Цель этого исследования заключается в создании и проверке животной модели для исследования в области восстановления и сиквелы этапов ишемии мозга путем тестирования инфаркта мозга и сенсорной функции после средней мозговой артерии окклюзии / реперфузии (MCAO/R) после 1-90 дней у крыс.
Целью этого исследования было создание и проверка модели ишемии мозга животного в стадии восстановления и сиквела. Была выбрана модель средней мозговой артерии/реперфузии (MCAO/R) у крыс-мужчин Спраг-Доули. Изменяя вес крысы (260-330 г), тип болта резьбы (2636/2838/3040/3043) и время инфаркта мозга (2-3 ч), более высокий балл Лонгы, больший объем инфаркта и большее соотношение успеха модели были проверены с помощью оценки Longa и tTC. Оптимальное состояние модели (300 г, 3040 ниток болт, 3 ч время инфаркта мозга) был приобретен и использован в 1-90-дневный период наблюдения после реперфузии через оценку сенсорных функций и инфаркта объема. В этих условиях двусторонний тест на асимметрию имел существенное различие от 1 до 90 дней, а тест на ходьбу от сетки имел существенное различие от 1 до 60 дней; оба различия могут быть подходящим сенсорным функциональным тестом. Таким образом, наиболее подходящим условием новой модели крыс в стадии восстановления и сиквела ишемии мозга было найдено: 300 г крыс, которые прошли MCAO с 3040 нитью болт для 3 ч мозга инфаркта, а затем reperfused. Соответствующими функциональными тестами сенсорного двигателя стали двусторонний тест на асимметрию и тест на ходьбу по сетке.
Ишемия мозга делится на три стадии с различными показателями после инсульта: острая стадия (в течение 1 недели), стадия восстановления (от 1 недели до 6 месяцев) и стадия сиквела (более 6 месяцев). В настоящее время большинство исследований сосредоточены на острой стадии ишемии головного мозга из-за его значительного эффекта и многородных моделей исследований1,2,3. Тем не менее, восстановление и сиквелы стадии ишемии головного мозга не могут быть проигнорированы из-за их долгосрочного осложнения инвалидности. Таким образом, цель этого исследования заключается в изучении стабильной, надежной и относительно простой модели животных для исследования восстановления и сиквела этапов ишемии мозга.
Среди многих экспериментальных моделей ишемии головного мозга, мы используем среднюю мозговую артерию окклюзии (MCAO) через нить болт вставки в правой средней мозговой артерии (MCA). Эта модель похожа на человеческий инсульт, который может производить большие объемы инфаркта, привести ко многим поведенческим расстройствам, связанным с инсультом, и может позволить реперфузии крови (R) путем удаления нити болт4,5,6. MCAO/R также считается золотым стандартом животной модели ишемии мозга7. Кроме того, тяжесть черепно-мозговой травмы зависит от диаметра и длины вставки нити болт, продолжительность ишемии мозга, и животный вес (большие крысы имеют больший мозг и толще сосудов головного мозга)8. Таким образом, путем изменения типа нить болт, infarct время, и крысы вес, подходящая модель может быть найдена для восстановления и сиквела этапов ишемии мозга в MCAO / R крыс. Для проверки модели крыс мы провели 1-дневное, 35-дневное, 60-дневное и 90-дневное исследование модели MCAO/R с использованием экспериментов tTC по окрашиванию и сенсорной функции (двусторонний тест на асимметрию, тест на ходьбу по сетке, тест на ротарод и тест на подъемную веревку).
Многие модели установления методов и поведенческих показателей, которые хорошо используются в острой ишемии головного мозга не может иметь значительные изменения в восстановлении и сиквелы этапов ишемии мозга16,17. Тем не менее, число пациентов с ишемиче…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (81603315, 81603316), Ключевым планом R и D провинции Цзянси в Китае (20171ACH80001), проекты промышленного и академического сотрудничества в колледжах и университетах провинции Фуцзянь в Китай (2018Y41010011).
Anatomical Microscope | Leica (Germany) | S8 | Microscopic operating instrument |
Blade | Gellette | / | Cutting brain sections |
Constant Temperature Shaking Bed | Taicang Experimental Equipment Factory | THZ-C | To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature |
Digital Camera | Canon | 700D | For taking pictures of TTC staining |
Electric Shaver | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 3000# | Removal of hair from the neck of rats |
Forceps Hamostatic | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 14 cm | Using for brain removing |
Image Pro Plus Software | Media Cybernetics Inc. | 6.0 | Analyze the infarct volume |
Isoflurane | RWD Life Science | 217170702 | Anesthetic gas |
Microforceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
Microshear | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
Ophthalmic Forceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Auxiliary skin and muscle anatomy |
Pphthalmic Scissors | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Using for cutting the skin of neck |
Rat Brain Slice Mold | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 400 g | For standard, uniform cutting of brain tissue |
Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus | Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd. | ZH-300B | To test the sensorimotor function |
Small Animal Anaesthesia Machine | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | ABM3000 | A gas anesthetic machine |
Small Animal Thermostat | Beijing Damida Technology Co., Ltd. | DM.7-YLS-20A | To maintain animal body temperature constant during operation |
Surgical Scissors | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 16 cm | Using for decapitate and brain removing |
Suture | Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd. | 4-0 / 5-0 | Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations |
Thread Bolt | Beijing Cinontech Co. Ltd. | 2636/2838/3040/3043-A4 | Blockage of the middle cerebral artery in rats |
5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC) | Sigma | LOT#BCBP3272V | Brain section staining reagent |