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Artículo de método

Preparación fácil del ensamblado autónomos Internamente Lípidos Las partículas estabilizadas por nanotubos de carbono

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DOI:

10.3791/53489

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19 de febrero de 2016

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En este artículo

Resumen

Informamos sobre una aplicación inteligente de nanotubos de carbono para la estabilización cinética de partículas lipídicas que contienen nanoestructuras autoensambladas en sus núcleos. La preparación de partículas lipídicas requiere concentraciones bastante bajas de nanotubos de carbono, lo que permite su uso en aplicaciones biomédicas, como la administración de fármacos.

Resumen

Se presenta un método fácil para preparar partículas lipídicas nanoestructurados estabilizados por nanotubos de carbono (CNT). De una sola pared (prístina) y de paredes múltiples (funcionalizados) CNTs se utilizan como estabilizadores para producir emulsiones (O / W) de tipo Pickering aceite-en-agua. Los lípidos a saber, Dimodan U y fitantriol se utilizan como emulsionantes, que en el exceso de agua se autoensamblan en la fase Pn3m cúbica bicontinua. Esta fase altamente viscoso se fragmenta en partículas más pequeñas utilizando una sonda de ultrasonidos en presencia de estabilizadores de agentes tensioactivos convencionales o nanotubos de carbono como se hizo aquí. Inicialmente, los nanotubos de carbono (forma de polvo) se dispersan en agua seguido de nuevo de ultrasonidos con el lípido fundido para formar la emulsión final. Durante este proceso los NTC quedan recubiertas con moléculas de lípidos, que a su vez se presume para rodear las gotitas de lípidos para formar una emulsión de partículas que es estable durante meses. El tamaño medio de las partículas lipídicas estabilizadas nanoestructurados-CNT está en el submicrónico range, lo que se compara bien con las partículas estabilizadas usando agentes tensioactivos convencionales. Pequeño datos de ángulo de dispersión de rayos X confirma la retención de la fase cúbica Pn3m original en las dispersiones de lípidos estabilizadas-CNT en comparación con la fase lipídica pura (estado a granel). desplazamiento al azul y el descenso de las intensidades en G característica y bandas de CNTs observados en la espectroscopia Raman G 'caracterizar la interacción entre la superficie y de lípidos moléculas CNT. Estos resultados sugieren que las interacciones entre los nanotubos de carbono y los lípidos son responsables de su estabilización mutua en soluciones acuosas. Como las concentraciones de nanotubos de carbono empleados para la estabilización son muy bajos y las moléculas de lípidos son capaces de funcionalizar los NTC, se espera que la toxicidad de los CNT a ser insignificante, mientras que su biocompatibilidad es mucho mayor. Por lo tanto el presente enfoque encuentra un gran potencial en diversas aplicaciones biomédicas, por ejemplo, para el desarrollo de sistemas de nanotransportador híbridos para la entrega de multiple moléculas funcionales como en la terapia de combinación o politerapia.

Introducción

Durante las últimas décadas, la nanotecnología se ha convertido en una herramienta poderosa en especial en el campo de desarrollo preclínico de medicamentos para combatir enfermedades como el cáncer notorios 1. En este contexto, las estructuras a nanoescala con un tamaño de <1000 nm son ampliamente explorada como vehículo de administración de diversas biomoléculas activas tales como fármacos, proteínas, ácidos nucleicos, genes y agentes de diagnóstico por imagen 1-4. Estas biomoléculas se encapsulan ya sea dentro de las nanopartículas o conjugarse en la superficie de las nanopartículas y se liberan en el sitio de acción de los factores desencade....

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Protocolo

Precaución: los nanotubos de carbono utilizados en este trabajo se presentan en forma de nanopartículas que puede tener riesgos adicionales en comparación con sus homólogos a granel. La inhalación de grafito, tanto naturales como sintéticos, puede causar neumoconiosis 62 similar a la neumoconiosis de los mineros del carbón. Por otra parte, ha habido preocupaciones relacionadas con la toxicidad de nanoestructuras de carbono basadas y algunos de los estudios anteriores sugieren toxicidad aguda y crónica asociada con la inhalación de CNTs 63-68. Por lo tanto, evitar la inhalación del polvo fino CNT y manejarlo con mucho cuidado. Si es inhalado, trasladar al aire libre.....

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Resultados

Los siguientes resultados representan a) la estabilidad de las dispersiones, b) la distribución de tamaños de partículas lipídicas, c) el tipo de auto-ensamblaje y d) Las pruebas para el revestimiento de lípidos de la CNT. La estabilidad de las dispersiones (Figura 2) se controló utilizando una cámara de 5 MP con enfoque automático y flash LED.

