MR Imagen Molecular del cáncer de próstata con un agente de contraste dirigidos Pequeño Molecular CLT1 Péptido

Summary

Para demostrar la imagen molecular del cáncer de MR con un pequeño péptido agente de contraste de MRI específica a las proteínas plasmáticas coagulados en estroma tumoral en un modelo de cáncer de próstata de ratón dirigido.

Abstract

Matriz extracelular del tumor tiene abundancia de proteínas relacionadas con el cáncer que se pueden utilizar como biomarcadores para el diagnóstico por imagen molecular del cáncer. En este trabajo, hemos demostrado el cáncer de RM molecular eficaz con un pequeño péptido molecular dirigida Gd-DOTA complejo monoamida como objetivo MRI agente de contraste específico a las proteínas plasmáticas coagulada en el estroma tumoral. Se realizó el experimento de evaluación de la eficacia del agente para la detección no invasiva de tumor de próstata con la RM en un modelo ortotópico de cáncer de próstata PC-3 de ratón. El agente de contraste diana era eficaz para producir la mejora del contraste significativa del tumor a una dosis baja de 0,03 mmol Gd / kg. El péptido agente de contraste de resonancia magnética específica es prometedor para la RM molecular del tumor de próstata.

Introduction

De formación de imágenes eficaz de dianas moleculares relacionados con el cáncer es de gran importancia para mejorar la precisión de la detección del cáncer antes y diagnóstico. La resonancia magnética (MRI) es una poderosa técnica de imagen clínica con alta resolución espacial y no la radiación de ionización ^1. Sin embargo, ningún agente de contraste específico está disponible para la imagen molecular del cáncer MR clínica. El diseño innovador y el desarrollo de agentes de contraste de resonancia magnética dirigidos avanzarían en gran medida la aplicación de la imagen molecular del cáncer de MR. Se han hecho esfuerzos significativos para desarrollar agent....

Protocol

Protocolo de adaptación de un estudio previo ^11.

1. Conjugación de Gd-DOTA para CLT1 Péptido

1. Uso de la síntesis de péptidos en fase sólida estándar, sintetizar CLT1 péptido (CGLIIQKNEC) a partir de aminoácidos protegidos con Fmoc en una resina de cloruro de 2-clorotritilo (1,0 mmol).
2. Después de la adición de aminoácido final, ciclar el péptido lineal en-resina con talio (III) trifluoroacetato (1,09 g, 2,0 mmoles, 2 equivalentes) en DMF (20 ml) a 0 º C durante 2 h.
3. Siguiente, conjugado de PEG y lisina secuencialmente a la N-terminal de CLT1 péptido (1,0 mmoles) en resina haciendo reaccionar secuenc....

Results

La Figura 1 muestra la síntesis del agente de contraste dirigidos CLT1-dl-(Gd-DOTA) ₄ y el esquema general del experimento. CLT1-dl-(Gd-DOTA) ₄ muestra la capacidad de relajación mucho más alto que el Gd-DOTA clínica (Tabla 1). A 1,5 T, la capacidad de relajación T ₁ por gadolinio de CLT1-dl-(Gd-DOTA) ₄ en PBS (pH 7,4) es de aproximadamente 3 veces mayor que la de Gd-DOTA ^10. Maestro de imagen confirma la fuerte unión específica de Rojo Texas etique.......

Discussion

Pasos críticos

La selección de biomarcadores adecuada y focalizada en los pequeños Péptido

Para desarrollar con éxito un agente de contraste objetivo con el tamaño pequeño, dos puntos clave deben ser considerados. En primer lugar, es importante seleccionar biomarcadores moleculares adecuados que son abundantemente presente en los tejidos enfermos con poca presencia en los tejidos normales. Nuestro biomarcador relacionado con el cáncer se selecciona,.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
>Fmoc	EMD Chemicals Inc
DOTA-tris(t-Bu)	TCI America
PyBOP, HOBt, HBTU	Nova Biochem
DIPEA, Trifluoroacetato de talio(III), TIS	Sigma-Aldrich Corp.
Texas Red, éster succinimidílico, isómero único	Invitrogen	T20175
EQUIPMENTS
Agilent 1100 Sistema de HPLC	Agilent
ZORBAX 300SB-C18 PrepHT columna	Agilent
ICP-– S Optima 3100XL	Perkin-Elmer
MALDI-TOF espectrómetro de masas	Bruker	AutoflexTM Speed
Maestro FLEX Sistema de imagen in vivo	Cambridge Research Instrumentation, Inc.
Escáner de resonancia magnética Biospec 7T	Bruker