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Artículo de método

Ascendente aórtica Constricción en ratas para la Creación de la sobrecarga de presión hipertrofia cardíaca Modelo

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DOI:

10.3791/50983

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29 de junio de 2014

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Se describe un procedimiento paso a paso para la creación de la sobrecarga de presión e hipertrofia del ventrículo izquierdo en ratas Wistar por la constricción de la aorta ascendente mediante un pequeño clip metálico. Este modelo se utiliza ampliamente para el estudio de los cambios de remodelación durante la hipertrofia cardíaca y para la identificación y evaluación de las estrategias para la regresión de dichos cambios.

Resumen

Ascendente constricción de la aorta es el modelo quirúrgico más común y exitoso para la creación de la sobrecarga de presión inducida por la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardíaca. Aquí se describe un procedimiento quirúrgico detallado para la creación de la sobrecarga de presión e hipertrofia cardiaca en ratas mediante la constricción de la aorta ascendente mediante un pequeño clip metálico. Después de la anestesia, la tráquea se intuba mediante la inserción de una cánula a través de una incisión media manera hecha entre dos anillos de cartílago de la tráquea. A continuación, una incisión en la piel se hace a nivel del segundo espacio intercostal en la pared torácica izquierda y capas musculares se borran hasta encontrar la parte ascendente de la aorta. La aorta ascendente se estrecha a 50-60% de su diámetro original mediante la aplicación de un pequeño clip de titanio de tamaño. Después de constricción de la aorta, las segunda y tercera costillas son aproximadas con suturas de prolene. Se restableció Se retira la cánula traqueal respiración espontánea una vez. Se deja que el animal pueda recuperarse On el cojín de calefacción mediante la reducción gradual de la anestesia. La intensidad de la sobrecarga de presión creada por la constricción de la aorta ascendente se determina mediante el registro de la gradiente de presión utilizando transtorácica bidimensional ecocardiografía Doppler. En general, este protocolo es útil para estudiar los eventos de remodelación y las propiedades contráctiles del corazón durante la aparición gradual y la progresión de la hipertrofia cardiaca compensada a la etapa de la insuficiencia cardíaca.

Introducción

Pequeños modelos animales son los instrumentos preferidos para el estudio de los cambios crónicos en el desarrollo de hipertrofia cardiaca y su progresión a la insuficiencia cardíaca. Modelos de insuficiencia cardíaca por métodos quirúrgicos fueron desarrollados originalmente en ratas ya que estos animales son los más adecuados para los procedimientos quirúrgicos del pecho abierto, la ecocardiografía y la evaluación de los parámetros hemodinámicos. También proporcionan muestras post mortem adecuados para estudios de nivel 1 moleculares del tejido, celular y. La constricción de la aorta ascendente es uno de los modelos quirúrgicos más comunes y exitosos par....

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Protocolo

Los experimentos con animales se realizaron después de obtener la aprobación del Comité de Ética Animal Institucional. Ratas Wistar fueron alojados bajo una oscuridad de 12 horas para el ciclo de luz, temperatura constante (24 ± 2 ° C) con comida y agua ad libitum (según las directrices CPCSEA).

1) Cuidado Pre-operatorio y anestesia

  1. Mantener la rata (aproximadamente 200 g de peso corporal) en virtud de antibiótico paraguas 24 horas antes de la cirugía mediante la administración de amoxicilina por vía oral (dosis: 500 mg / L de agua).
  2. Esterilice todos los instrumentos quirúrgicos (tales como tijeras, pinzas, aplicador ....

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Resultados

En nuestros experimentos podemos lograr más del 80% las tasas de supervivencia. La eficacia de la constricción de la aorta fue confirmada mediante la realización de ecocardiografía Doppler. Las ratas (n = 6) con un gradiente de presión de aproximadamente 60 mm de Hg en el sitio de constricción aórtica se observaron durante 8 semanas y se sacrificaron a analizar para el desarrollo de la hipertrofia cardíaca (Figura 1). Después de 8 semanas de evaluación ecocardiográfica después de la cirugía reveló un au.......

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Discusión

Hay varios modelos quirúrgicos para la inducción de la sobrecarga de presión, así como la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardíaca. En pequeños animales, Lorell y sus colegas desarrollaron el modelo que hemos descrito aquí y reportaron la ocurrencia de hipertrofia cardiaca compensada 8 semanas después aórtica 5. Cambios cardíacos avancen paulatinamente hacia un estado descompensada y luego dan lugar a la insuficiencia cardíaca. La principal ventaja de este modelo es la aparición gradual de aumento de .......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores reconocen Departamento de Biotecnología del Gobierno de la India para el apoyo financiero de este proyecto. Ajith Kumar GS fue apoyado con becas de investigación senior del Consejo de Investigación Científica e Industrial, Gobierno de la India y Binil Raj con beca de investigación de alto nivel de Consejo Indio de Investigación Médica, Gobierno de la India.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ratasmantenidas en ARF, RGCB
Sistemas de anestesia inhalatoria VetEquipAB19276
Ventilador para roedoresCWE IncSAR- 830/AP 
cánula traqueal para ratasCWE Inc13-21032
EcógrafoPhilipsHD7
Transductor de ultrasonidosPhilipsS 12
Clip de titanio (pequeño)Horizon1204
Aplicador de clipWeck137081
Afeitadora eléctricaVinverthVBT0817
Cuchilla BP (tamaño:11)CirujanoREF10111Preparación del sitio quirúrgico
OrquídeaTramadolOCH043
Clorhidrato de amoxicilinaRanbaxy
IsofluranoPiramal JeringasA23M10A
BD2015-09
4-0 seda trenzadaDiamante
3-0 ProleneJohnson& JohnsonNW018
Cinta quirúrgicaRomsonsSH 6301
Povidona yodadaWin Medicare
Temp. almohadilla térmica controladaFlamingoHC1003
Wistar cuidado de la salud de

Referencias

  1. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).
  2. Weinberg, E. O., et al.

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Reimpresiones y permisos

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