Milchsammlung in der Ratte Mit Kapillarröhrchen und Schätzung der Milchfettgehalt von Creamatocrit

Zusammenfassung

Milch ist eine primäre Nahrungsquelle für das Neugeborene. Die Analyse von Milchbestandteilen kann Aufschluss über mütterliche Faktoren geben, die sich auf die Gesundheit der Nachkommen auswirken. Dieses Protokoll beschreibt eine manuelle Methode zur Entnahme von Milchproben von der laktierenden Ratte, die dann für weitere nachgelagerte Analysen verwendet werden können.

Zusammenfassung

Milch liefert als einzige Nahrungsquelle für das neugeborene Säugetier die notwendigen Nährstoffe und Energie für das Wachstum und die Entwicklung der Nachkommen. Es enthält auch eine große Anzahl von bioaktiven Verbindungen, die die Entwicklung des Neugeborenen stark beeinflussen. Die Analyse der Milchbestandteile wird dazu beitragen, Schlüsselfaktoren aufzuklären, die den Stoffwechsel und die Gesundheit der Mutter mit dem Wachstum und der Entwicklung der Nachkommen verbinden. Die Laborratte stellt einen beliebten Modellorganismus für mütterliche Studien dar, und Rattenmilch kann verwendet werden, um die Wirkung verschiedener mütterlicher physiologischer, ernährungsphysiologischer und pharmakologischer Eingriffe auf Milchbestandteile zu untersuchen, die sich dann auf die Gesundheit der Nachkommen auswirken können. Hier wird eine einfache Methode zur manuellen Entnahme von Milch von der laktierenden Ratte beschrieben, die von einem einzigen Untersucher durchgeführt werden kann, keine spezielle Vakuum- oder Absaugausrüstung erfordert und ausreichend Milch für die nachfolgende Analyse liefert. Ein Verfahren zur Schätzung des Fettgehalts von Milch durch Messung des Sahneanteils in der Milchprobe, bekannt als Creamatocrit, wird ebenfalls vorgestellt. Diese Methoden können letztendlich verwendet werden, um den Einblick in die Gesundheit von Mutter und Kind zu verbessern und mütterliche Faktoren aufzuklären, die am richtigen Wachstum und der Entwicklung der Nachkommen beteiligt sind.

Einleitung

Milch ist die einzige Nahrungsquelle für neugeborene Säugetiere, die Bereitstellung von Energie und Nährstoffe für das Kinderwachstum und Entwicklung ^1,2. Während Milch besteht hauptsächlich aus Zellen, Lipide und ^Protein-1, es enthält auch eine Vielzahl von bioaktiven Verbindungen, die frühen Lebens Entwicklung der Nachkommenschaft einschließlich Enzyme, Kohlenhydrate, Hormone, Antikörper, Wachstumsfaktoren, Cytokine, Exosomen, Mikrovesikel und kleinen RNAs wie zu modulieren wie microRNA ^1,2. Die grundlegende Rolle der Muttermilch in der Gründung der Nachkommen Immun- und Darmgesundheit ^3, verbunden mit dem Nachweis, dass ....

Protokoll

Dieses Protokoll wurde von der University of Calgary Animal Care Committee genehmigt und angepasst an den Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren.

1. Separate Dam von Offspring

1. Trennen Sie die Staumauer aus ihren Nachwuchs für mindestens 5 Minuten vor dem Melken ^12.
   HINWEIS: Der Damm kann bis zu 5-6 Stunden nach der Trennung ^1,6,13 gemolken werden jedoch Zeiten der Trennung länger als 4 Stunden kann die Zusammensetzung der Milch ¹⁴ zu ändern. Während Trennzeit scheint nicht zu beeinflussen ^{Milchsammelvolumen} 12, ist es ratsam, dass eine konsequente Tren....

Ergebnisse

Milch wurde wie bei der Entwöhnung von Wistar Dämme beschrieben gesammelt (ca. 22 Wochen alt, mit einem Gewicht von 350 bis 400 g), das ein Steuerelement, protein verbraucht (AIN-93G-5, n =) (40% Casein wt / wt, n = 5) oder Hoch präbiotische Ballaststoffe (21,6% Gewicht / Gewicht, 1: 1-Verhältnis von Oligofructose und Inulin, n = 4) Ernährung während der Schwangerschaft und Stillzeit. Die Oxytocin-Dosis betrug 2 IU. Milch wurde gesammelt unter Verwendung von Kapillaren und einem Rohr wurde mit einem Hämatokrit Spinner c.......

Diskussion

Die Untersuchungen zu den Bestandteilen der Muttermilch haben mit dem zunehmenden Interesse an der Forschung zur Entwicklung des frühen Lebens zugenommen. Als einzige Nahrungsquelle während der Neugeborenenperiode sind die bioaktiven Verbindungen in der Milch für ein ideales Wachstum und eine ideale Entwicklung unerlässlich, insbesondere im Zusammenhang mit der Darm- und Immungesundheit³. Bei dem hier vorgestellten Verfahren handelt es sich um ein einfaches, nicht-invasives Verfahren zur Entnahme von Milch von.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Equipment - Melken
1 ml Spritzen	BD-Canada	309602
25 G Nadeln	BD-Canada	305122
18 G Nadeln	BD-Canada	305196
50 μmu; l Mikrospender Kapillarröhrchen	Fisher Scientific	21-169D
Oxytocin (20 USP Einheiten/ml)	Bimeda-MTC	1OXY015
PPC Vet Isofluran Inhalationsanästhetikum, 250 ml	Fresenius Kabi	M60302	Wird auf Bestellung eines Tierarztes
Steriles Alkoholvorbereitungspad	Dukal	853
Absorbent Bench Pad	VWR	82020-845
Maxi-Therm Hyper/Hypothermie-Decke	Cincinnati Sub-Zero	274
Nagetier-Anästhesiegerät mit Verdampfer	Benson Medical Industries Inc.		Abhängig von den individuellen Laboranforderungen
: Tiermasken,	Benson Medical Industries, Inc.	50100/50102
Mikrozentrifugenröhrchen	Axygen	MCT-060-C
ChroMini Professional Trimmer	Wahl
Equipment - Creamatocrit
StatSpin SafeCrit Mikrohämatokritröhrchen aus Kunststoff (unbehandelt)	Fisher Scientific	22-274-914
Critoseal Kapillarrohr-Dichtstoffwanne	VWR	470161-478
StatSpin CritSpin Mikrohämatokrit-Zentrifuge	Beckman Coulter, Inc	X00-004999-001

verwendet