Demostramos cómo realizar macrófagos RM con contraste superparamagnético ultra pequeño (USPIO) en la artritis séptica, lo que permite una inicial y longitudinales In vivo Evaluación no invasiva de la infiltración de macrófagos y una evaluación de la eficacia de la terapia.
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Artículo de método
En vivo los macrófagos de imágenes utilizando MR Agente de contraste dirigida para la Evaluación Longitudinal de Artritis séptica
En este artículo
Resumen
Resumen
Los macrófagos son células clave en la iniciación, el desarrollo y la regulación de la respuesta inflamatoria a la infección bacteriana. Los macrófagos son intensamente y cada vez reclutados en las articulaciones sépticas de las fases tempranas de la infección y la infiltración se supone que retroceder una vez que se obtiene la eliminación eficaz de los agentes patógenos. La capacidad de identificar en la actividad de los macrófagos in vivo en una articulación infectada por lo tanto, puede proporcionar dos aplicaciones principales: la detección temprana de la sinovitis aguda y el seguimiento de la terapia.
En la detección no invasiva in vivo de los macrófagos se puede realizar con imágenes de resonancia magnética usando nanopartículas de hierro, tales como óxido de hierro superparamagnético ultra pequeño (USPIO). Después de la administración intravascular o intraarticular, USPIO están específicamente fagocitado por los macrófagos activados, y, debido a sus propiedades magnéticas, inducir cambios de señal en los tejidos que presentan infiltración de macrófagos. A quantitativEvaluación de correo del infiltrado es factible, como el área con pérdida de señal (número de píxeles oscuros) observó en eco de gradiente imágenes de RM después de inyección de partículas se correlaciona con la cantidad de hierro en el tejido y por lo tanto refleja el número de células USPIO-cargados.
Se presenta aquí un protocolo para realizar las imágenes de macrófagos utilizando USPIO-mejorada imágenes de RM en un modelo animal de artritis séptica, lo que permite una inicial y longitudinal en la evaluación no invasiva in vivo de la infiltración de macrófagos y una evaluación de la acción de la terapia.
Introducción
Formación de imágenes por resonancia magnética (MRI) se considera que es la modalidad de imagen de elección para la demostración de la sinovitis infecciosa debido a su alta resolución espacial y contraste de los tejidos blandos. Los cambios de señal observadas en la RM en la artritis baja T1 y de alta señal en T2 que refleja el aumento de la presencia de contenido de agua extracelular, y una marcada mejora después de la administración del agente de contraste basado en gadolinio, en consonancia con las conclusiones histológicamente de aumento de la vascularización debido a la vasodilatación y angiogénesis 1. Sin embargo, la RM es a menudo incapaz de demostr....
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Protocolo
Todos los procedimientos que involucran temas de los animales han sido aprobados por el Comité Institucional de Atención Animal Hospital Universitario.
1. La inoculación bacteriana intraarticular
- Antes de la inyección, anestesiar a los conejos por medio de inyección intramuscular de ketamina (30 mg / kg de peso corporal) se mezcla con xilazina (4 mg / kg) dentro de músculo erector Spinae. Asegúrese de animales son completamente anestesiados por la comprobación de que no responden a pinch pata. Este protocolo proporciona anestesia suficiente para la inyección intraarticular de la articulación de la rodilla. Coloque los animales ....
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Resultados
En las imágenes sin contraste, la membrana sinovial de las rodillas infectadas presenta una inflamación difusa de la señal intermedia que no es distinguible del tejido blando circundante, mientras que el fémur y la rótula aparecen como estructuras de señal bajos (Figura 1).
En las imágenes USPIO-mejoradas, 24 horas después de la administración del agente de contraste, el área sinovial que contiene macrófagos cargados de USPIO demostrará la pérdida de señal (Figuras 1.......
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Discusión
Mientras que los agentes de contraste a base de gadolinio no específicos proporcionan información sobre el volumen y la perfusión del espacio extracelular, los macrófagos formación de imágenes por MR USPIO-mejorada permite una localización anatómica precisa y una evaluación cualitativa de la infiltración de macrófagos dentro sinovial infectada sin la necesidad de tomar muestras de tejido 9. Debido a su alta sensibilidad, USPIO puede demostrar incluso sutil infiltrado celular presentes en las primeras fases de.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Agradecemos sinceramente a F. Bierry de asistencia en la producción y edición de video.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Nombre del reactivo/material | Número | catálogo | Comentarios |
| P904 | Guerbet | Dosis: 150 μ mol Fe/kg | |
| Ketamina (500 mg/ml ketamina) | Virbac | Dosis: 30 mg/kg | |
| Rompun (20 mg/ml Xilacina) | Axience | Dosis: 4 mg/kg | |
| Buprenorfina | Vetoquinol | Dosis: 0,1 mg/kg/8 h | |
| BD 22 G, 1 pulgada | BD Biosciences | 381423 | |
| BD 25 G, 5/8 pulgadas | BD Biosciences | 305122 |
Referencias
- Madri, J. Inflammation and healing. Anderson's Pathology. Kissane, J. , 67-110 (1990).
- Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. Rubin's Pathology. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).
- Verdrengh, M., Tarkowski, A.
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Reimpresiones y permisos
