Basınç Aşırı Kardiyak hipertrofi Modeli Oluşturma Ratlarda Aort daralma, Artan
Summary
Biz küçük bir metalik klip kullanarak çıkan aortun daralması ile Wistar sıçanlarda basınç aşırı ve sol ventrikül hipertrofisi oluşturmak için adım adım bir prosedür açıklanmaktadır. Bu model yaygın olarak kalp büyümesi sırasında yeniden değişiklikleri incelemek için ve bu değişikliklerin regresyonu için stratejiler belirlenmesi ve değerlendirilmesi için kullanılmaktadır.
Abstract
Aort daralma Artan kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği kaynaklı aşırı basınç oluşturmak için en yaygın ve cerrahi başarılı bir modeldir. Burada, küçük bir metalik klip kullanarak çıkan aortun daralması ile sıçanlarda basınç aşırı ve kardiyak hipertrofisi yaratmak için detaylı bir ameliyat prosedürü tarif. Anestezi sonrasında, trakea trakea iki kıkırdak halkaları arasında yapılan bir yarım kesi yoluyla bir kanül sokularak entübe edilir. Sonra bir cilt kesi sol göğüs duvarında ikinci interkostal alanı düzeyinde yapılır ve kas tabakaları aort artan kısmını bulmak için temizlenir. Aorta, küçük boyutlu titanyum klibi uygulaması ile orijinal çapının% 50-60 daraltılmıştır. Aort daralma sonra, ikinci ve üçüncü prolen kaburga dikiş ile yaklaştırılır. Trakeal kanül çıkarıldıktan sonra spontan solunum yeniden kurulmuştur. Hayvan o geri bırakılıryavaş yavaş anestezi düşürerek ısıtma pedi n. Çıkan aort daralma yarattığı basınç yüklenmesinin yoğunluğu trans-torasik iki boyutlu Doppler-ekokardiyografi ile basınç degrade kayıt tarafından belirlenir. Genel olarak bu protokol, kalp yetmezliği aşamasına telafi kardiyak hipertrofinin arasındaki aşamalı başlangıcı ve gelişimi sırasında yeniden etkinliklerle kalbin kasılma özelliklerini incelemek için yararlıdır.
Introduction
Küçük hayvan modelleri, kardiyak hipertrofisi, kalp yetmezliği olan ilerleme gelişiminde kronik değişikliklerin çalışma için en çok tercih edilen araçlardır. Bu hayvanların açık göğüs cerrahi işlemler, hemodinamik parametreler ekokardiyografi ve değerlendirilmesi için en uygun olduğu gibi cerrahi yöntemlerle kalp yetmezliği modelleri orijinal olarak, sıçanlarda geliştirilmiştir. Onlar da hücresel doku ve moleküler düzeyde çalışmalar için 1 yeterli otopsi örnekleri sağlar. Çıkan aort darlığı basınç yüklenmesi kalp yetmezliği 2, 3 oluşturmak için en yaygın ve başarılı cerrahi modellerinden biridir. Bu model de hipertrofisi, kalp yetmezliği 4 geçiş sırasında hücresel ve alt hücresel yeniden olaylar ve kalbin kasılma özelliklerini incelemek için uygundur.
Bu modelin önemli bir avantajı, kalp 5 üzerindeki basınç yüklenmesinin kademeli başlangıcıdır </> 6 sup. Bu model, telafi kalp hipertrofiden dekompanse safhada ve nihayet kalp yetmezliği aşamasına yavaş ama istikrarlı bir ilerleme klinik olarak önemlidir. Kalp yetersizliği ve ilgili fizyolojik değişikliklere kardiyak hipertrofisi ilerlemesi için süresi esas olarak 7 üretilen stenoz derecesine etkilenmektedir. Artan sıkışma aort dikiş kullanarak ya da metal klipler 8, 9 uygulanmasıyla ya da iki şekilde yapılabilir. Aort daralma için bir metalik klip kullanmanın ana avantajı cerrahi daha az karmaşık olmasıdır. Bu yöntemde bir supra kapak çıkan aort bulmak ve daralma istenen seviyede elde etmek aort etrafında klibi eklemek zorundadır. Bir göğüs ekartör Bu prosedürde gerekli değildir. Dikiş ile aort bağlama çıkan aort yanında iğne yerleştirerek ve çevresinde dikilmeye daha fazla cerrahi manipülasyonlar gerektiriraort daralma istenilen düzeyde üretir. İkinci teknik aort daralması için metalik klip kullanımı ile karşılaştırıldığında, daha zaman alıcı olan. Bu video açıklanan yöntem oluşturma basıncı aşırı sol ventrikül hipertrofisi modeli sağlar: farelerde aort daralma artan için cerrahi prosedür gösterir.
