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Assessing Cellular Target Engagement by SHP2 (PTPN11) Phosphatase Inhibitors
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Évaluation de l’engagement des cibles cellulaires par inhibiteurs de la phosphatase SHP2 (PTPN11)

DOI:
10.3791/61457-v

•

08:45 min

•

July 17, 2020

•

, , , , ,
1Cancer Metabolism & Signaling Networks Program, NCI-Designated Cancer Center,Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute

Kapitel

  • 00:04Introduction
  • 01:04Transfection of HEK293T Cells
  • 02:36Incubation of Cells with SHP2 Inhibitors
  • 05:11Isothermal or Thermal Profile Gradient Heat Pulse
  • 06:01Results: Cellular Target Engagement of Allosteric SHP2 Inhibitors with SHP2-WT and SHP2-E76K Proteins
  • 08:03Conclusion

Summary

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La capacité d’évaluer l’engagement cible par les inhibiteurs candidats dans les cellules intactes est cruciale pour la découverte de médicaments. Ce protocole décrit un test de décalage thermique cellulaire de format 384 qui détecte de façon fiable l’engagement cellulaire des inhibiteurs ciblant soit le SHP2 de type sauvage, soit ses variantes oncogènes.

Tags

Keywords: SHP2PhosphataseCell SignalingCancer TherapySmall Molecule InhibitorsTarget EngagementCell-based AssayHEK293 T-cellsTransfection384-well PlatesLiquid Handling

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