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Artículo de método

Andamio compuesto de colágeno-quitosano cargado de doxiciclina para la curación acelerada de heridas diabéticas

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DOI:

10.3791/62184

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21 de agosto de 2021

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En este artículo

Resumen

El andamio DOX-CL preparado satisfizo los requisitos previos de un apósito DW ideal en resistencia mecánica, porosidad, absorción de agua, tasa de degradación, liberación sostenida, propiedades antibacterianas, biocompatibilidad y antiinflamatorias, que se consideran esenciales para la recuperación del tejido dañado en los trabajadores de la muerte.

Resumen

Una complicación importante de la diabetes mellitus son las heridas diabéticas (DW). La fase prolongada de inflamación en diabetes obstruye las etapas posteriores de lesión que lleva a la herida retrasada que cura. Se seleccionó la doxiciclina (DOX), como un fármaco potencial de elección, debido a sus propiedades antibacterianas junto con sus propiedades antiinflamatorias reportadas. El estudio actual tiene como objetivo formular andamios no reticulados (NCL) y reticulados (CL) cargados con DOX y evaluar su capacidad curativa en condiciones diabéticas. El resultado de la caracterización de los andamios revela que el andamio DOX-CL tiene una porosidad ideal, una baja tasa de hinchazón y degradación, y una liberación sostenida de DOX en comparación con el andamio DOX-NCL. Los estudios in vitro revelan que el andamio DOX-CL fue biocompatible y mejoró el crecimiento celular en comparación con los grupos de control y tratados con andamios CL. Los estudios antibacterianos han demostrado que el andamio DOX-CL era más efectivo que el andamio CL contra las bacterias más comunes que se encuentran en DW. Usando el streptozotocin y el modelo dieta-inducido alto en grasas de DW, un índice perceptiblemente (p≤0,05) más rápido de contracción de la herida en el grupo tratado andamio de DOX-CL fue observado comparado a ésos en el andamio del CL tratados y los grupos de control. El uso del andamio DOX-CL puede resultar ser un enfoque prometedor para el tratamiento local para los trabajadores de la mujer.

Introducción

La diabetes mellitus (DM) es una condición en la que el fracaso del cuerpo para administrar insulina o reaccionar a sus resultados en la digestión anormal de azúcares directos provoca un aumento de la glucosa en sangre 1. El enredo más consecutivo y aplastante de la DM es la herida diabética (DW). Aproximadamente el 25% de los pacientes con DM tienen la oportunidad de acumular una DW en su vida 1. La cura obstaculizada de DW se acredita a un triopathy del DM: immunopathy, vasculopathy, y neuropatía. Siempre que la DW no se trate, puede dar lugar al desarrollo de gangrena, lo que provoca la extracción del órgano en cuesti....

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Protocolo

Todos los procedimientos animales realizados fueron aprobados por el comité ético animal institucional de JSS College of Pharmacy, Ooty, India.

1. Preparación de andamios porosos cargados DOX por método de liofilamiento

  1. Agregue 1.2 g de COL a 100 mL de agua (por ejemplo, Millipore) y manténgalo a un lado para la hinchazón.
  2. Revuelva la dispersión de COL hinchada a 2000 rpm durante la noche para asegurar la disolución completa de COL.
  3. Preparar la solución de CS disolviendo aproximadamente 0,8 g de CS en 100 mL de ácido acético al 1%.
  4. Revuelva la solución CS durante la noche a 2000 rpm para asegurar una ....

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Resultados

Caracterización del andamio NCL y CL cargado dox
En la examinación visual, el ncl y el andamio del CL fueron encontrados para ser crema en color. Además, ambos andamios parecen ser como una esponja, rígidos e inelásticos cuando se examinan físicamente. Las imágenes SEM de los andamios NCL y CL se muestran en la Figura 1. De la figura, estaba claro que había una disminución en el tamaño de los poros después de la reticulación mediante la formación de enlaces intermolecular.......

