Alineación de figramas de tomografía de coherencia óptica en luz visible con imágenes confocales de la misma retina de ratón
June 30th, 2023
El presente protocolo describe los pasos para alinear las imágenes de fibragrafía de tomografía de coherencia óptica en luz visible (vis-OCTF) in vivo con imágenes confocales ex vivo de la misma retina de ratón con el fin de verificar la morfología del haz de axones de las células ganglionares de la retina observada en las imágenes in vivo .
Presentamos un protocolo para alinear imágenes VIS-OCT in vivo con fibras nerviosas de la retina inmunoteñidas ex vivo para validar nuestra novedosa tecnología de imágenes. VIS-OCT permite la visualización de las fibras nerviosas de la retina in vivo, y este proceso confirma la precisión de nuestros hallazgos. Nuestro protocolo combina imágenes in vivo y ex vivo para proporcionar una visualización en tiempo real de la estructura de la retina y confirmar los hallazgos.
El proceso es aplicable a modelos de ratón de enfermedades oculares, siempre que la parte anterior del ojo permita la obtención de imágenes ópticas. Esto incluye modelos de retinopatía diabética e isquemia retiniana. Estos estudios sientan las bases para establecer una evaluación objetiva del daño neurológico en humanos, que puede mejorar significativamente el diagnóstico y tratamiento del glaucoma en el futuro.
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Visión general
Este protocolo describe cómo alinear las imágenes de fibergrafía de tomografía de coherencia óptica de luz visible in vivo (vis-OCTF) con imágenes confocales ex vivo de retinas de ratón. Su objetivo es verificar la morfología del haz de axones de las células ganglionares retinales observada en las imágenes in vivo, utilizando una combinación de técnicas de imagen óptica aplicables a diversas enfermedades oculares.
Componentes clave del estudio
Área de la ciencia
- Neurociencia
- Imagen óptica
- Investigación retinal
Antecedentes
- Las técnicas de imagen in vivo son esenciales para evaluar la estructura de la retina en tiempo real.
- Este estudio aprovecha la vis-OCTF y la microscopía confocal para la validación anatómica.
- La metodología permite la evaluación de las fibras nerviosas retinianas y sus cambios morfológicos.
- Importante para comprender enfermedades como la retinopatía diabética y el glaucoma.
Propósito del estudio
- Establecer un método de alineación confiable entre técnicas de imagen in vivo y ex vivo.
- Confirmar la precisión anatómica de los haces de axones de las células ganglionares retinales in vivo.
- Proporcionar una visualización integral de las estructuras retinales que ayuda en la evaluación de enfermedades.
Métodos utilizados
- Utiliza técnicas de tomografía de coherencia óptica de luz visible (vis-OCT) e imagen confocal.
- Emplea un modelo de ratón para evaluar las estructuras de las fibras nerviosas retinianas, centrándose en la capa de células ganglionares retinianas.
- El protocolo implica anestesiar a los ratones, posicionarlos y activar los dispositivos de imagen.
- Los pasos incluyen recortar y alinear imágenes utilizando características de referencia como vasos sanguíneos y cabeza del nervio óptico.
- Se utiliza inmunotinción confocal para visualizar los axones de las células ganglionares retinianas para compararlos con el fibergram vis-OCT.
Principales resultados
- El protocolo valida con éxito la morfología de los haces de axones de las células ganglionares retinianas identificadas en las imágenes vis-OCT.
- Las imágenes confocales y vis-OCT revelan redes idénticas de la vasculatura y los axones retinianos.
- Esta alineación mejora la fiabilidad de la imagen in vivo para evaluar patologías retinianas.
Conclusiones
- El estudio demuestra un método robusto para correlacionar imágenes retinianas in vivo y ex vivo.
- Aumenta el potencial para aplicar esta técnica en la comprensión y el diagnóstico de enfermedades retinianas.
- Establece vías para un diagnóstico y tratamiento mejorado del glaucoma basado en una evaluación objetiva.
