آغار بلوك عوالم مصغرة لتحليل الأنسجة النباتية الخاضعة للرقابة من قبل الفطريات الهوائية
Summary
هذا الفيديو يوضح نهجا بيئة تسيطر عليها لدراسة تحلل الأنسجة النباتية lignocellulosic بواسطة الفطريات الهوائية. القدرة على السيطرة على مصادر المواد الغذائية والرطوبة هي الميزة الرئيسية للأجار كتلة عوالم مصغرة ، ولكن كثيرا ما تؤدي نهج متفاوتة من النجاح. نعالج المزالق الحرجة لمحصول استنساخه ، وانخفاض تقلب النتائج.
Abstract
تم تطوير طرق الاساسيان لدراسة التحلل الحيوي للأنسجة النباتات الفطرية lignocellulosic لاختبار المواد الحافظة الخشب (كتلة التربة ؛ أجار كتلة). هل هو جيد أن تقبل التربة ومنع ارتفاع معدلات العائد عوالم مصغرة الاضمحلال ، وقضايا أقل رطوبة ، وخفض التباين بين الدراسات ، وارتفاع عتبات سمية المواد الحافظة. اختبار التربة لبنة وهكذا استخدمت تقنية أكثر وكانت موحدة من قبل الجمعية الأمريكية للاختبارات والمواد (ASTM) (D الأسلوب 1413-1407). تصميم كتلة التربة والسلبيات ، ولكن ، وذلك باستخدام مصادر التربة محليا ومتغير. في الحد من السيطرة على العناصر الغذائية الخارجية (خارجية) إلى الأنسجة المتحللة وقد ظهرت هذه العيوب بوصفها مشكلة في تطبيق هذا الأسلوب لأخرى ، وتهدف الأبحاث شعبية متزايدة. وتشمل هذه الأهداف الحديثة lignocellulosics المهينة للبحوث الطاقة الحيوية ، واختبار المعالجة البيولوجية للمشاركين في استقلاب المواد السامة ، وتقييم آليات الأكسدة ، وتتبع العناصر translocated على طول شبكات خوطي. كتل التربة لا تقرض تحكم بما فيه الكفاية في هذه التطبيقات. A المكرر أجار كتلة النهج هو ضروري.
هنا ، فإننا نستخدم بالعفن البني من الخشب والمهينة الفطر Serpula lacrymans للحط من الخشب في أجار كتلة عوالم مصغرة ، وذلك باستخدام أطباق بتري العميق مع منخفضة الكالسيوم آغار. نحن اختبار دور الجبس الخارجية على الاضمحلال في سلسلة من الوقت ، لإثبات فائدة والتباين المتوقع. كتل هي مشروطة من مجلس واحد مزق (قطع طولية) ، وزنه ، تعقيمها ، وقدم جو معقم و مطهر فوق شبكة من البلاستيك. التطعيمات هي فطرية في كل مواجهة الكتلة ، مع إضافة الجبس الخارجية في الواجهات. الحصاد وحتى الحصاد العقيم المدمرة النهائي. وقد صممت هذه عوالم مصغرة لتجنب الاتصال مع كتلة أجار أو جدران صحن بتري. يتم التقليل من خلال التكثيف وخلال لوحة يصب الحضانة. أخيرا ، يتم تصغير قيحة / الجبس / الخشب تباعد ولكن من دون السماح للإتصال به. هذه الجوانب التقنية أقل من أجار كتلة التصميم هي أيضا الأسباب الأكثر شيوعا من الفشل ومصدرا رئيسيا للتقلب بين الدراسات. نشر الفيديو وبالتالي من المفيد في هذه الحالة ، وعلينا أن نظهر التباين المنخفضة والعالية الجودة النتائج.
Protocol
Discussion
باستخدام لدينا أجار انشاء كتلة (الشكل 1) نمت Serpula lacrymans في اتصال مباشر مع الجبس والسطوح إلى كتل الخشب (الشكل 2) ، مما أدى إلى أكثر من 60 ٪ خسارة الوزن في البني فسدت تحكم كتل الصنوبر (الشكل 3 ). هذا يرضي بسهولة هدف القياسية ASTM تسوس> 50 ٪ ، ومتوسط معامل الاختلاف (C V)</sub…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dishes | Nunc | 4014 | 25 x 150 mm | |
| Agar, Type A | Sigma | A4550 | ||
| Ammonium nitrate, NH4NO3 | Millinckrodt | 3436-12 | ||
| Potassium phosphate, KH2PO4 | J.T. Baker | 3246-01 | ||
| Magnesium sulfate 7-hydrate, MgSO4•7H2O | Sigma | 230391 | ||
| D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Dextrose | |
| Boric acid, H3BO4 | Mallinckrodt | 2549-04 | ||
| Zinc sulfate 7-hydrate, ZnSO4•7H2O | Mallinckrodt | 8880-12 | ||
| Manganous chloride 4-hydrate, MnCl2•4H2O | J.T. Baker | 2540-04 | ||
| Copper(II) sulfate 5-hydrate, CuSO4•5H2O | Sigma | 209198 | ||
| Ammonium heptamolybdate 4-hydrate, (NH4)6Mo7O24•4H2O | Sigma-Aldrich | 431346 | ||
| Calcium chloride dihydrate, CaCl2•2H2O | Mallinckrodt | 4160-12 | ||
| Sodium chloride, NaCl | Mallinckrodt | 7581-12 | ||
| Ferrous sulfate 7-hydrate, FeSO4•7H2O | Mallinckrodt | 5056-12 | ||
| Pipet-aid | Drummond | 4-000-110 | Cordless EtOH the surface |
|
| 10 ml sterile polystyrene pipette | BD Biosciences | 357551 | ||
| Gutter Guard | Thermwell Products Co. | VX620 | Pre-scrubbed with soap Hardware store |
|
| Calcium sulfate hemihydrate, CaSO4•0.5H2O | Acros Organics | 385355000 | ||
| #4 cork borer | Boekel | 1601 | ||
| Parafilm “M” | Pechiney | PM-996 |
Referencias
- ASTM D1413-07. Standard test method for testing wood preservatives by laboratory soil-block cultures. . Annual Book of ASTM Standards. , 185-192 (2007).
- Bravery, A. F. . A miniaturized wood block for the rapid evaluation of wood preservative fungicides. , (1978).
- Low, G. A., Young, M. E., Martin, P., Palfreyman, J. W. Assessing the relationship between the dry rot fungus Serpula lacrymans and selected forms of masonry. Int. Biodeterior. Biodegrad. 46, 141-150 (2000).
- Nicolas, D. Volume I (One/1) – Degradation and Protection of Wood (Syracuse Wood Science Series #5). Wood Deterioration and Its Prevention by Preservative Treatments. , (1973).
- Schilling, J. S. Effects of calcium-based materials and iron impurities on wood degradation by the brown rot fungus Serpula lacrymans. Holzforschung. 64, 93-99 (2010).
