Протоколы для эмбрионального системы головного мозга крыс культуры агрегат описано. Мультипотентные прародителей в агрегаты могут развиваться и дифференцироваться в нейроны, астроциты и олигодендроциты.
Abstract
В пробирке системы, которая повторяет развитие и дифференциацию предшественников в зрелые нейроны и глия в центральной нервной системе (ЦНС) обеспечит мощную платформу для нейробиологов для расследования аксо-глиальных взаимодействий, свойства и дифференцировки мультипотентных предшественников, и прогрессирование олигодендроглиальных линии клеток при клеточном и молекулярном уровне. Мы описываем здесь культура ЦНС агрегатной системы из эмбриональных forebrains крыса, который может быть реализован в свободной от сыворотки среде до 3-4 недель, и используется в нашей лаборатории в качестве модели для изучения нейронных-глии взаимодействия и ЦНС миелинизации. Этот видеоклип будет показано, как изолировать и выращивать эти культуры ЦНС совокупности с E16 мозга крыс. Кроме того, из того же вскрытия головного мозга, обогащенного регулярные диссоциированных нейронов культуры могут быть легко получены и используются для различных исследований на ЦНС нейроны или использовать для со-культуры с другими клетками.
Protocol
Подготовка к диссекции Хирургические инструменты: стерилизовать все рассечение ножницами и щипцами в автоклаве Покровное очистки: Замочить всех покровных (15 мм в диаметре для 24-луночного планшета) в 1 л стакан травы на 33% HCl, по крайней мере…
Discussion
В ранних исследованиях сообщалось образование синапсов и зрелые миелина в ротации опосредованного свободное плавание культур совокупности 1. Культуры ЦНС совокупности системы, описанной здесь сочетаются бессывороточной роста мультипотентных клеток-предшественников в трехме?…
Acknowledgements
Это исследование было частично финансируется стартовый капитал из Техаса & M University
Koito, H., Li, J. Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies. J. Vis. Exp. (31), e1304, doi:10.3791/1304 (2009).