Schnelle Isolierung von BMPR-IB + Fettgewebe gewonnene Stromazellen für die Verwendung in einem Schädeldachdefektheilung Modell

Clement D. Marshall; Elizabeth R. Zielins; Elizabeth A. Brett; Charles P. Blackshear; Michael S. Hu; Tripp Leavitt; Leandra A. Barnes; H. Peter Lorenz; Michael T. Longaker; Derrick C. Wan

doi:10.3791/55120

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Methodenartikel

Schnelle Isolierung von BMPR-IB + Fettgewebe gewonnene Stromazellen für die Verwendung in einem Schädeldachdefektheilung Modell

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DOI:

10.3791/55120

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24. Februar 2017

Clement D. Marshall¹ , Elizabeth R. Zielins¹ , Elizabeth A. Brett¹ , Charles P. Blackshear¹ , Michael S. Hu¹ , Tripp Leavitt¹ , Leandra A. Barnes¹ , H. Peter Lorenz¹ , Michael T. Longaker¹ , Derrick C. Wan¹

¹Hagey Laboratory for Pediatric Regenerative Medicine, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Department of Surgery, Stanford University School of Medicine

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Aus Fett gewonnene Stromazellen können nützlich sein, um neues Gewebe aus den eigenen Zellen eines Patienten zu züchten. Wir präsentieren ein Protokoll für die Isolierung einer Subpopulation von humanen Fettgewebe-abgeleiteten Stromazellen (ASCs) mit erhöhtem osteogenem Potenzial, gefolgt von der Anwendung der Zellen in einem in vivo Kalvarienberg-Heilungsassay.

Zusammenfassung

Invasive Krebserkrankungen, schwere Verletzungen und Infektionen können Knochendefekte verursachen, die zu groß sind, um mit bereits vorhandenem Knochen aus dem eigenen Körper des Patienten rekonstruiert zu werden. Die Fähigkeit, Knochen de novo mit den eigenen Zellen eines Patienten zu züchten, würde es ermöglichen, knöcherne Defekte mit ausreichend Gewebe zu füllen, ohne die Morbidität der Entnahme von nativem Knochen. Es besteht Interesse an der Verwendung von aus Fettgewebe gewonnenen Stromazellen (ASCs) als Quelle für das Tissue Engineering, da diese aus einer reichlich vorhandenen Quelle gewonnen werden: dem eigenen Fettgewebe des Patienten. ASCs sind jedoch eine heterogene Population, und einige Subpopulationen können in dieser Anwendung effektiver sein als andere. Die Isolierung der osteogensten Population von ASCs könnte die Effizienz und Effektivität eines Knochenzüchtungsprozesses verbessern. In diesem Protokoll werden ASCs aus subkutanem Fettgewebe eines menschlichen Spenders gewonnen. Die Subpopulation der ASCs, die den Marker BMPR-IB exprimieren, wird mit Hilfe von FACS isoliert. Diese Zellen werden dann auf einen in vivo Assay zur Heilung von Schädeldefekten angewendet und es wurde festgestellt, dass sie im Vergleich zu unsortierten Zellen ein verbessertes osteogenes Regenerationspotenzial aufweisen.

Einleitung

Wichtige Knochendefekten aus der Verletzung, Infektion oder invasiven Krebs haben einen erheblichen Einfluss auf eines Patienten Erholung und Lebensqualität. Es gibt Techniken , um diese Defekte mit gesunden Knochen von einer anderen Stelle des Patienten eigenen Körper, aber diese Übertragung trägt seine eigene Morbidität und das Risiko von Komplikationen ^{^1,} ^{^2,} ³ zu füllen. Darüber hinaus sind einige Mängel so groß oder komplex, dass genügend Spenderknochen vorliegt, um den Defekt zu füllen. Prosthetic Geräte sind eine mögliche Option für Knochendefekte Füllung , aber diese ....