Bronchiolitis סותם היא הפגיעה המפתח להישרדות ארוכת טווח של השתלת ריאה וחוסר מודל קליני חזק מונע בחינת immunopathogenesis bronchiolitis סותם. שלא כמו אחרים השתלות איברים מוצקים, vascularized העכבר השתלת ריאות יש רק לאחרונה פותחו. כאן אנו מציגים מודל שפותח באופן עצמאי שלנו bronchiolitis סותם לאחר ההשתלה Murine אחת הריאות orthotopic.
השתלת ריאות Orthotopic בחולדות דווח לראשונה על ידי Asimacopoulos ועמיתים ב 1971 1. כיום, שיטה זו מקובלת גם ואחיד לא רק לחקר דחייה-Allo, אלא גם בין זנים syngeneic לבחינת מנגנוני פציעה איסכמיה reperfusion לאחר השתלת ריאה. אם כי יישומם של עכברוש ובעלי חיים אחרים מודל גדול 2 תרומה משמעותית להבהרת של מחקרים אלה, היקף החקירות האלה היא מוגבלת על ידי מיעוט של נוק אאוט ו חולדות מהונדס. בשל אין טיפולים יעילים bronchiolitis סותם, הגורם המוביל למוות בקרב חולים השתלת ריאות, חלה בחיפוש אינטנסיבי אחר קדם קליניים מודלים הדומים bronchiolitis סותם. המודל allograft קנה הנשימה הוא הנפוץ ביותר ויכול לשחזר כמה מן התכונות של היסטופתולוגיות bronchiolitis סותם 3. עם זאת, חוסר vasculat ללא פגעיור ללא קשר דרכי הנשימה ביצוע של הנמען, ותכונות פתולוגיים שלם של bronchiolitis סותם להגביל את השירות של מודל זה 4. שלא כמו השתלת איברים מוצקים אחרים, vascularized השתלות ריאה העכבר רק לאחרונה דווח על ידי Okazaki ועמיתיו לראשונה בשנת 2007 5. יישום עקרונות היסוד של השתלת ריאות חולדה, במעבדה שלנו יזמה את המודל bronchiolitis סותם באמצעות קטין histoincompatible Murine אנטיגן orthotopic אחת לשמאל השתלות ריאה המאפשר מחקר נוסף של immunopathogenesis bronchiolitis סותם 6.
השתלת ריאות Orthotopic בעכברים הוא מאתגר בשל דרישות microsurgical ואת שבריריותם קיצוני של רקמות. מבוא של הטכניקה השרוול אפשרה לשימוש נרחב של השתלת ריאות orthotopic בחולדות 8. זה הפך את הבסיס לפיתוח מודל השתלת orthotopic ריאות בעכברים במעבדה שלנו. בעכברים וחולדות, שלא כמו בני האדם, הריאה השמאלי מכיל רק 1 האונה ו מהווה רק 25% ממסת הריאות הכולל. זה עושה שמאל אחת השתלת ריאות אפשרי במודל murine ללא צורך במערכת תמיכה הדם.
ניתוחים ראשונית שלנו עולה כי אוורור זלוף של הריאה המושתלת היתה תלויה מאוד בגודל של PV השקה. גודל מסוים PV anastomotic השרוול נוצלו כדי להתאים התורם מקבלי כפי שדווח 9. השרוול לשינוי גודל בלתי הולם הביא atelectasis אחת הריאות בקיעה המושתל או anast PVomosis. Okazaki et al דיווחו על שימוש קשירת כלי משולב גזר 5 הסמפונות. במחקר הנוכחי אנו משתמשים קליפ מפרצת עבור כל המבנים hilar, אשר אנו מציעים עלולה לקצר את זמן איסכמי חמים. מגבלה אחת של השתלת ריאות orthotopic שמאל במודל murine היא שבעלי חיים הנמען יכול לשרוד אחרי נמק alloimmune בתיווך של allografts שלהם 5. לכן, מחקרים הישרדות לא ריאלי והערכה השתל תלויה בבדיקה היסטולוגית של הריאה המושתלת 10.
באמצעות טכניקה זו, פיתחנו מודל קליני bronchiolitis סותם בעכברים. באופן ספציפי, העכבר הוא C57BL/10 התורם והמקבל הוא C57BL / 6. הדבר מצביע על תפקידו של קטין, ולא גדולים, אנטיגנים histocompatibility בהיווצרות bronchiolitis סותם 6. יתר על כן, דיווחנו נטרול IL-17 מונע bronchiolitis סותם במודל murine. במצב זהאני מייצג כלי מחקר חדשנית לבדיקת ריאות השתלת וקידום השתלות ריאה קליניים.
The authors have nothing to disclose.
מקורות המימון: עבודה זו נתמכת על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקים HL067177, HL096845 ו P01AI084853 ל DSW
Name of the equipment | Company | Catalogue number |
Zeiss Opmi 6SFC-1880 | Prescott’s Inc | PMZ014 |
Harvard Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 55-7058 |
20-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100510D |
22-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 081015S |
24-gauge I.V. catheter | Terumo Medical Corporation | 100522A |
9/0 Meth Blue Virgin Silk | Ashaway Line & Twine Mfg. CO | MBVS-90 |
10-0 Alcon Surgical Suture | Alcon Laboratories, Inc | 8065-192101 |
Black Braided Silk 5-0/18inches | Henry Schein | M652630 |
Heparin Sodium 1000 units/ml | APP Pharmaceuticals | 407156 |
Betadine Solution | Purdue Product | 67618-150 |
Lactated Ringer’s injection | Hospira | NDC 0409-7953-03 |
Strain of the mice | Vendor | Age, Weight | Gender, Comments |
C57BL/10 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor |
C57BL/6 | Harlan Sprague-Dawley | 8-12 weeks, 25-30g | Male, Donor or recipient |
Table 2. Table of mice, specific reagents and equipment.