Diese Arbeit demonstriert die Leistung von Akupunktur, Epilepsiemodellen und der Analyse des Schlafes bei Nagetieren. Das Verfahren der Akupunktur und die Identifizierung von Akupunkturpunkten werden beschrieben. Pilocarpin oder Pentylentetrazol (PTZ) wird verwendet, um Epilepsie zu induzieren. Für die Schlafanalyse werden Elektrokortikogramm (ECoG), Elektromyogramm (EMG), Gehirntemperatur und Bewegungsaktivitätsaufzeichnungen verwendet.
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Methodenartikel
Manipulation von Epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) und Schlaf bei Ratten und Mäusen durch Akupunktur
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die alte chinesische Literatur hat dokumentiert, dass Akupunktur effiziente therapeutische Wirkungen bei Epilepsie und Schlaflosigkeit besitzt. Es gibt jedoch nur wenige Forschungsergebnisse, um die möglichen Mechanismen hinter diesen Effekten aufzudecken. Um die Wirkung der Akupunktur auf Epilepsie und Schlaf zu untersuchen, müssen mehrere Fragen geklärt werden. Die erste besteht darin, die Akupunkturpunkte zu identifizieren, die zwischen Menschen, Ratten und Mäusen entsprechen. Des Weiteren müssen die Einstichtiefe der Akupunkturnadel, der Grad der Nadelverdrehung bei der manuellen Nadelakupunktur und die Stimulationsparameter für die Elektroakupunktur (EA) bestimmt werden. Um die Auswirkungen der Akupunktur auf Epilepsie und Schlaf zu bewerten, ist ein praktikables Modell der Epilepsie bei Nagetieren erforderlich. Wir verabreichen Pilocarpin in den linken zentralen Kern der Amygdala (CeA), um die fokale Temporallappenepilepsie (TLE) bei Ratten zu simulieren. Die intraperitoneale (IP) Injektion von Pilocarpin induziert bei Ratten generalisierte Epilepsie und Status epilepticus (SE). Fünf IP-Injektionen von Pentylentetrazol (PTZ) mit einem eintägigen Abstand zwischen jeder Injektion führen bei Mäusen erfolgreich zu spontaner generalisierter Epilepsie. Aufzeichnungen von Elektrokortikogrammen (ECoGs), Elektromyogrammen (EMGs), Gehirntemperatur und Bewegungsaktivität werden für die Schlafanalyse bei Ratten verwendet, während ECoGs, EMGs und Bewegungsaktivität für die Schlafanalyse bei Mäusen verwendet werden. ECoG-Elektroden werden in den frontalen, parietalen und kontralateralen Hinterhauptkortex implantiert, und ein Thermistor wird durch stereotaktische Chirurgie über der Großhirnrinde implantiert. EMG-Elektroden werden in die Nackenmuskulatur implantiert, und ein Infrarotdetektor bestimmt die Bewegungsaktivität. Die Kriterien für die Kategorisierung von Vigilanzstadien, einschließlich Wachheit, REM-Schlaf (Rapid Eye Movement) und Nicht-REM-Schlaf (NREM), basieren auf Informationen aus ECoGs, EMGs, Gehirntemperatur und Bewegungsaktivität. Detaillierte Einstufungskriterien sind im Text aufgeführt.
Einleitung
Epilepsie ist eine häufige neurologische Erkrankung, bei der wiederkehrenden Anfällen während eines Patienten Lebensdauer auftreten. Die meisten epileptischen Rezidive können werden gut kontrollierte durch Antiepileptika (AEDs). Doch etwa 30% der Patienten mit Epilepsie entwickeln refraktärer Epilepsie 1. Epilepsie Ursachen Schlafstörungen, die weitere Wiederholung verschlimmern können. Der Nachweis zeigt , dass Epilepsie entweder Schlaf in der Nacht stören können oder übermäßige Tagesschläfrigkeit 2,3 verursachen kann. Unsere bisherigen Untersuchungen zeigen weiter , dass Epilepsie bei Zeitgeber Zeit auftritt (ZT) 0, dh der Beginn der ....
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Protokoll
Alle Versuchsprotokolle werden von der Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) von der National Taiwan University genehmigt.
