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Artículo de método

Un ensayo de hemoglobina rápida y libre de químicos con fototérmica angular de dispersión de luz

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DOI:

10.3791/55006

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7 de diciembre de 2016

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En este artículo

Resumen

Un sensor fototérmico de dispersión de luz angular (PT-AS) permite el ensayo de hemoglobina rápido y sin químicos de muestras de sangre a escala de nanolitros. Aquí se proporcionan detalles de la configuración de PT-AS y un protocolo de medición para la concentración de hemoglobina en sangre. También se presentan resultados representativos de muestras de sangre anémicas.

Resumen

Photo-térmica angular de dispersión de luz (PT-AS) es un método óptico novedoso para la medición de la concentración de hemoglobina ([Hb]) de muestras de sangre. Sobre la base de la respuesta fototérmica intrínseca de las moléculas de hemoglobina, el sensor permite una alta sensibilidad, la medición libre de químicos de [Hb]. [Hb] capacidad de detección con un límite de 0,12 g / dl en el rango de 0,35 a 17,9 g / dl se ha demostrado previamente. El método se puede implementar fácilmente utilizando dispositivos electrónicos de bajo costo de consumo, tales como un puntero láser y una cámara web. El uso de un tubo de micro-capilar como un recipiente de sangre también permite el ensayo de la hemoglobina con un volumen de sangre de nanolitros escala y un bajo costo de operación. A continuación, se presentan instrucciones detalladas para los procedimientos de procesamiento de configuración PT-ópticos y de señal. También se proporcionan los protocolos experimentales y los resultados representativos de las muestras de sangre en condiciones anémicas ([Hb] = 5,3, 7,5, y 9,9 g / dl), y las mediciones se comparan con los froanalizador de hematología ma. Su simplicidad en la implementación y operación de permitir su adopción generalizada en los laboratorios clínicos y entornos con recursos limitados.

Introducción

Un análisis de sangre se realiza con frecuencia para evaluar la salud humana en general y para la detección de biomarcadores relacionados con ciertas enfermedades. Por ejemplo, la concentración de colesterol en la sangre sirve como criterio para la hiperlipidemia, que está estrechamente relacionada con enfermedades cardiovasculares y pancreatitis. El contenido de glucosa en sangre deben ser medidos con frecuencia, ya que el nivel de glucosa se asocia con complicaciones tales como la cetoacidosis diabética y el síndrome hiperosmolar hiperglucémico. Las enfermedades graves como la malaria, el virus de la inmunodeficiencia humana y el síndrome de inmunodeficiencia adqui....

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Protocolo

Los experimentos con muestras de sangre se realizaron en cumplimiento de las leyes y directrices institucionales. Las muestras fueron las muestras de sangre residual que habían sido adquiridas y procesadas en los ensayos clínicos en la institución.

1. PT-AS Configuración óptico

NOTA: Se puede utilizar un tubo de micro-capilar de vacío para una configuración inicial PT-AS.

  1. Montar un tubo de micro-capilar vacío con diámetros interior y exterior de 200 y 330 micras, respectivamente, y una longitud de más de ~ 5 cm en un accesorio de tubo capilar. accesorios de fibra comercialmente disponibles se pueden usar como el accesorio de tubo.
  2. ....

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Resultados

Un ensayo de hemoglobina se realizó utilizando el sensor PT-AS, y sus mediciones se compararon con los de un analizador de hematología. El experimento se realizó con una intensidad de luz de excitación PT de 1,4 W / cm 2, PT frecuencia de modulación de 2 Hz, y la medición de tiempo de 5 seg. La Tabla 1 resume las condiciones experimentales. Los tamaños de haz de la sonda y la excitación de la luz PT fueron del 5,5 y 2 mm, respectivamente. La cámara web registr.......

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Discusión

El sensor PT-AS representa un método totalmente óptico capaz de medir directamente la [Hb] de las muestras de sangre no procesada. El método cuantifica [Hb] en la sangre usando la respuesta PT intrínseca de las moléculas de hemoglobina en los eritrocitos. Bajo iluminación con luz de 532 nm, las moléculas de Hb absorben la energía de la luz y producen calor. El aumento de temperatura resultante cambia el RI de la muestra de sangre. La alta sensibilidad de RI de BSI fue explotada para medir este cambio de RI en la sangre........

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Divulgaciones

No se declara ningún conflicto de intereses.

Agradecimientos

Esta investigación fue apoyada por los programas de investigación de la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) (NRF-2015R1A1A1A05001548 y NRF-2015R1A5A1037668).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Puntero láser de 650 nmLASMACLED-1 Luz desonda
Capilares de vidrio redondos huecosVitroComCV2033Contenedor de muestras de sangre
Webcam SensorLogitechC525CMOS
Sistema de corte ópticoThorlabsMC2000-ECPicador óptico
Filtro de paso largo de plásticoEdmund Optics#43-942Para rechazar la luz de excitación PT de 532 nm
Pinza de fibraThorlabsSM1F1-250Accesorio de tubo capilar
tubo de muestreo de sangre recubierto de EDTAGreiner Bio-OneVACUETTE 454217Toma de muestras de sangre y anticoagulación
Analizador de hematologíaSiemens AGADVIA 2120iAnalizador de hematología de referencia
óptico

Referencias

  1. Mokken, F. C., Kedaria, M., Henny, C. P., Hardeman, M., Gelb, A. The clinical importance of erythrocyte deformability, a hemorrheological parameter. Ann. Hematol. 64 (3), 113-122 (1992).
  2. Rosenblit, J., et al. Evaluation of three met....

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