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Assessing Cellular Target Engagement by SHP2 (PTPN11) Phosphatase Inhibitors
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Evaluación del compromiso de objetivos celulares por inhibidores de la fosfatasa SHP2 (PTPN11)

DOI:
10.3791/61457-v

•

08:45 min

•

July 17, 2020

•

, , , , ,
1Cancer Metabolism & Signaling Networks Program, NCI-Designated Cancer Center,Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute

Kapitel

  • 00:04Introduction
  • 01:04Transfection of HEK293T Cells
  • 02:36Incubation of Cells with SHP2 Inhibitors
  • 05:11Isothermal or Thermal Profile Gradient Heat Pulse
  • 06:01Results: Cellular Target Engagement of Allosteric SHP2 Inhibitors with SHP2-WT and SHP2-E76K Proteins
  • 08:03Conclusion

Summary

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La capacidad de evaluar la participación objetivo de los inhibidores candidatos en las células intactas es crucial para el descubrimiento de fármacos. Este protocolo describe un ensayo de cambio térmico celular de formato de 384 pozos que detecta de forma fiable el compromiso de destino celular de inhibidores dirigidos a SHP2 de tipo salvaje o sus variantes oncogénicas.

Tags

Keywords: SHP2PhosphataseCell SignalingCancer TherapySmall Molecule InhibitorsTarget EngagementCell-based AssayHEK293 T-cellsTransfection384-well PlatesLiquid Handling

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