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Monitoring Kinase and Phosphatase Activities Through the Cell Cycle by Ratiometric FRET

Atividades de monitoramento quinases e fosfatases através do ciclo celular por raciométrica FRET

DOI:
10.3791/3410-v

•

13:38 min

•

January 27, 2012

•

, , ,
1Department of Cell and Molecular Biology,Karolinska Institutet

Kapitel

  • 00:05Titel
  • 02:19Introducing the Probe to Cells
  • 03:27Monitoring Ratiometric FRET
  • 06:12Verifying and Optimizing Conditions
  • 06:43Analyzing FRET
  • 11:24Representative Imaging Results
  • 12:52Conclusion

Summary

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FRET baseado jornalistas estão cada vez mais utilizados para monitorar atividades quinase e fosfatase em células vivas. Aqui nós descrevemos um método de como usar FRET baseado jornalistas para avaliar o ciclo de dependentes de células alterações na fosforilação alvo.

Tags

KinasePhosphataseCell CycleRatiometric FRETFörster Resonance Energy TransferFRET-based ReportersCFPYFPPhosphorylationConformation ChangeDistanceOrientationFRET EfficiencyProbesPKAPKBPKCPKDERKJNKCdk1Aurora BPlk1Stress Signaling PathwaysProgression Through The Cell CycleUnperturbed GrowthRecovering From StressTime-lapse ImagingSignal To Noise Ratio

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