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Discusión

El objetivo principal de este estudio fue determinar el efecto del andamio COL-CS cargado dox en la curación de DW en ratas. El CL y el NCL fueron preparados y evaluados en términos de morfología, índice de la hinchazón, cinética in vitro del lanzamiento, y biocompatibilidad.

Caracterización del andamio NCL y CL cargado dox
Se encontró que los andamios preparados eran porosos con poros interconectados. Estos poros interconectados aseguran la naturaleza porosa y esponjosa qu.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Agradecimientos

Los autores agradecen al Dr. Ashish D Wadhwani. (Profesor Asistente y Jefe del Departamento de Biotecnología Farmacéutica, JSS College of Pharmacy, Ooty, India) por ayudar en los estudios de viabilidad de células in vitro.

Los autores desean agradecer al Departamento de Ciencia y Tecnología - Fondo para la Mejora de la Infraestructura de Ciencia y Tecnología en Universidades e Instituciones de Educación Superior (DST-FIST), Nueva Delhi, por apoyar a nuestro departamento.

Los autores también quieren dar las gracias al Sr. Sanju. S y el Sr. Sriram. Estudiantes de Narukulla M. Pharm por su apoyo en la sesió....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Clorhidrato de carbodiimida de 1-etil-(3-3-dimetil aminopropilo) (EDC)Merck Millipore, Mumbai, IndiaE7750
Ácido 2-(N-morfolino) etano sulfónico (MES)Merck Millipore, Mumbai, India137074 bromuro
de 3-(4, 5 dimetil tiazol-2 il) -2, 5-difenil tetrazolio (MTT)Thermo Fisher, Mumbai, IndiaM6494
Vérticede congeladorLabline Instruments, Kochi, India
Saco de diálisisMerck Millipore, Mumbai, IndiaD6191-Anchura plana media 25 mm (1,0 pulg.), MWCO 12.000 Da
DoxiciclinaSigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, IndiaD9891
Elisa kitR& D SystemsRMP900
Escherichia coli (E. coli)Colección Nacional de Microorganismos Industriales, Pune, IndiaNCIM 2567
EtanolMerck Millipore, Mumbai, India100983
Liofilizador-SZ042Instrumentos de laboratorio Sub-Zero, Chennai, India
Agitador mecánico-RQ-122/DInstrumentos de laboratorio Remi, Mumbai, India
Peso molecular medio ChitosanSisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India18824
Microtomo-RM2135Leica, Reino Unido
Células embrionarias de fibroblastos de ratón (3T3-L1)Centro Nacional de Ciencias Celulares, Pune, India
Lector de placas múltiples -Inifinte M200 ProTecan Instrumentos, Suiza
N-hidroxisuccinimida (NHS)Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India130672
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)Colección Nacional de Microorganismos Industriales, Pune, IndiaNCIM 2036
Microscopía electrónica de barrido (SEM)-S-4800Hitachi, India
Pellets de hidróxido de sodio (NaOH)Productos químicos finos de Qualigen, Mumbai, IndiaQ27815
Staphylococcus aureus (S. aureus)Colección Nacional de Microorganismos Industriales, Pune, IndiaNCIM 5022
Staphylococcus epidermis (S. epidermis)Colección Nacional de Microorganismos Industriales, Pune, IndiaNCIM 5270
Estreptozotocina (STZ)Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India14653
Rata tipo 1 ColágenoSigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, IndiaC7661
Ultravioleta– espectroscopía visible-1700Shimadzu

Referencias

  1. International Diabetes Federation. IDF Diabetes Atlas, 9th edn. , Brussels, Belgium. Available from: https://www.diabetesatlas.org (2019).
  2. Falanga, V. Wound healing and its impairment in the diabetic foot. The Lancet. 366 (9498), 1736-1743 (2005).
  3. Frykberg, R. G., Banks, J.

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Reimpresiones y permisos

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