Method Article

En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de rata E16

DOI:

10.3791/236

July 19th, 2007

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Abstract

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En el útero in-vivo de la inyección y la electroporación de la corteza cerebral de ratas embrionarias proporciona una poderosa herramienta para la manipulación de los progenitores individuales que cubren las paredes del ventrículo lateral. Esta técnica es ampliamente utilizada para estudiar los procesos involucrados en corticogenesis por la sobre-expresión o derribar los genes y observar los efectos sobre la proliferación celular, la migración y la diferenciación. En comparación con las estrategias tradicionales de octavos de final, en el útero de la electroporación proporciona un medio rápido para manipular a una población de células durante una ventana temporal específica. En este protocolo de vídeo, se describe la metodología experimental para la preparación de las ratas de la cirugía, la exposición de los cuernos uterinos a través de laporatomy, la inyección de ADN en los ventrículos laterales del embrión en desarrollo, electroporating ADN en los progenitores que recubre la pared lateral, y el cuidado de los animales post- la cirugía. Nuestro laboratorio utiliza este protocolo para las cirugías de E15-E21 ratas, sin embargo, se realiza con mayor frecuencia en E16, como se muestra en este video.

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In Utero InjectionIntraventricular ElectroporationE16 Rat EmbryosDNA MicroinjectionElectroporation SystemPipette BevelingUterine Horn ExposureEmbryo Ventricle TargetingPostoperative Animal CareGenetic Manipulation Technique

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