Beschrieben hier ist die Verwendung von mehreren hausgemachten Werkzeugen zu übertragen, kühlen, und töten erwachsene Drosophila, sowie Glaskultur Fläschchen zu reinigen und Eier zu sammeln. Diese Werkzeuge sind einfach zu machen und sind ziemlich effizient im Umgang mit Drosophila.
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Methodenartikel
Einfache hausgemachte Werkzeuge, um Fruchtfliegen zu behandeln —Drosophila melanogaster
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die Fruchtfliege, Drosophila melanogaster, ist sowohl in der biologischen Forschung als auch in der Biologieausbildung weit verbreitet. Der Umgang mit erwachsenen Fliegen ist häufig, aber schwierig in der Praxis, da erwachsene Fliegen fliegen. Hier wird gezeigt, wie Sie einige einfache und kostengünstige Werkzeuge herstellen, um schwierige Probleme im Umgang mit Drosophilaanzugehen. Löcher in Schaumstopfen werden gemacht und Pipettenspitzen oder Trichter werden in die Löcher eingesetzt. Fliegen bewegen sich dann nur in eine Richtung in die Pipette-Spitze/Trichter-Assemblage, was eine effiziente Kontrolle der Übertragung von erwachsenen Drosophila in oder aus einer Durchstechflasche ermöglicht. Bestehende Protokolle wurden für die Kühlung von Fliegen modifiziert, indem sie in zerkleinertem Eis gekühlt und auf eine kalte, harte Eispackung übertragen werden. Die Eispackung ist mit einem Stück medizinischer Gaze bedeckt, das immobilisierte Fliegen aus dem kondensierten Wasser hält, wenn sie unter einem Stereomikroskop untersucht werden. Die Fliegen werden schließlich zum Zählen und Sortieren eingeschläfert oder durch Mikrowaden entsorgt. Ein flaschenförmiger Käfig wurde auch zum Sammeln von Eiern entwickelt, sowie ein arbeitssparendes Gerät und ein Begleitprotokoll zur Reinigung von Glaskulturfläschchen.
Einleitung
Die Fruchtfliege, Drosophila melanogaster, ist ein Modellorganismus weit verbreitet in der biologischen Forschung und Biologie-Bildung verwendet, um eine breite Palette von Themen1,2zu studieren. Die grundlegenden Probleme des Umgangs mit Drosophila sind die Übertragung von Erwachsenen von der Durchstechflasche in die Durchstechflasche und die Immobilisierung der Fliegen, so dass sie leichter zu handhaben sind, da alle Erwachsenen (mit Ausnahme einiger Mutanten3,4) fliegen können.
Konventionell überträgt ei....
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Protokoll
1. Vorbereiten von Werkzeugen und Zubehör
- Tip/Trichter-Stopper
- Erhalten Sie zwei Schwammstecker (der Durchmesser der Stecker muss etwas größer sein als der Innendurchmesser der Fläschchen, die zum Übertragen von Fliegen verwendet werden). Machen Sie ein Loch in den Zentren der Schwammstopfen mit einem beheizten elektrischen Lötkolben.
- Besorgen Sie sich zwei 1 ml Pipettenspitzen, schneiden Sie eine mit einem scharfen Messer quer zur Hälfte und entsorgen Sie das spitze Ende. Dann 1,5 cm des spitzen Endes von der zweiten Pipettenspitze schneiden. Kleben Sie die Reste der beiden Pipettenspitzen zusammen mit einem Allzweckkle....
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Ergebnisse
Die T- und F-Stopper wurden als eine Reihe einfacher Werkzeuge entwickelt, die angepasst und in jeder Fliegenübertragung eingesetzt werden können. Das Übertragen von Fliegen aus einer alten Kultur in mehrere frische Kulturen beinhaltet das Entfernen der Stecker der frischen Fläschchen, deren Austausch durch F-Stopper, das Abklopfen der Fliegen in der alten Durchstechflasche, das schnelle Entfernen des Steckers und das Ersetzen durch einen T-Stopper. Wenn das alte Essen kompakt ist, dann i.......
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Diskussion
Einige hausgemachte Werkzeuge für den Umgang mit grundlegenden Aktivitäten in Drosophila Aufzucht und Experimente beteiligt sind in diesem Papier beschrieben. Diese Werkzeuge sind einfach, aber ziemlich effektiv. Praktisch kann jedes Labor diese Werkzeuge mit Leichtigkeit herstellen, und ein Forschungs- oder Lehrlabor muss keine vorgefertigte Alternative finden, die vielleicht nicht lokal verfügbar ist.
Fliegentransfer ist die häufigste Praxis und eine schwierige Aufgabe in Drosop.......
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Offenlegungen
Der Autor hat nichts zu verraten.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Eine Zange | |||
| Akku-Bohrschrauber | Maximale Drehzahl: 500 U/min | ||
| Elektrischer Lötkolben | |||
| Feilentrichterdurchmesser | |||
| der Scheibe< 60mm | |||
| Eisbox | |||
| Insektenstifte | |||
| Infrarot-Thermometer | HCIYET HT-830 | ||
| mit langer Manschette | |||
| Druckbleistifte Medizinische | |||
| Gaze | |||
| Mikrozentrifugenröhrchen | 100 ul | ||
| Mikrowellenherd | |||
| Parafilm | |||
| Perischale | Innendurchmesser 60 mm | ||
| Pipettenspitzen | 1 ml | ||
| Kunststofffolie | |||
| Perischale | & Phi; 36 mm zum Abdecken des leeren Fläschchens | ||
| Punktpinzette | |||
| Arbeitsschutzhandschuhe | |||
| Wiedereinfrierbare Harteisakkus | 26,5 Mal; 14,5 x 2,5 cm oder größer | ||
| Gummi-Luftgebläse | |||
| Schnappschneider | |||
| Softdrinkflasche | 500 ml, Innendurchmesser ca. 65 mm | ||
| Schwammstopfen | |||
| Edelstahlschwämme | |||
| Röhrenbürste | |||
| Vial | & Phi; 34 mm & mal; 90 mm |
Referenzen
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
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Nachdrucke und Genehmigungen
