Summary

Un modelo de rata de Orthotopic trasplante del hígado usando una técnica de Anastomosis magnética novela para la reconstrucción de la Vena Cava suprahepática

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

La reconstrucción de la cava suprahepática (SHVC) sigue siendo un paso difícil en el trasplante orthotopic del hígado de rata. En este artículo, se muestra un protocolo paso a paso para la reconstrucción de SHVC en ratas usando una técnica de anastomosis magnética novela.

Abstract

El modelo de la rata del trasplante orthotopic del hígado (OLT) es esencial para la investigación del trasplante. Es un modelo animal muy sofisticado y requiere una curva de aprendizaje. La introducción de la técnica del manguito para la anastomosis de la vena porta (PV) y infrahepatic de la vena cava (IHVC) ha simplificado considerablemente el procedimiento de trasplante en ratas. Sin embargo, debido a la poca pared anterior de suprahepáticas vena cava los destinatarios (SHVC), la técnica del manguito es muy difícil de utilizar para la reconstrucción de la SHVC. Mayoría de los investigadores en este campo todavía utiliza la técnica de sutura de mano para la reconstrucción de SHVC, que hace el paso cuello de botella en el trasplante orthotopic del hígado de rata. La técnica de anastomosis magnética (es decir, magnamosis) es un método de conectar dos vasos con la fuerza de atracción entre dos imanes. Nuestro reciente estudio ha demostrado que la técnica de anastomosis magnética es superior a la técnica de sutura de la mano para reconstrucción SHVC en ratas. En este artículo, se muestra un protocolo paso a paso para la reconstrucción de SHVC en ratas mediante la técnica de anastomosis magnética novela. En este modelo, la reconstrucción de la PV y IHVC se realizó por la técnica de brazalete estándar, mientras que la reconstrucción de la vía biliar (BD) fue realizada por una técnica de stent. No se realizó la arterialización de la hepática. La técnica de anastomosis magnética hace mucho más fácil reconstrucción SHVC y había acortado significativamente la fase anphepatic. Después de una curva de aprendizaje razonable, los investigadores incluso sin conocimientos de microcirugía avanzadas pueden producir resultados fiables y reproducibles mediante este modelo de rata de OLT.

Introduction

El modelo de la rata del trasplante orthotopic del hígado (OLT) es esencial para trasplante investigación1,2. La primera rata OLT fue descrita por Lee et al. en 19733. En ese modelo, todos los buques fueron reconstruidos por la técnica de sutura de la mano. La técnica de sutura de mano requiere técnicas avanzadas de microcirugía, que limita significativamente su utilización. Desde entonces, se han reportado diversas modificaciones del protocolo original de rata OLT. Entre ellos, la técnica del manguito para la anastomosis de la vena porta (PV) y infrahepatic de la vena cava (IHVC) reportado por Kamada et al. en 1979 se considera una mejora importante para este modelo, como simplifica significativamente los procedimientos de reconstrucción4 . Sin embargo, debido a la poca pared anterior de suprahepáticas vena cava los destinatarios (SHVC), la técnica del manguito es muy difícil de utilizar para la reconstrucción de la SHVC. Mayoría de los investigadores en este campo todavía utiliza la técnica de sutura de mano para la reconstrucción de SHVC, que hace el paso cuello de botella en rata OLT5,6,7.

La técnica de anastomosis magnética (es decir, magnamosis) es un método de conectar dos vasos u otras estructuras tubulares con la fuerza de atracción entre dos imanes8,9,10,11. Poco a poco, la fuerza magnética comprime y remodela el tejido en un fuerte, sutureless anastomosis12,13. Esta anastomosis de compresión ha demostrado para ser eficaz en los seres humanos14,15. Hemos diseñado un par de anillos magnéticos específicamente para la anastomosis de la SHVC en ratas. Nuestro reciente estudio ha demostrado que la técnica de anastomosis magnética es superior a la técnica de sutura de la mano para reconstrucción SHVC en rata OLT16. El propósito de este artículo es proporcionar un protocolo detallado, paso a paso para la reconstrucción de SHVC en ratas mediante la técnica de anastomosis magnética novela.

Protocol

El protocolo se llevó a cabo con arreglo a las directrices para el cuidado y uso de animales de laboratorio y fue aprobado por el Comité sobre el ética de Animal experimentos de Xian Universidad Jiaotong, Xi ‘ an, Shaanxi provincia, China. Nota: Ninguno de los procedimientos en el presente Protocolo fue realizada bajo un microscopio quirúrgico. 1. preoperatorio preparación El diseño y la forma de los anillos magnéticos (figura 1…

Representative Results

Después de unos 10 intentos, la técnica de anastomosis magnética para reconstrucción SHVC fue dominada con éxito por un investigador que previa capacitación microquirúrgica. La reconstrucción de la SHVC llevo menos de 2 min. La fase anhepatic para las ratas destinatarias era aproximadamente 10 minutos. No hay trombosis, hemorragia o angiostegnosis se observó en el sitio anastomótico SHVC en 1, 5 y 30 días después de la reperfusión. La cavography de la vena inferior fue realiz…

Discussion

Muchos avances clínicas en trasplante hepático se pueden atribuir a los estudios en animales. Rata OLT es un modelo bien aceptado y ampliamente utilizado en la investigación de preservación de órgano, trasplante de Inmunología, fisiología y patología. Sin embargo, también es un procedimiento muy complicado y requiere habilidad microsurgical avanzada. A pesar de muchas mejoras en el procedimiento de rata OLT, la anastomosis SHVC mantuvo un paso desafiante. En este artículo describimos una técnica de anastomosis…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por subvenciones del Ministerio de educación innovación equipo desarrollo programa de China (Nº IRT16R57), Fundación Nacional de Ciencias naturales de China (Nº 81470896) y una investigación del fondo para jóvenes talento contratar planes de Xian Jiaotong University (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

Referencias

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Citar este artículo
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

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