Das experimentelle Modell der intrakraniellen druckkontrollierten Blutshunt-Subarachnoidalblutung (SAB) beim Kaninchen kombiniert die Standardverfahren — Kanülierung der Arteria subclavia und transkutane Cisterna-magna-Punktion, was eine genaue Nachahmung der menschlichen pathophysiologischen Zustände nach SAB ermöglicht. Wir präsentieren Schritt-für-Schritt-Anleitungen und besprechen die wichtigsten chirurgischen Punkte für eine erfolgreiche experimentelle SAH-Erstellung.
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Methodenartikel
Das Kaninchen Blut-Shunt-Modell für die Untersuchung von akuten und Spätfolgen Subarachnoidalblutung: Technische Aspekte
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Frühen Hirnverletzung und verzögert zerebralen Vasospasmus beide zur ungünstige Ergebnisse nach Subarachnoidalblutung (SAB). Reproduzierbar und kontrollierbar Tiermodellen, die beide Bedingungen zu simulieren, sind derzeit ungewöhnlich. Daher werden neue Modelle, um die menschliche pathophysiologischen Bedingungen von SAH resultierenden imitieren benötigt.
Dieser Bericht beschreibt die technischen Nuancen eines Kaninchenblut-Shunt-Modell, das SAH Kontrolle der intrazerebralen Druck (ICP) ermöglicht. Ein extrakorporalen Shunt zwischen dem arteriellen System und den Subarachnoidalraum, die Prüfer-unabhängige SAH in einem geschlossenen Schädel ermöglicht platziert. Schritt-für-Schritt-Handlungsanweisungen und notwendige Ausrüstung beschrieben werden, sowie technische Überlegungen, um das Modell mit minimaler Morbidität und Mortalität zu produzieren. Wichtige Details für die erfolgreiche chirurgische Schaffung dieses robuste, einfache und konsistente ICP-gesteuerten SAH Kaninchenmodell erforderlich sind, beschrieben.
Einleitung
Aneurysmatischen Subarachnoidalblutung (SAB) ist einer der am meisten lebensbedrohlichen neuropathologischen Bedingungen, häufig zu bleibenden neurologischen Schäden oder Tod führen 1. Historische Forschung hat sich auf verzögerte Hirnvasospasmus (DCVS) als primäre Ursache der neurologischen Defizite mit SAH 2 zugeordnet konzentriert. Allerdings hat der allgemein schlechten klinischen Ergebnisse von Patienten mit SAB nach der Behandlung von Vasospasmus zu einer Ausweitung der Forschungsschwerpunkt geführt, um die Auswirkungen der frühen Hirnverletzung (EBI) nach SAB 3 gehören. Mehr Verständnis für die Bedeutung der beiden EBI und DCVS....
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Protokoll
Drei Monate alten weiblichen Neuseeland-Kaninchen mit einem Gewicht von 2,5 bis 3,5 kg wurden für dieses Verfahren verwendet. Die Studie wurde in Übereinstimmung mit den National Institutes of Health Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren und mit der Genehmigung des Animal Care Committee des Kantons Bern, Schweiz (# 105 der Zulassung / 13) durchgeführt. Alle chirurgischen Verfahren wurden unter sterilen Bedingungen an der Experimental Surgical Institute der Fakultät für Klinische Forschung an der Universität Bern Krankenhaus in Bern, Schweiz durchgeführt. Ein Anästhesist überwacht Tier die Tiere während der Operation und während Genesung.
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Ergebnisse
Die Kaninchenblut Shunt-Modell SAH in diesem Bericht beschriebenen produziert EBI im Hippocampus (Abbildung 2a, b), basale Kortex (Abbildung 2a, b), und zerebrale Gefäßsystem (Abbildung 2C) bereits 24 Stunden nach der Verletzung und zeigt eine charakteristische Blutverteilung (2D) 8. Außerdem löst das Modell moderaten bis schweren Grad der DCVS am dritten Tag nach der SAH Induktion (Figur 3) 10. Die Mortalitätsrate.......
