Aquí se describe el uso de varias herramientas caseras para transferir, enfriar y matar drosophilaadulta, así como para limpiar viales de cultivo de vidrio y recoger huevos. Estas herramientas son fáciles de hacer y son bastante eficientes en el manejo de Drosophila.
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Artículo de método
Herramientas caseras simples para manejar moscas de la fruta—Drosophila melanogaster
En este artículo
Resumen
Resumen
La mosca de la fruta, Drosophila melanogaster, es ampliamente utilizado tanto en la investigación biológica y la educación biológica. El manejo de moscas adultas es común pero difícil en la práctica, ya que las moscas adultas vuelan. Aquí se muestra cómo hacer algunas herramientas simples y rentables para abordar problemas difíciles en el manejo de Drosophila. Se hacen orificios en los tapónes de espuma y se insertan puntas o embudos de pipeta en los orificios. Las moscas entonces se mueven sólo en una dirección en el conjunto de punta/embudo de pipeta, lo que permite un control eficiente de la transferencia de Drosophila adulta dentro o fuera de un vial. Los protocolos existentes se han modificado para las moscas de anestetización fría enfriándose en hielo triturado y transfiriéndolas a una superficie fría y dura de la bolsa de hielo. La bolsa de hielo está cubierta con un pedazo de gasa médica que mantiene las moscas inmovilizadas del agua condensada cuando se examina bajo un estereomicroscopio. Las moscas son finalmente eutanasiadas para contar y clasificar o descartadas por microwaving. También se ha desarrollado una jaula en forma de botella para recoger huevos, así como un dispositivo de ahorro de mano de obra y un protocolo de acompañamiento para la limpieza de viales de cultivo de vidrio.
Introducción
La mosca de la fruta, Drosophila melanogaster, es un organismo modelo ampliamente utilizado en la investigación biológica y la educación biológica para estudiar una amplia gama de temas1,2. Los problemas básicos de manejo de Drosophila son la transferencia de adultos de vial a vial e inmovilización de las moscas para que sean más fáciles de manejar, ya que todos los adultos (excepto algunos mutantes3,4) pueden volar.
Convencionalmente, un investigador transfiere moscas de un vial a otro sosteniendo dos vial....
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Protocolo
1. Preparación de herramientas y accesorios
- Tapón de punta/embudo
- Obtener dos tapones de esponja (el diámetro de los tapones debe ser ligeramente mayor que el diámetro interno de los viales utilizados para transferir moscas). Haga un agujero en los centros de los tapones de esponja con un soldador eléctrico calentado.
- Obtenga dos puntas de pipeta de 1 ml, corte una por la mitad transversalmente con un cuchillo afilado y deseche el extremo puntiagudo. A continuación, corte 1,5 cm del extremo puntiagudo de la segunda punta de pipeta. Pegue los restos de las dos puntas de pipeta junto con un adhesivo multiusos para hacer un....
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Resultados
Los T- y F-stoppers fueron desarrollados como un conjunto de herramientas simples que se pueden adaptar y utilizar en cualquier actividad de transferencia de moscas. Transferir moscas de una cultura antigua a varios cultivos frescos implica quitar los tapones de los viales frescos, reemplazarlos con F-stoppers, luego derribar las moscas en el vial viejo, quitar rápidamente su enchufe y reemplazarlo con un T-stopper. Si el alimento viejo es compacto, entonces es importante voltear el vial .......
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Discusión
Algunas herramientas caseras para manejar las actividades básicas involucradas en la cría y experimentación de Drosophila se describen en este artículo. Estas herramientas son simples pero bastante efectivas. Prácticamente, cualquier laboratorio puede hacer estas herramientas con facilidad, y una investigación o un laboratorio de enseñanza no necesita encontrar una alternativa ya hecha que tal vez no esté disponible localmente.
La transferencia de moscas es la práctica más común y una.......
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Divulgaciones
El autor no tiene nada que revelar.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Un par de alicates | |||
| Taladro atornillador | Velocidad máxima: 500 rpm | ||
| Soldador | |||
| Lima | |||
| Diámetro del embudo | del disco< Nevera | ||
| Alfileres para | |||
| Termómetro | HCIYET HT-830 | ||
| goma de puño largo | |||
| Portaminas Gasa | |||
| médica Tubo | |||
| microcentrífuga | 100 ul | ||
| Horno | |||
| Parafilm | |||
| Peri plato | diámetro interno 60 mm | ||
| Puntas | 1 ml | ||
| Película | |||
| plástico Plato Peri de | Φ 36 mm se utiliza para cubrir el vial vacío | ||
| Pinzas de | |||
| punta Guantes | |||
| Bolsas de | 26,5 veces; 14.5 veces; 2,5 cm o más grande | ||
| Soplador | |||
| Cortador | |||
| Botella | de 500 ml, diámetro interno c.a. 65 mm | ||
| Tapón | |||
| Esponjas de | |||
| Cepillo | |||
| Vial | & Fi; 34 mm y tiempos; 90 milímetros |
Referencias
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
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Reimpresiones y permisos
