Summary

Cellule patterning su elettrodi Tin otticamente trasparente di ossido di indio

Published: August 20, 2007
doi:

Summary

Non-fouling monostrato PEG silano era desorbita dal indirizzabili individualmente elettrodi di ITO su vetro mediante l'applicazione di un potenziale riduttivo. Elettrochimica stripping di PEG-silano livello da microelettrodi ITO permesso di adesione delle cellule che si terrà in maniera spazialmente definito, con modelli cellulari corrispondenti strettamente ai modelli di elettrodi.

Abstract

La capacità di esercitare un controllo preciso spaziale e temporale su superficie cellulare interazioni è un prerequisito importante per l'assemblaggio dei pluricellulari costrutti che servono come in imita in vitro dei tessuti nativi. In questo studio, fotolitografia e tecniche di incisione bagnato sono state usate per fabbricare indirizzabili individualmente ossido di indio e stagno (ITO) elettrodi su substrati di vetro. I substrati di vetro contenenti microelettrodi ITO sono stati modificati con poli (glicole etilenico) (PEG) silano per renderli proteine ​​e delle cellule resistivo. Presenza di molecole di PEG isolante sulla superficie dell'elettrodo è stata verificata mediante voltammetria ciclica impiego di ferricianuro di potassio come una molecola giornalista redox. È importante sottolineare che l'applicazione di eventuali riduttivo causato desorbimento dello strato di PEG, con conseguente rigenerazione della superficie degli elettrodi conduttivi e l'aspetto delle tipiche cime ferricianuro redox. Applicazione di eventuali riduttivo anche corrispondeva a commutazione di proprietà elettrodo ITO da cellula non adesivo alla cella-adesivo. Elettrochimica stripping di PEG-silano livello da microelettrodi ITO permesso di adesione delle cellule che si terrà in maniera spazialmente definito, con modelli cellulari corrispondenti strettamente ai modelli di elettrodi. Micropatterning di diversi tipi di cellule è stato dimostrato su questi substrati. In futuro, il controllo delle proprietà biointerfacial offerta da questo metodo permetterà di ingegnere microambienti cellulari attraverso l'assemblaggio di tre o più tipi di cellule in una precisa configurazione geometrica su un substrato otticamente trasparente.

Protocol

Parte I: Campitura degli elettrodi Pulire e disidratati lastre di vetro ricoperto di ITO sono stati rivestiti con photoresist positivo La superficie veniva cotto a 100 ° C per rimuovere solventi da resistere Dopo la cottura, la superficie è stata esposta alla luce ultravioletta attraverso una fotomaschera utilizzando il Canon Mask Aligner Le regioni esposte sono state rimosse in una soluzione di sviluppo La superficie era difficile da forno di togliere qualunque soluz…

Discussion

In questo video, abbiamo dimostrato il modello cella su elettrodi di stagno otticamente trasparente ossido di indio. Dopo la fabbricazione degli elettrodi di ITO mediante fotolitografia, sono stati modificati con una cellula-resistivo monostrato di silano PEG. Questo monostrato è stato desorbiti utilizzando elettrochimica passaggio in superficie da cellula a cellula-resistivo-adesivo. Patterning di fibroblasti murini 3T3 ha dimostrato nel suo video. Abbiamo anche patterning epatociti, cellule primarie e cellule stellate con la stessa tecni…

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Indium Tin Oxide Otro Delta Technologies CB 40IN  
PEG silane Reagent Gelest Inc. SIM6492.66  
Hydrochloric Acid Reagent Sigma-Aldrich 320331  
Nitric Acid Reagent Sigma Aldrich 258121  
Ethanol Reagent Sigma-Aldrich 459836  
Acetone Reagent Sigma-Aldrich 650501  
Toluene Reagent Sigma-Aldrich 34866  
Media Reagent Invitrogen Technologies    
Collagen Reagent Sigma-Aldrich C3867  
3T3 murine Fibroblasts Cell Line ATCC    

Referencias

  1. Lee, J. Y., Jones, C., Zern, M. A., Revzin, A. Analysis of Local Tissue-Specific Gene Expression in Cellular Micropatterns. Analytical Chemistry. 78, 8305-8312 (2006).
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Citar este artículo
Shah, S., Revzin, A. Patterning Cells on Optically Transparent Indium Tin Oxide Electrodes. J. Vis. Exp. (7), e259, doi:10.3791/259 (2007).

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