Protocol
Representative Results
Discussion
Basınç yüklenmesinin indüksiyon yanı sıra kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği için çeşitli cerrahi modelleri vardır. Küçük hayvanlarda, Lorell ve arkadaşları burada anlattığımız model geliştirdi ve kompanse kardiyak hipertrofisi 8 hafta sonrası aort bağlama 5 geçtiği bildirildi. Kardiyak değişikliklerin yavaş yavaş bir dekompanse duruma ilerleme ve sonra kalp yetmezliği ile sonuçlanabilir. Bu modelin en büyük avantajı, sol ventrikül basıncı artışı ve hipertansiyon, kro…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar, bu projenin mali destek için Biyoteknoloji Bölümü, Hindistan Hükümeti kabul. Ajith Kumar GS Bilimsel ve Tıbbi Araştırma, Hindistan Hükümeti Hint Konseyi kıdemli araştırma bursu ile Endüstriyel Araştırma, Hindistan Hükümeti ve Binil Raj Konseyi kıdemli araştırma bursu ile desteklenmiştir.
Materials
| Wistar rats | Maintained at ARF, RGCB | ||
| Inhalation anaesthesia systems | VetEquip | AB19276 | |
| Rodent ventilator | CWE Inc | SAR- 830/AP | |
| Rat tracheal cannula | CWE Inc | 13-21032 | |
| Ultrasound system | Philips | HD7 | |
| Ultrasound transducer | Philips | S 12 | |
| Titanium clip (small) | Horizon | 1204 | |
| Clip applicator | Weck | 137081 | |
| Electric shaver | Vinverth | VBT0817 | |
| BP blade (size:11) | Surgeon | REF10111 | Preparation of surgical site |
| Tramadol | Orchid health care | OCH043 | |
| Amoxycillin Hydrochloride | Ranbaxy | ||
| Isoflurane | Piramal health care | A23M10A | |
| Syringes | BD | 2015-09 | |
| 4-0 braided silk | Diamond | ||
| 3-0 prolene | Johnson&Johnson | NW018 | |
| Surgical tape | Romsons | SH 6301 | |
| Povidone iodine | Win Medicare | ||
| Temp. controlled heating pad | Flamingo | HC1003 |
Referencias
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).
- Weinberg, E. O., et al. Angiotensin-converting enzyme inhibition prolongs survival and modifies the transition to heart failure in rats with pressure overload hypertrophy due to ascending aortic stenosis. Circulation. 90, 1410-1422 (1994).
- Schunkert, H., et al. Increased rat cardiac angiotensin converting enzyme activity and mRNA expression in pressure overload left ventricular hypertrophy. Effects on coronary resistance, contractility, and relaxation. J Clin Invest. 86, 1913-1920 (1990).
- Hasenfuss, G. Animal models of human cardiovascular disease, heart failure and hypertrophy. Cardiovasc Res. 39, 60-76 (1998).
- Litwin, S. E., et al. Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure. Circulation. 91, 2642-2654 (1995).
- Miyamoto, M. I., et al. Adenoviral gene transfer of SERCA2a improves left-ventricular function in aortic-banded rats in transition to heart failure. Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 793-798 (2000).
- Kagaya, Y., Hajjar, R. J., Gwathmey, J. K., Barry, W. H., Lorell, B. H. Long-term angiotensin-converting enzyme inhibition with fosinopril improves depressed responsiveness to Ca2+ in myocytes from aortic-banded rats. Circulation. 94, 2915-2922 (1996).
- Del Monte, F., Butler, K., Boecker, W., Gwathmey, J. K., Hajjar, R. J. Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure. Physiol Genomics. 9, 49-56 (2002).
- Turcani, M., Rupp, H. Heart failure development in rats with ascending aortic constriction and angiotensin-converting enzyme inhibition. Br J Pharmacol. 130, 1671-1677 (2000).
- Kerem, A., et al. Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization. Circ Res. 106, 1103-1116 (2010).
- Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
