biotecnologie, Governo dell'India per il sostegno finanziario di questo progetto. Ajith Kumar GS è stato sostenuto con borsa di ricerca senior Consiglio di ricerca scientifica e industriale, Governo dell'India e Binil Raj con assegno di ricerca senior Consiglio indiano di ricerca medica, Governo dell'India.

Materials

Wistar rats Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems  VetEquip AB19276
Rodent ventilator CWE Inc SAR- 830/AP 
Rat tracheal cannula CWE Inc 13-21032
Ultrasound system Philips HD7
Ultrasound transducer Philips S 12
Titanium clip (small) Horizon 1204
Clip applicator Weck 137081
Electric shaver Vinverth VBT0817
BP blade (size:11) Surgeon REF10111 Preparation of surgical site
Tramadol Orchid health care OCH043
Amoxycillin Hydrochloride Ranbaxy
Isoflurane Piramal health care A23M10A
Syringes BD 2015-09
4-0 braided silk Diamond
3-0 prolene Johnson&Johnson NW018
Surgical tape Romsons SH 6301
Povidone iodine Win Medicare
Temp. controlled heating pad Flamingo HC1003

Referenzen

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Diesen Artikel zitieren
GS, A. K., Raj, B., S, S. K., G, S., Kartha, C. C. Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model. J. Vis. Exp. (88), e50983, doi:10.3791/50983 (2014).

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