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Discusión

La estabilización de las partículas lipídicas
Tres CNTs diferentes se utilizan para estabilizar las dispersiones de lípidos; dos de los cuales son de múltiples paredes y funcionalizado usando -OH y grupos -COOH, y uno es único con funcionalidad no amurallado y (virgen). La CNT variar en tamaño como sigue (diámetro x longitud): MWCNT-COOH: 9,5 nm x 1,5 m; MWCNT-OH: 8-15 nm x 50 micras; SWCNT: 1-2 nm x 1-3 micras. Los nanotubos de carbono en polvo se dispersaron en agua por la sonda ultra-sonicació.......

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Divulgaciones

No tenemos nada que revelar.

Agradecimientos

Nos gustaría agradecer al Dr. Matthew J. Baker, ahora en la Universidad de Strathclyde, Glasgow por el apoyo con los experimentos Raman y el Sr. Nick Gaunt por su trabajo previo de este proyecto.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tienda Dimodan UDanisco15312en 4  °C. No peligroso. Irritante para los ojos y la piel.
Fitantriol (> 95%, GC)TCI Europe N.V.Tienda P1674en 4  °C. No peligroso. Irritante para los ojos y la piel.
Nanotubos de carbono de pared simple (90%)Nanoestructurados & Materiales amorfos, Inc. 1246YJSAlmacenar a temperatura ambiente. Lejos de la luz directa. Irritante para los ojos, la piel y el sistema respiratorio.
Nanotubos de carbono funcionalizados con ácido carboxílico de pared múltiple (>  80% Base de Caron, >  Ácido carboxílico al 8% funcionalizado)Sigma-Aldrich Co. LLC 755125Almacenar a temperatura ambiente. Lejos de la luz directa. Causa irritación ocular grave. Puede causar irritación respiratoria.
Nanotubos de carbono hidroxifuncionalizados de pared múltiple grafitizados (99.9%)Nanoestructurados & Materiales Amorfos, Inc. (NanoAmor) 1224YJFAlmacenar a temperatura ambiente. Lejos de la luz directa. Irritante para los ojos, la piel y el sistema respiratorio.
Pluronic F127Sigma-Aldrich Co. LLC P2443Biorreactivo, apto para cultivo celular. No es una sustancia o mezcla peligrosa. Almacene a temperatura ambiente.
Acetona (99.5%)Fisher Scientific 10134100Líquido altamente inflamable. Causa irritación ocular grave. Puede causar somnolencia o mareos.
Frascos con tapas sueltas y envolventes (375  vasoprecipitadosVWR International Ltd216-3308
1.000 mlFisher Scientific 12942161de alta resistencia, de forma baja, con pico y graduaciones
Pipeta de vidrio Pasteur (150 mm de longitud) con bulbo de látexFisher Scientific 
Tubo de microcentrífuga cónico snap cap 1.5  mlFisher Scientific 
EspátulaFisher Scientific 
Agitador magnético de calentamientoFisher Scientific 
Barras agitadoras magnéticas (cilíndricas, PTFE opaco, 30  mm x 7 pulgadas; mm (l x diámetro))FisherScientific Aguja 10011792
(0,9 mm x 40 mm) mm longitud de la cánula)Terumo UK LtdMN-2038MQ
Juego de soporte de retorta - Con soporte, abrazadera, base, varilla, goma 3 mordazas y cabeza de jefeCamlab Ltd, Reino Unido1177157
Millipore equipo de aguaBarnstead Nanopure, Thermoscientific, EE. UU.
Microcentrífuga digital Progen Genfuge 24DProgen ScientificC-2400
Sonda ultrasónica, con 13 mm SONIDOS, Vibracell,  Cámara de 5 MP de EE. UU
con enfoque automático y flash LEDSamsung
Espectrómetro RamanHoriba Jobin-Yvon LabRAM HR800 Espectrómetro
Mastersizer 3000  Malvern Instruments Ltd, Malvern, Reino Unido
Dispersión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS)Cámara SAXSpace (Anton Paar, Graz, Austria), equipo generador de rayos X (ISO-DEBYEFLEX3003, GE Inspection Technologies GmbH), circuito cerrado de agua (Chilly 35, HYFRA, Alemania). 
de , 10006021115582321135220411715704. Galaxy Fame Cámara móvil

Referencias

  1. Peer, D., et al. Nanocarriers as an emerging platform for cancer therapy. Nature Nanotech. 2, 751-760 (2007).
  2. White, R. R., Sullenger, B. A., Rusconi, C. P. Developing aptamers into therapeutics. J. Clin. Invest. 106, 929-934 (2000).
  3. Itaka, K., Chung, U. I., Kataoka, K. ....

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Reimpresiones y permisos

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