1. Stereotaktische Chirurgie zum Implantieren ECoG Elektroden, EMG-Elektroden, Gehirn Thermistoren und Injektions Leitkanüle
- Für Ratten (250-350 g, 6 bis 8 Wochen alte Sprague-Dawley Ratten)
- Anästhesieren die Ratten durch IP-Injektion mit 50 mg / kg zoletil. Bestätigen Sie die richtige Tiefe der Narkose durch eine fehlende Reaktion zu beobachten, nachdem die Hinterpfote Kneifen. Bewerben Augensalbe, rasieren Sie das Fell, und sterilisieren Sie die Haut mit Povidon-Jod....
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Ergebnisse
Es gibt verschiedene Ratten- und Mausmodellen die Bedürfnisse der verschiedenen Epilepsietypen gerecht zu werden. Zu induzieren fokale TLE, 0,5 & mgr; l von Pilocarpin (2,4 mg / & mgr; l) in das linke CeA verabreicht. Die vorherrschenden epileptiforme ECoGs sind aus der ECoG - Elektrode auf dem Scheitellappen der linken Hemisphäre (1A: b) erworben und seltene epileptische Aktivitäten werden aus dem Rest der ECoG - Elektroden (1A aufgenommen:
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Diskussion
eine machbare Epilepsie Tiermodell zu wählen, ist für jeden experimentellen Zweck unerlässlich. Eines unserer Ziele ist es, die Auswirkungen von EA auf Epilepsie Unterdrückung aufzuklären. EA ist eine alternative Medizin, die therapeutische Wirkung bei Epilepsie aufweisen kann und hat in der alten chinesischen Literatur dokumentiert. Allerdings gibt es einen Mangel an wissenschaftlichen Beweise, um es zu beweisen. Um die Auswirkungen von EA auf Epilepsie bestimmen, konzentrieren wir uns in erster Linie auf die Auswirkun.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse des Ministeriums für Wissenschaft und Technologie (MOST) unterstützt MOST104-2410-H-002-053 & NSC99-2320-B-002-026-MY3. Dieses Manuskript wurde von Herrn Brian Chang redigiert und Korrektur gelesen, der Erfahrung in der Überarbeitung professioneller Dokumente hat.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Drugs | |||
| Zoletil | Virbac | 50 mg/kg i.p. | |
| Pilocarpin | Sigma-Aldrich | P6503 | 300 mg/kg i.p.; 1,2 mg Mikroinjektion |
| PTZ | Sigma-Aldrich | P6500 | 0,035 mg/Maus |
| Polysporin | Pfizer | ||
| Surgery | |||
| ECoG Elektrode | Kunststoffe Eine | E363/20 | Schraubelektrode für Ratten |
| Sockel | Plastics One | MS363 | |
| Kanüle | Plastics One | C315G/spc | |
| Thermistor | Omega Engineering | 44008 | |
| Dentales Acryl | Tempron | ||
| Stereotaktisches Instrument | Stoelting | Dural Arme | |
| Aufnahmegeräte | |||
| ECoG Verstärker | Colbourn Instruments | V75-01 | |
| A/D Board | National Instruments | NI PCI-6033E | |
| Infrarot-basierte Bewegungsmelder | Biobserve GmbH | Sonderanfertigungen | |
| ICELUS | G-System | ||
| AxoScope 10 Software | Molecular Devices | ||
| Akupunktur Bedürfnisse | |||
| Rostfreie Nadeln | Shanghai Yanglong Medical Articles Co. | 32 Gauge x 1" | |
| Funktionen Elektrischer Stimulator | I.T.O., Japan | Trio 300 | |
| AcuPen | Lhasa OMS | Pointer Excel II |
Referenzen
- Regesta, G., Tanganelli, P. Clinical aspects and biological bases of drug-resistant epilepsies. Epilepsy Res. 34 (2-3), 109-122 (1999).
- Malow, B. A., Bowes, R. J., Lin, X. Predictors of sleepiness in epilepsy patients. Sleep. 20 (12), 1105-1110 (1997).
- Stores, G., Wiggs, L.....
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Nachdrucke und Genehmigungen
