Ascendente aórtica Constricción en ratas para la Creación de la sobrecarga de presión hipertrofia cardíaca Modelo

Summary

Se describe un procedimiento paso a paso para la creación de la sobrecarga de presión e hipertrofia del ventrículo izquierdo en ratas Wistar por la constricción de la aorta ascendente mediante un pequeño clip metálico. Este modelo se utiliza ampliamente para el estudio de los cambios de remodelación durante la hipertrofia cardíaca y para la identificación y evaluación de las estrategias para la regresión de dichos cambios.

Abstract

Ascendente constricción de la aorta es el modelo quirúrgico más común y exitoso para la creación de la sobrecarga de presión inducida por la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardíaca. Aquí se describe un procedimiento quirúrgico detallado para la creación de la sobrecarga de presión e hipertrofia cardiaca en ratas mediante la constricción de la aorta ascendente mediante un pequeño clip metálico. Después de la anestesia, la tráquea se intuba mediante la inserción de una cánula a través de una incisión media manera hecha entre dos anillos de cartílago de la tráquea. A continuación, una incisión en la piel se hace a nivel del segundo espacio intercostal en la pared torácica izquierda y capas musculares se borran hasta encontrar la parte ascendente de la aorta. La aorta ascendente se estrecha a 50-60% de su diámetro original mediante la aplicación de un pequeño clip de titanio de tamaño. Después de constricción de la aorta, las segunda y tercera costillas son aproximadas con suturas de prolene. Se restableció Se retira la cánula traqueal respiración espontánea una vez. Se deja que el animal pueda recuperarse On el cojín de calefacción mediante la reducción gradual de la anestesia. La intensidad de la sobrecarga de presión creada por la constricción de la aorta ascendente se determina mediante el registro de la gradiente de presión utilizando transtorácica bidimensional ecocardiografía Doppler. En general, este protocolo es útil para estudiar los eventos de remodelación y las propiedades contráctiles del corazón durante la aparición gradual y la progresión de la hipertrofia cardiaca compensada a la etapa de la insuficiencia cardíaca.

Introduction

Pequeños modelos animales son los instrumentos preferidos para el estudio de los cambios crónicos en el desarrollo de hipertrofia cardiaca y su progresión a la insuficiencia cardíaca. Modelos de insuficiencia cardíaca por métodos quirúrgicos fueron desarrollados originalmente en ratas ya que estos animales son los más adecuados para los procedimientos quirúrgicos del pecho abierto, la ecocardiografía y la evaluación de los parámetros hemodinámicos. También proporcionan muestras post mortem adecuados para estudios de nivel ¹ moleculares del tejido, celular y. La constricción de la aorta ascendente es uno de los modelos quirúrgicos más comunes y exitosos para la creación de la sobrecarga de presión insuficiencia cardíaca ^{2, 3.} Este modelo es muy adecuado para estudiar los eventos de remodelación celular celulares y sub y las propiedades contráctiles del corazón durante la transición de hipertrofia a la insuficiencia cardiaca ^4.

Una ventaja importante de este modelo es la aparición gradual de la sobrecarga de presión sobre el corazón ^{5, <}/ Sup> ^6. Este modelo es clínicamente relevante debido a su lenta pero constante progresión de la hipertrofia cardiaca compensada a la fase descompensada y finalmente a la etapa de la insuficiencia cardíaca. La duración para la progresión de la hipertrofia cardíaca a la insuficiencia cardíaca y los cambios fisiológicos asociados están influenciados principalmente por el grado de estenosis producido ^7. Ascendente constricción de la aorta se puede realizar de dos maneras, ya sea mediante el uso de suturas o por aplicación de clips metálicos ^{8, 9.} La principal ventaja de utilizar un clip metálico para constricción de la aorta es que los procedimientos quirúrgicos son menos complicados. En este método se tiene que localizar la aorta ascendente supra valvular e inserte la pinza alrededor de la aorta para obtener el nivel deseado de constricción. Un retractor de pecho no es necesario en este procedimiento. Aórtica mediante sutura requiere manipulaciones más quirúrgicas para la colocación de la aguja de calibre al lado de la aorta ascendente y la sutura alrededor de ella paraproducir el nivel deseado de constricción de la aorta. La última técnica es más lento en comparación con el uso de clips metálicos para la constricción de la aorta. El método descrito en este video demuestra el procedimiento quirúrgico para la constricción de la aorta ascendente en ratas que permite la creación de presión modelo de hipertrofia ventricular izquierda sobrecargado.

Protocol

Los experimentos con animales se realizaron después de obtener la aprobación del Comité de Ética Animal Institucional. Ratas Wistar fueron alojados bajo una oscuridad de 12 horas para el ciclo de luz, temperatura constante (24 ± 2 ° C) con comida y agua ad libitum (según las directrices CPCSEA). 1) Cuidado Pre-operatorio y anestesia Mantener la rata (aproximadamente 200 g de peso corporal) en virtud de antibiótico paraguas 24 horas antes de la cirugía mediante la administ…

Representative Results

En nuestros experimentos podemos lograr más del 80% las tasas de supervivencia. La eficacia de la constricción de la aorta fue confirmada mediante la realización de ecocardiografía Doppler. Las ratas (n = 6) con un gradiente de presión de aproximadamente 60 mm de Hg en el sitio de constricción aórtica se observaron durante 8 semanas y se sacrificaron a analizar para el desarrollo de la hipertrofia cardíaca (Figura 1). Después de 8 semanas de evaluación ecocardiográfica después de la cirugía…

Discussion

Hay varios modelos quirúrgicos para la inducción de la sobrecarga de presión, así como la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardíaca. En pequeños animales, Lorell y sus colegas desarrollaron el modelo que hemos descrito aquí y reportaron la ocurrencia de hipertrofia cardiaca compensada 8 semanas después aórtica ^5. Cambios cardíacos avancen paulatinamente hacia un estado descompensada y luego dan lugar a la insuficiencia cardíaca. La principal ventaja de este modelo es la aparición gradual d…

Materials

Wistar rats			Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems	VetEquip	AB19276
Rodent ventilator	CWE Inc	SAR- 830/AP
Rat tracheal cannula	CWE Inc	13-21032
Ultrasound system	Philips	HD7
Ultrasound transducer	Philips	S 12
Titanium clip (small)	Horizon	1204
Clip applicator	Weck	137081
Electric shaver	Vinverth	VBT0817
BP blade (size:11)	Surgeon	REF10111	Preparation of surgical site
Tramadol	Orchid health care	OCH043
Amoxycillin Hydrochloride	Ranbaxy
Isoflurane	Piramal health care	A23M10A
Syringes	BD	2015-09
4-0 braided silk	Diamond
3-0 prolene	Johnson&Johnson	NW018
Surgical tape	Romsons	SH 6301
Povidone iodine	Win Medicare
Temp. controlled heating pad	Flamingo	HC1003