Summary

Bir İskemik Yara Model üretmek için Basitleştirilmiş Tekniği

Published: May 02, 2012
doi:

Summary

Biz santral arter ve sinir ve beyin nörovasküler demet bölerek bir tavşan kulağı iskemik yara modeli oluşturmak için minimal invaziv bir teknik geliştirdik. Bir subkutan tünel sonra tüm cilt altı dokuları keser. Bu prosedür, minimal deri bozulmasına neden olmakta ve güvenli bir şekilde, diyabetik hayvanlarda kullanılabilir.

Abstract

Mevcut diyabetik yara araştırma Bir diğer önemli engel güvenle diyabetik hayvanlarda kullanılan bir iskemik yara modeli bir eksikliğidir. Vaskülopati bu yaraların iyileşmesini engelleyen en önemli etmenlerden biridir, çünkü non-iskemik yara iyi çalışan ilaçlar insan diyabetik yaralar çalışmayabilir. Biz minimal invaziv cerrahi tekniği ile oluşturulan bir tavşan kulak iskemik yara modeli açıklayan 2007 yılında bir makale yayınladı. O zamandan beri, daha kolay kullanım için basitleştirilmiş prosedür var. Bir kulakta günü, üç küçük cilt kesileri vasküler pediküller, kulak tabanından 1-2 cm yapıldı. Merkezi arter bağlandı ve sinir ile birlikte kesildi. Bütün kranial paket sadece kaudal şube zedelemeden, kesilmiş ve bağlandı. Bir çevresel subkutan tünel deri altı dokuları, kaslar, sinirler ve küçük damarları kesmek için, insizyon ile yapıldı. Diğer kulak, bir non-iskemik kontrol olarak kullanılmıştır. Dört yaralar ventral tarafta o yapılmıştırf her kulak. Bu teknik eşleştirilmiş karşılaştırma için 4 iskemik yara ve bir hayvan 4 iskemik olmayan yaralar üretir. Ameliyattan sonra, iskemik kulak serin ve siyanotik, ve azalmış hareket ve kulak arterde nabız eksikliği gösterdi. Iskemik kulak cilt sıcaklığında 1-10 ° C idi normal bir kulak daha düşüktür ve bu fark daha fazla bir ay boyunca sürdürüldü. Kulak doku yüksek enerjili fosfat içeriği kontrol kulağa göre iskemik kulak düşüktü. Yara iyileşme zamanları aynı tedavi kullanılan non-iskemik kulak göre iskemik kulağa daha uzundu. Tekniğin şimdi 23 (diyabet süresi 2 hafta ile 2 yıl arasında değişen) diyabetik edildiği 80'den fazla tavşanlar üzerinde kullanılmıştır. Tek başına hiç bir tavşan gibi kanama, enfeksiyon veya cilt kesilerde rüptür gibi herhangi bir cerrahi komplikasyon geliştirdi. Modeli, küçük bir deri bozulması, uzun iskemik süre ve birçok diğer modellere göre daha yüksek başarı oranı gibi pek çok avantajı vardır. Can güvenle düşük direnci ile hayvanlarda kullanılan ve aynı zamanda farklı test gereksinimlerini karşılamak için değiştirilebilir.

Protocol

1. Anatomik Dayanak Tavşan kulak 20. yüzyıldan beri yara bakımı için tercih edilen bir çalışma malzemesi olmuştur. Kulağın üç damar demetleri (merkezi, kranial ve kaudal) tarafından sağlanır; kranial ve kaudal demetler halinde gemilerin büyüklüğü değişiklik gösterir merkezi paket, en büyüğüdür. Bazen, kaudal arter eksik olabilir. Bu gemilerin 1 Tüm kulak (Şekil 1) traş sonra kolayca sırt tarafında tanımlanır. Ventral t…

Discussion

Diyabet ABD, 2,3 23,6 milyon kişiyi etkilediği ve bu hastaların% 15-20 daha fazla $ 25 milyar bir yıllık tedavi maliyeti de 4,5 yaşamları boyunca ayak ülserleri gelişir. 3,6 Ancak, hatta mevcut en iyi tedaviler sadece% 50'lik bir iyileşme oranı elde etmek ve bu, sık sık diyabetiklerde% 66 gibi yüksek nüks oranları ile 7 geçici. 3,6 ülserleri diyabetik hastalarda, enfeksiyon ve dramatik amputasyon artış gibi önemli komplikasyonlar ortaya çı…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma NIH hibe 1RO1DK74566 ve 1RO1AM52984 kısmen desteklenmiştir. Yazarlar, Dr, ameliyat sırasında ona yardım için RRC Ms Jacqueline McCarty teşekkür etmek istiyorum. Bazı tavşan, onun histolojisi çalışmaları için Dr Rong Wan ve yüksek enerjili fosfatların onun HPLC ölçümleri için Bayan Ming Li cerrahi ve postoperatif bakım yardım ettikleri için Jianpu Wang ve Harshini Sarojini.

Materials

For monitoring during surgery

  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery

  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

Referencias

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  3. Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. The global burden of diabetic foot disease. Lancet. 366, 1719-1724 (2005).
  4. Edwards, J., Stapley, S. Debridement of diabetic foot ulcers. Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).
  5. Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds. Eplasty. 9, 169-179 (2009).
  6. Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis. Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).
  7. Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion. Lancet. 1, 1153-1156 (1980).
  8. Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue. Wound Repair. 8, 83-96 (2000).
  9. Lindblad, W. J. Animal models in wound healing research: do we need more. Wound Repair. 8, 81-82 (2000).
  10. LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus. Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).
  11. Gottrup, F. Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status. Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).
  12. Niinikoski, J. The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair. , 56-71 (2002).
  13. Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. Models to study ischemia in chronic wounds. Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).
  14. Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. The role of oxygen in wound repair. , 165-174 (1991).
  15. Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. Science, medicine and the future: healing chronic wounds. BMJ. 324, 160-163 (2002).
  16. Lindblad, W. J. Editorial: How should one study wound healing. Wound Repair. 14, 515-515 (2007).
  17. Chien, S. Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery. Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).
  18. Joseph, J., Townsend, F. J. The healing of defects in immobile skin in rabbits. Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).
  19. James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. Biofilms in chronic wounds. Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).
  20. Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe. J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).
  21. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).

Play Video

Citar este artículo
Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

View Video