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Diskussion
Der Shunt-Modell produziert Pathologie ähnlich wie beim Menschen nach akuter SAH 3,8,10 beobachtet. Es wurde vorgeschlagen, dass EBI kann verschärfen, zu pflegen und sogar auslösen DCVS 12, und als solche kann dieses Modell bei der Untersuchung sowohl die frühen und späten Phasen DCVS, einschließlich EBI und DCVS Wechselwirkungen folgenden SAH unterstützen. Insbesondere, wiederholbare in vivo DCVS Überwachungstechniken einschließlich DSA 13, Computertomographie-Angiographie
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Offenlegungen
Nichts. Die Autoren haben kein finanzielles oder kommerzielles Interesse an den verwendeten Medikamenten, Materialien oder Geräten. Für diese Arbeit wurden keine spezifischen Mittel bereitgestellt. Die Autoren sind allein verantwortlich für das Design und die Durchführung der vorgestellten Studie und berichten über keinen Interessenkonflikt in Bezug auf die in dieser Studie verwendeten Materialien und Methoden oder die in der Arbeit spezifizierten Ergebnisse. Sie bestätigen die Einhaltung ethischer Standards. Die Studie wurde in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Nationalen Gesundheitsinstitute für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren und mit Genehmigung der Tierschutzkommission des Kantons Bern, Schweiz, durchgeführt (Zulassung #109/07 und #107/09).
Danksagungen
Die Autoren danken Laurie von Melchner, Inselspital Bern, Klinik für Neurochirurgie, Bern, Schweiz, für das Korrekturlesen und Editieren des Manuskripts und Paskus Jeremia, Boston Kinderkrankenhaus, Boston, MA für das Korrekturlesen des ersten Entwurfs. Wir schätzen die geschickte Verwaltung der Tierpflege, Anästhesie und operative Unterstützung von Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar und Olgica Beslać, Experimentelle Chirurgische Institut, Abteilung für Klinische Forschung der Universität Bern, Bern, Schweiz. Wir danken Michael Lensch, Leiter Forschung Nurse, Klinik für Intensivmedizin, Inselspital Bern und der Universität Bern, Bern, Schweiz, für E....
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Ausstattung | |||
| Operationsmikroskop | Zeiss, Jena, Deutschland | Zeiss, OPMI-MD Operationsmikroskop | |
| Chirurgische Ausstattung | B. Braun, Deutschland | Pinzette medical Nr. 5; Gefäßschere 8 cm; Mikroclip 4 mm | |
| Atemschutzmaske | Hugo Sachs | ||
| Haarschneider | 3M Chirurgischer Haarschneider | Starter Kit 9667A | |
| Körperwarmhalteplatte | FHC | ||
| Blutgasanalysator | Radiometer, Kopenhagen, Dänemark | ABL 725 | |
| Herzüberwachung | Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| Softwareanalyse | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA | Biopac MP100 und acqKnowledge Software, Version 3.8.1 | |
| Software-Analyse | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | Image-Pro Plus Version | |
| Angiographiegerät | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| ICP-Monitor | Camino Laboratories, San Diego, CA, USA | ICP-Monitor, Modell 110-4B | |
| Blutflussmonitor | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | CAL KIT Mikrosphärenlösung | |
| Laser-Doppler-Flowmetrie Feinnadelsonden | Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK | MNP110XP, 0,48 mm | |
| Druckschlauch | B. Braun, Germay | PE 1,0 mm &fach 2,0 mm | |
| Anästhesiemonitor | GE Medical Systems, Schweiz | Datex S5 | |
| Monitormaterial | |||
| 20 G Gefäßkatheter | Smiths Medical | Jelco i.v. Katheter, REF 4057 | |
| 5,5 F dreilumiger zentraler Venenkatheter | Konnektoren, Tagelswangen, Schweiz | Silikonkatheter STH-C040 | |
| 22 G x 40 mm Nadel | Emergo Group Inc., Niederlande | ||
| Hochgeschwindigkeits-Mikrobohrmaschine | Stryker, Solothurn, Schweiz | 5400-15 | |
| Knochenwachs | Ethicon, Johnson & Ltd. Johnson, NJ, USA | ETHW31G | |
| Bipolare Pinzette | Aesculap, Inc., PA, USA | US349SP | |
| Ketamin | Jedes generische | ||
| Produkt Xylazin | Jedes generische Produkt | ||
| Buprenorphin | Jedes generische Produkt | ||
| Fentanyl | Jedes generische Produkt | ||
| Transdermale Fentanyl-Matrix-Pflaster | Jedes Generikum | ||
| Lidocain 1% | Jedes generische Produkt | ||
| 4% Papaverin HCl | Jedes generische Produkt | ||
| Neomycinsulfat | Research Organics Inc., OH, USA | Jedes generische Produkt | |
| Povidon-Jod | Jedes Generikum | ||
| 0,9 % Natriumchlorid | Jedes Generikum | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, USA | Jedes generische Produkt | |
| 3-0 resorbierbares Nahtmaterial | Ethicon Inc., USA | VCP824G | |
| 5-0 nicht resorbierbares Nahtmaterial | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 4-0 Polyfilament Nahtmaterial | Ethicon Inc., USA | VCP284G |
Referenzen
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.
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Nachdrucke und Genehmigungen
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