Aquí se presenta un protocolo para el modelo de fragmentación crónica del sueño (LCR) logrado por un rotor orbital controlado eléctricamente, que podría inducir déficit cognitivo confirmado y comportamiento similar a la ansiedad en ratones jóvenes de tipo salvaje. Este modelo se puede aplicar para explorar la patogénesis de la alteración crónica del sueño y trastornos relacionados.
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Artículo de método
Un modelo crónico de fragmentación del sueño usando rotor orbital vibratorio para inducir déficit cognitivo y comportamiento similar a la ansiedad en ratones jóvenes de tipo salvaje
En este artículo
Resumen
Resumen
La alteración del sueño es generalmente común en las poblaciones como una enfermedad crónica o un evento denunciado. Se propone que la alteración crónica del sueño esté estrechamente relacionada con la patogénesis de las enfermedades, especialmente las enfermedades neurodegenerativas. Recientemente encontramos que 2 meses de fragmentación del sueño iniciaron cambios conductuales y patológicos similares a la enfermedad de Alzheimer (AD) en ratones jóvenes de tipo salvaje. En este documento, presentamos un protocolo estandarizado para lograr la fragmentación crónica del sueño (LCR). Brevemente, CSF fue inducido por un rotor orbital que vibraba a 110 rpm y operaba con un ciclo repetitivo de 10 s-on, 110 s-off, durante la fase light-ON (8:00 AM-8:00 PM) continuamente durante un período de hasta 2 meses. Las deficiencias del aprendizaje espacial y la memoria, el comportamiento similar a la ansiedad pero no similar a la depresión en ratones como consecuencias del modelado de CSF, fueron evaluados con el laberinto de agua morris (MWM), el reconocimiento de objetos novedoso (NOR), la prueba de campo abierto (OFT) y la prueba de natación forzada (FST). En comparación con otras manipulaciones del sueño, este protocolo minimiza las labores de manipulación y maximiza la eficiencia del modelado. Produce fenotipos estables en ratones jóvenes de tipo salvaje y se puede generar potencialmente para una variedad de propósitos de investigación.
Introducción
La alteración del sueño es cada vez más común tanto en pacientes con afecciones que alteran el sueño como en personas sanas con eventos que alteran el sueño. Se ha observado que los pacientes con enfermedades neurodegenerativas, dolor crónico, estrés emocional, enfermedades del sistema respiratorio, enfermedades del sistema urinario, etc., suelen quejarse de experiencias desagradables de sueño1,2,3,4,5. Apnea obstructiva del sueño (AOS), movimientos periódicos de las extremidades en el sueño (PLMS), insomni....
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Protocolo
Este protocolo fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales del Hospital Tongji, Tongji Medical College, Universidad de Ciencia y Tecnología de Huazhong.
1. Detección de ratones y preparación para el experimento
- Seleccione ratones machos adultos de tipo salvaje (8-10 semanas de edad) con un peso de 20-28 g para todo el experimento.
NOTA: Los ratones tipo salvaje C57BL/6 se obtienen del Centro de Investigación Hubei para Animales de Laboratorio, Hubei, China. - Asigne aleatoriamente todos los ratones al CSF y al grupo de control. Alberga de 3 a 5 ratones en cada jaula para evitar el estrés de ais....
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Resultados
Todos los resultados y cifras representativas se reprodujeron de nuestra reciente publicación21. La reutilización de las cifras fue permitida por el diario original.
Todo el diseño experimental se ilustra en el orden del tiempo, lo que indica el tiempo del modelado CSF, las pruebas de comportamiento de MWM, NOR, OFT y FST (Figura 1A). Obtuvimos pesos de ratones cada semana del CSF y los grupos de control, para monitorear sus condiciones gen.......
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Discusión
Los pasos críticos en el protocolo actual incluyen la configuración de máquinas de fragmentación del sueño con los parámetros optimizados de acuerdo con el propósito del estudio y el mantenimiento de los ratones en un ambiente de vida cómodo y tranquilo durante todas las sesiones de modelado. También es crucial decidir el momento adecuado para interrumpir o detener la fragmentación del sueño y organizar pruebas de comportamiento para esos ratones. Al igual que otros modelos de manipulación del sueño, es importante realiz.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros competidores.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (61327902-6 a W. Wang y 81801318 a F.F. Ding). Reconocemos a la Dra. Sigrid Veasy por establecer el sistema experimental SF y proporcionar amablemente detalles técnicos. Reconocemos al Dr. Maiken Nedergaard por comentarios instructivos para experimentos relacionados.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sistema de seguimiento del comportamiento de cualquier laberinto | Stoelting, Inc, | USA-Un | sistema de seguimiento de video que se utilizó para registrar el seguimiento del comportamiento de los ratones. |
| Ratones C57BL/6J Centro de | Investigación de Hubei para Animales de Laboratorio, Hubei, China. | - | compraron ratones machos sanos C57BL/6J de 10 a 12 semanas del Centro de Investigación de Hubei para Animales de Laboratorio |
| Software Graphpad Prism 6.0 | Graphpad Software,Inc.USA-Se | utilizó el software Graphpad Prism 6.0 para dibujar gráficos estadísticos. | |
| Sistema de laberinto de agua Morris | Shanghai XinRuan Information Technology Co., Ltd, China | XR-XM101 | El sistema se utilizó para realizar la prueba del laberinto de agua de Morris |
| Rotor orbial | Shanghai ShiPing Laboratory Equipment Co., Ltd, China | SPH-331 | El rotor orbital se utilizó para establecer el modelo de fragmentación crónica del sueño |
| Temporizador de estado sólido | OMRON Corporation, Kyoto, Japón | H3CR-F8-300 | El tiempo de estado sólido se utilizó para controlar la frecuencia y el tiempo de funcionamiento del rotor Tanque de |
| madera sin brillo | : | longitud 30 cm, ancho 28 cm, altura 35 cm El tanque se utilizó para realizar pruebas de campo abierto y pruebas de reconocimiento de objetos novedosos |
Referencias
- Peter-Derex, L., Yammine, P., Bastuji, H., Croisile, B. Sleep and Alzheimer's disease. Sleep Medicine Reviews. 19, 29-38 (2015).
- Mathias, J. L., Cant, M. L., Burke, A. L. J. Sleep disturbances and sleep disorders in adults living with chronic pain: a meta-analysis. Sleep Me....
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Reimpresiones y permisos
