Ingeniería del tejido epitelio pigmentario de la retina trasplante adecuado derivado de células madre embrionarias humanas

Karim Ben M'Barek; Walter Habeler; Alexandra Plancheron; Mohamed Jarraya; Olivier Goureau; Christelle Monville

doi:10.3791/58216

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Artículo de método

Ingeniería del tejido epitelio pigmentario de la retina trasplante adecuado derivado de células madre embrionarias humanas

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DOI:

10.3791/58216

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6 de septiembre de 2018

Karim Ben M'Barek¹^,²^,³ , Walter Habeler¹^,²^,³ , Alexandra Plancheron¹^,²^,³ , Mohamed Jarraya⁴ , Olivier Goureau⁵ , Christelle Monville¹^,²

¹U861, I-Stem, Association Française contre les Myopathies (AFM), Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), ²U861, I-Stem, Association Française contre les Myopathies (AFM), Université Evry Val-d'Essonne (UEVE), ³I-Stem, Association Française contre les Myopathies (AFM), Centre pour L’Etude des Cellules Souches (CECS), ⁴Banque de tissus humain, Hôpital Saint Louis, Assistance Publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP), ⁵Sorbonne Université, INSERM, CNRS, Institut de la Vision, F-75012

En este artículo

Resumen

Se describe un método para diseñar un retineano tejido compuesto de células epiteliales del pigmento retiniano derivadas de las células de vástago pluripotent humanas cultivadas sobre las membranas amnióticas humanas y su preparación para injerto en modelos animales.

Resumen

Varias condiciones patológicas del ojo afectan a la funcionalidad y la supervivencia del epitelio retiniano del pigmento (RPE). Estas son algunas formas de retinitis pigmentosa (RP) y degeneración macular senil (DMS). La terapia celular es una de las estrategias terapéuticas más prometedoras propuestas para curar estas enfermedades, con alentar ya resultados preliminares en seres humanos. Sin embargo, el método de preparación del injerto tiene un impacto significativo en sus resultados funcionales in vivo. De hecho, son menos funcionales que las misma células trasplantadas como un tejido retiniano células RPE injertadas como una suspensión. Adjunto, describimos un método simple y reproducible al ingeniero RPE tejido y su preparación para la implantación de una en vivo . Se siembran las células RPE derivadas de células madre pluripotentes humanas sobre un soporte biológico, la membrana amniótica humana (jamón). En comparación con andamios artificiales, este apoyo tiene la ventaja de tener una membrana del sótano que está cerca de donde se unen las células RPE endógenas la membrana de Bruch. Sin embargo, su manipulación no es fácil, y hemos desarrollado varias estrategias para su adecuado cultivo y preparación para injerto en vivo.

Introducción

RPE es crucial para la supervivencia y la homeostasis de los fotorreceptores con el cual está firmemente asociado¹. Varias condiciones patológicas alteran su funcionalidad y supervivencia, incluyendo RP y AMD.

RP es un grupo de mutaciones monogénicas hereditarias que afectan a las funciones de los fotorreceptores o las células RPE o ambos²^,³. Se estima que las mutaciones que afectan específicamente el RPE células representan el 5% de RP². AMD es otra condición donde se altera la capa RPE, pérdida de visión central en última instancia a....